Материал: vse_metody_MIKROB

-лепроматозная – характеризуется высыпаниями на коже и слизистых оболочках носа и ротовой полости, которые затем превращаются в инфильтраты (лепромы). При диффузной инфильтрации лицо больного напоминает морду льва. На поздней стадии болезни образуются множественные лепромы, выпадают брови и ресницы, формируются парезы, параличи;

-недифференцированная (сочетанная) форма характеризуется кожными высыпаниями и поражением периферических нервных стволов (моно- и полиневриты).

Микробиологическая диагностика.

1.Бактериоскопический метод при лепроматозной форме заболевания – окраска мазков из исследуемого материала по Цилю-Нильсену. Материал на исследование: соскобы с кожи и со слизистых оболочек носа, пунктаты лимфатических узлов.

2.Серологический метод: ИФА.

3.ПЦР.

Специфическая профилактика и специфическое лечение не разработаны.

ПРАКТИЧЕСКАЯ РАБОТА.

1.Изучение схемы бактериологического исследования мазков со слизистой оболочки ротоглотки и носа больного при подозрении на дифтерию.

I этап исследования.

Посев исследуемого материала на 5% кровяной агар. Посевы инкубируют при 370С 24 часа.

II этап исследования.

1.Изучение характера роста на кровяном агаре, приготовление мазков из подозрительных колоний, окраска по Нейссеру, микроскопия.

2.С целью выделения чистой культуры производят пересев подозрительных колоний на 10% сывороточный агар. Посевы инкубируют при 370С 24 часа.

III этап исследования.

1.Изучение чистоты выделенной культуры макро- и микроскопически.

2.С целью идентификации выделенной культуры производят посев в среды с глюкозой, сахарозой, мочевиной и цистином. Для определения токсигенности культуры ставят реакцию преципитации в геле.

IV этап исследования.

1.Учет биохимических свойств.

2.Учет пробы на токсигенность.

3.Вывод (определение вида выделенной культуры и ее токсигенности).

2.Световая микроскопия препарата из мокроты больного туберкулезом в окраске по Цилю-Нильсену.

9

Занятие №26

Тема. Микробиологическая характеристика патогенных анаэробов.

Цель занятия. Изучить характеристику возбудителей неклостридиальных анаэроб-

ных инфекций, возбудителей газовой гангрены, столбняка, ботулиз-

ма, микробиологическую диагностику вызываемых ими заболеваний.

Изучить схему бактериологического метода исследования при по-

дозрении на газовую гангрену. Изучить препараты для специфиче-

ской профилактики и специфического лечения газовой гангрены,

столбняка, ботулизма.

I.Теоретические знания:

1.Неклостридиальные анаэробы в патологии человека, микробиологическая диаг-

ностика.

2.Характеристика возбудителей газовой гангрены, микробиологическая диагно-

стика, специфическая профилактика и лечение.

3.Характеристика возбудителя псевдомембранозного колита, микробиологическая диагностика.

4.Характеристика возбудителя столбняка, специфическая профилактика и лечение.

5.Характеристика возбудителя ботулизма, микробиологическая диагностика, спе-

цифическое лечение.

II.Практические навыки:

1.Изучение схемы бактериологического исследования отечной жидкости при по-

дозрении на газовую гангрену. Учет и интерпретация результатов исследования.

2.Световая микроскопия готовых препаратов чистых культур бактероидов, возбу-

дителей газовой гангрены, столбняка, ботулизма, окрашенных по Граму.

1

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ К ЗАНЯТИЮ

1.Неклостридиальные анаэробы в патологии человека, микробиологическая диагностика.

Неклостридиальные (неспорообразующие) анаэробы являются представите-

лями симбионтной микробиоты ротовой полости, верхних дыхательных путей, кишечника, влагалища и др. биотопов макроорганизма. По таксономической характеристике они относятся к различным родам (табл. 2).

Чистые культуры неклостридиальных анаэробов. Окраска по Граму.

2

Неклостридиальные анаэробы (НА): условно-патогенные микроорганизмы, которые могут вызывать различные эндогенные инфекции при снижении иммунного статуса организма.

Факторы патогенности для большинства НА:

1.Факторы адгезии.

2.Капсула.

3.Ферменты патогенности (гиалуронидаза, нейраминидаза, фибринолизин).

4.Эндотоксин, цитотоксин.

НА чаще вызывают заболевания в ассоциациях, что приводит к более быстрому и тяжелому течению заболевания.

Все НА, за исключением бифидо- и лактобактерий, могут вызывать следующие гнойно-септические заболевания:

послеоперационные абдоминальные инфекции: перитонит, аппендицит, абсцесс печени;

гинекологические инфекции: септический аборт, эндометрит; аспирационную пневмонию, абсцесс легкого; сепсис, эндокардит;

флегмоны, абсцессы кожи и мягких тканей, остеомиелит (при ушибах и травмах); одонтогенные инфекции после удаления или пломбирования зубов.

Лактобактерии значительно реже, чем другие НА, вызывают заболевания и могут быть причастны к формированию кариеса, острого язвенного стоматита, язвенного вульвита.

Бифидобактерии чрезвычайно редко, на фоне глубокого иммунодефицита, могут вызывать септицемию.

Микробиологическая диагностика.

Микробиологическая диагностика необходима для этиологической расшифровки заболеваний и определения чувствительности возбудителей к антибиотикам.

Материал на исследование (в зависимости от клинической формы): кровь, гной, пунктаты абсцессов и полостей, отделяемое из глубоких отделов ран, язв, свищей и др.

1.Экспресс-методы:

микроскопия нативных мазков в окраске по Граму; газовая хроматография, основанная на обнаружении продуктов метаболизма

анаэробов (летучие жирные кислоты – муравьиная, уксусная, пропионовая).

2.Бактериологический метод (основной). Материал доставляют в одноразовых шприцах или в стерильных пробирках с транспортной средой для анаэробных микроорганизмов. Необходимое условие: быстрая (не позднее 2-х часов) доставка исследуемого материала в лабораторию. Производят посев на специальные для анаэробов питательные среды. Посевы инкубируют в анаэростатах, заполненных газо-

3

вой смесью (80% N2, 10% H2 и 10% CO2), или с помощью AnaeroHiGas Pak, с дальнейшей идентификацией выделенных возбудителей и определением чувствительности к антибиотикам.

Специфическая профилактика и специфическая терапия не разработаны.

2.Характеристика возбудителей газовой гангрены, микробиологическая диагностика, специфическая профилактика и лечение.

Основной возбудитель газовой гангрены Clostridium perfringens (70-80%).

Реже заболевания вызывают: Clostridium novyi (20-40%), Clostridium septicum (до 20%), Clostridium histolyticum (4-6%) и др.

Морфо-тинкториальные свойства: C.perfringens крупные, неподвижные грамположительные палочки, имеют капсулу, образуют спору, расположенную центрально или субтерминально. Диаметр споры превышает диаметр клетки.

Чистая культура C.perfringens. Окраска по Граму.

Культуральные свойства: факультативный анаэроб. На среде Китта-Тароцци

– помутнение, на среде Вильсона-Блера – рост в виде черных колоний. Характерной особенностью роста возбудителя на этих средах является интенсивное газообразование с разрывами агара. На кровяном агаре Цейсслера растут в виде гладких сероватых колоний с зонами гемолиза.

Рост C.perfringens на специальной среде Вильсона-Блера.

4