VII. Общие пути катаболизма
Окислительное декарбоксилирование пирувата
Этот процесс отщепления СО2 от пировиноградной кислоты и переноса ацетильного остатка на коэнзим А с образованием ацетил-КоА осуществляется с помощью
мультиферментного пируватдегидрогеназного комплекса (ПДГ).
В состав комплекса входят три фермента (Е1 , Е2 , Е3 ) и пять кофакторов:
|
тиаминпирофосфат |
(ТПФ) |
простетические группы - |
|
|||
|
липоевая кислота |
( ЛК) |
прочно связаны с |
|
|||
|
ФАД |
НАД |
апоферментами |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
+ |
|
коэнзим А |
||
|
|
|
|
|
|
|
|
||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
(HS-КоА) |
|
коферменты – легко диссоциируют |
||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
от апоферментов |
||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
+НАД+ + НSКоА |
|
СО2+ацетил-SКоА+НАДН Н+ |
||
|
|
|
|
|
|
Пируват |
|||||||
|
|
|
|
|
|
|
|||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
О
Е1 –ТПФ катализирует отщепление СО2 от пирувата и перенос гидроксиэтильного остатка на ТПФ.
Е2 –ЛК переносит гидроксиэтильный остаток от ТПФ на простетическую группу – ЛК, при этом дисульфидная связь разрывается, а ацетильный остаток и водород
присоединяются к ЛК. Затем ацетильный остаток переносится с ЛК на |
НSКоА с |
образованием ацетил-SКоА, а ЛК восстанавливается до дигидро-ЛК. |
|
Е3-ФАД катализирует дегидрирование дигидро-ЛК, которая переходит в исходную окисленную форму, а водороды восстанавливают ФАД. На последней стадии
водороды переносятся на НАД+ с образованием НАДН Н+. |
45 |
VIII. Цикл трикарбоновых кислот
Цикл трикарбоновых кислот (цикл Кребса, цитратный цикл ) – это циклическая последовательность ферментативных реакций, в результате которых ацетил-SКоА (СН3СО SКоА) - продукт катаболизма белков, жиров и углеводов, окисляется до углекислого газа СО2 с образованием атомов водорода ( Н), которые используются для восстановления первичных акцепторов цепи переноса электронов: НАД+ и ФАД.
(С2)
(С6)
(С4) |
(С6) |
|
|
||
|
СО2 |
|
(С4) |
α- |
|
(С5) |
||
|
||
|
СО2 |
|
(С4) |
|
|
|
(С4) |
|
|
(С4) |
Метаболиты и ферменты ЦТК локализованы в матриксе и внутренней мембране митохондрий. Они функционально сопряжены с митохондриальными цепями переноса электронов. Поэтому восстановительные эквиваленты (4 пары водородов Н), образующиеся при окислении метаболитов цикла Кребса, через первичные акцепторы
НАДН Н + |
и |
ФАДН2 передаются в дыхательную цепь для восстановления атомов |
|||
кислорода |
О2 с образованием молекул |
Н2О. |
При этом образуется АТФ |
в ходе |
|
окислительного фосфорилирования. |
|
|
|
||
Ацетил-КоА |
– «активная уксусная кислота» |
(содержит 2 атома углерода |
С2), |
||
образуется при окислительном декарбоксилировании пирувата. В первой реакции она конденсируется с четырехуглеродным оксалоацетатом ( С4), при этом образуется шестиуглеродный цитрат ( С6). Затем от цитрата последовательно отщепляются два углерода в виде двух молекул СО2, в результате чего вновь регенерируется оксалоацетат (С4). Таким образом, суммарное уравнение ЦТК:
46 |
СН3СООН + 2Н2О |
|
2СО2 + 8Н |
|
1
SКоА конденсация
НSКоА
цитратсинтаза
8
дегидрирование
оксалоацетат |
|
цитрат |
|
|
|
2 |
а |
|
|
|
|
||||
|
|
|
|
||||
|
|
|
|
|
|
||
|
дегидратация |
||||||
малат- |
ЦТК |
аконитаза |
|
|
|
|
|
дегидрогеназа |
|
|
|
|
|
||
|
|
|
|
|
|
|
|
7
гидратация
малат |
|
|
|
фумараза |
|
цис-аконитат |
|
НАДНН+ |
аконитаза |
2в |
|
|
|
гидратация |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
ФАДН2
фумарат |
|
|
|
|
изоцитрат-изоцитрат |
|
|||||||||||
|
|
|
|
сукцинат- |
|
|
|
|
3 |
||||||||
6 |
|
|
|
|
|
|
|
дегидрогеназа |
|
|
|||||||
|
|
|
дегидрогеназа |
|
|
|
|
|
декарбокси- |
||||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||||||||
дегидрирование |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
лирование |
|
|
|
|
|
|
|
|
сукцинил- |
|
α-кето- |
СО2 |
|||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
||||||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
глутарат- |
|
|
|
||||||
|
|
|
|
|
|
|
тиокиназа |
|
дегидрогеназа |
|
|
|
|||||
|
|
|
|
сукцинат |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||||
|
|
|
|
НSКоА |
|
SКоА |
|
НSКоА α-кетоглутарат |
|||||||||
|
|
|
|
|
ГТ |
|
|
|
|
|
|
|
|
||||
|
|
|
|
|
ГДФ+Ф |
|
СО2 |
|
|
|
|||||||
|
|
|
|
|
|
Ф |
|
|
|
|
|||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
сукцинил SКоА |
|
|
|
|||||
|
|
5 |
|
|
|
|
|
|
|
|
4 |
|
|
|
|
||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|||||||
|
|
|
|
субсратное |
|
|
|
|
|
|
|
|
окислительное |
47 |
|||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||||||
|
|
фосфорилирование |
|
|
|
|
|
декарбоксилирование- е |
|||||||||
Энергетический баланс ЦТК
В ЦТК при окислении одной молекулы «активного ацетата» образуются восстановленные коферменты: 3 молекулы НАДН Н + и 1 молекула ФАДН 2. Они далее окисляются в дыхательной цепи, при этом за счет окислительного фосфорилирования образуется по 3АТФ на каждую НАДН Н + и по 2АТФ на ФАДН 2. Таким образом, за счет окислительного фосфорилирования образуется (3х3 + 2х1 = 11) АТФ.
Кроме того, в цикле Кребса имеется реакция субстратного фосфорилирования , в которой за счет расщепления макроэргической связи субстрата (сукцинил SКоА) образуется новое макроэргическое соединение - ГТФ. Далее ГТФ отдает свой фосфат на АДФ с образованием 1 молекулы АТФ . Таким образом, всего при окислении 1 моля ацетилКоА образуется (11 + 1 = 12) АТФ.
|
Регуляция ЦТК |
||||
пируват |
АТФ, ацетилКоА, НАДН, |
||||
|
|||||
пируват |
жирные кислоты |
|
|
|
|
дегидрогеназный |
АМФ, НSКоА, НАД+, Са2+ |
||||
комплекс |
|||||
ацетил-КоА |
|
|
|
||
|
АТФ, НАДН, сукцинил-КоА |
||||
|
АДФ |
|
|
|
|
цитрат |
цитрат |
|
Самым важным фактором |
|
|
синтаза |
|
регуляции цикла является |
|
||
|
|
|
соотношение НАДН/НАД+. |
|
|
оксалоацетат |
|
|
|
||
изоцитрат |
|||||
ЦТК |
|
АТФ |
|||
малат |
изоцитрат |
||||
|
|
|
|||
дегидрогеназа |
дегидрогеназа |
АДФ, Са2+ |
|||
НАДН |
|
|
|
|
|
малат |
α-кетоα-кетоглутарат |
||||
ФАДН2 |
глутарат- |
НАДН, сукцинил-КоА |
|||
|
дегидрогеназа |
Са2+ |
|||
|
|
||||
сукцинат |
сукцинил SКоА |
||||
дегидрогеназа |
|
|
|
|
|
|
ингибирование |
ГТФ |
активация |
|
|
48 |
|
Задания для самопроверки и самокоррекции
Задача 1.
Нарушение последовательности ферментов при реконструкции цепи тканевого
дыхания в эксперименте полностью блокирует его активность. Каким свойством компонентов необходимо руководствоваться в построении активной цепи переноса электронов?
А, Молекулярной массой В. Редокс-потенциалом С. Структурой кофакторов
D.Электрофоретической подвижностью.
Задача 2. Сопряжение тканевого дыхания с фосфорилированием требует
наличия градиента концентрации Н+ между двумя сторонами внутренней митохондриальной мембраны. Какую роль он играет в синтезе АТФ?
А. Катализирует реакцию синтеза АТФ
В. Активирует АТФ-синтетазу С. Участвует в образовании промежуточных высокоэнергетических соединений
Д. Способствует выделению энергии в дыхательной цепи
Е. Переводит компоненты дыхательной цепи в высокоэнергетическую форму
путем изменения их конформации.
Задача 3. Животные содержались на рационе, лишенном некоторых витаминов.
Отсутствие какого витамина приведет к нарушению активности дегидрогеназ тканевого дыхания?
А. РР В. Пиридоксина
С. Фолиевой кислоты D. Кобаламина
Е.. Рутина
Задача 4.Студенты в лабораторной работе in vitro исследовали действие малоната на ряд ферментов аэробного окисления глюкозы. Накопление, какого метаболита ЦТК они обнаружили?
А. Малата В. Цитрата
С. Лактата
D. Изоцитрата Е. Сукцината
Правильность решения проверьте, сопоставив их с эталонами ответов.
1-B, 3-A, 5-C.
49