Материал: vse_metody_MIKROB

ные с подлежащей тканью. Повышается сосудистая проницаемость и возникает отек ткани ротоглотки и подкожной клетчатки шеи. Экзотоксин поступает в кровь и связывается с мембранами клеток органов-мишеней (миокардиоциты, почечный эпителий, клетки коркового и мозгового вещества надпочечников, периферические нервы). Ингибирование токсином белкового синтеза в клетках миокарда приводит к структурным и функциональным нарушениям тканей, способным вызвать смерть больного. В нервной ткани происходит демиелинизация волокон, приводящая к развитию параличей и парезов. В почечной ткани развивается токсический нефроз.

Клинические формы дифтерии различают по локализации, характеру течения и степени тяжести.

По локализации выделяют следующие клинические формы:

1. Дифтерия ротоглотки (90-95%).

Пленчатые фибринозные налеты при дифтерии ротоглотки.

2.Дифтерия гортани.

3.Дифтерия редких локализаций (носа, глаз, кожи, уха, половых органов и др.).

При поражении нескольких органов выделяют комбинированную форму заболевания.

Микробиологическая диагностика.

Материал на исследование: слизь или отделяемое пораженного органа (ротоглотка, нос и др.) забирают стерильным тампоном не позднее 12 часов с момента обращения больного, до назначения антибиотиков.

1.Бактериологический метод: посев исследуемого материала на 5% кровяной агар, выделение чистой культуры на 10% сывороточном агаре. Идентификацию возбудителя проводят по морфо-тинкториальным, культуральным, биохимическим свойствам и по определению продукции экзотоксина (гистотоксина).

2.ПЦР: определяют ДНК C.diphtheriae и наличие гена tox+.

Для определения гена tox+помимо ПЦР используют ИФА, РНГА и реакцию преципитации в геле (см. учебно-методическое пособие «Учение об инфекции и иммунитете. Основы иммунологии»).

4

Специфическая профилактика дифтерии:

АКДС-вакцина (адсорбированная коклюшно-дифтерийно-столбнячная вакцина). АДС-анатоксин (адсорбированный дифтерийно-столбнячный анатоксин). АДС-м-анатоксин (дифтерийно-столбнячный анатоксин с пониженным содержани-

ем антигенов).

АД-м-анатоксин (очищенный адсорбированный дифтерийный анатоксин с пониженным содержанием антигена).

Препараты с пониженным содержанием антигенов предназначены для профилактики у детей старше 6 лет, подростков и взрослых.

В настоящее время для профилактики дифтерии также используются зарубеж-

ные препараты.

Для выявления уровня коллективного противодифтерийного иммунитета определяют его напряженность серологическим методом в РНГА, ИФА.

Специфическое лечение дифтерии: сыворотка противодифтерийная антитоксическая лошадиная очищенная. Сыворотку вводят дробно (см. учебно-

методическое пособие «Учение об инфекции и иммунитете. Основы иммунологии»).

2.Характеристика возбудителей туберкулеза, микробиологическая диагностика и специфическая профилактика.

Микобактерии широко распространены в окружающей среде и могут вызывать различные заболевания: туберкулез, туберкулезоподобные заболевания, другие микобактериозы, проказу.

Вызывающие туберкулез виды микобактерий объединены в комплекс Mycobacterium tuberculosis, включающий: M.tuberculosis (92%), M.bovis (5%) (возбу-

дитель туберкулеза крупного рогатого скота), M.africanum (3%).

Морфо-тинкториальные свойства: тонкие, прямые или слегка изогнутые палочки. Реже встречаются зернистые и нитевидные формы. Спор, капсулу, жгутиков не имеют. Кислотоустойчивы за счет наличия в клеточной стенке высокого содержания липидов и миколовых кислот. По методу Циля-Нильсена окрашиваются в красный цвет.

M.tuberculosis в мокроте. Окраска по Цилю-Нильсену.

5

Культуральные свойства: аэробы, требовательны к условиям культивирования, длительно (3-8 недель) растут на плотных (среда Левенштайна) и жидких питательных средах с обязательным присутствием различных факторов роста. На плотных питательных средах образуют сухие морщинистые кремового цвета колонии (R-форма).

Рост M.tuberculosis на плотной питательной среде.

Основной фактор патогенности: корд-фактор (токсический гликолипид кле-

точной стенки). Его действие: вызывает гибель фагоцитов; подавляет миграцию лейкоцитов;

оказывает токсическое действие на ткани.

Возбудитель сенсибилизирует ткани и вызывает характерную для туберкулеза

аллергическую реакцию гиперчувствительности замедленного типа.

Источник инфекции: больной человек.

Пути заражения: аэрогенный, алиментарный, контактно-бытовой.

Основная клиническая форма заболевания: туберкулез легких.

Патогенез: в зоне проникновения микобактерий возникает первичный туберкулезный комплекс, состоящий из воспалительного очага некроза, пораженных регионарных лимфатических узлов и «дорожки» измененных лимфатических сосудов между ними. Распространение микробов может происходить бронхогенно, лимфогенно и гематогенно. При заживлении очаг воспаления рассасывается, некротические массы уплотняются, а вокруг формируется соединительнотканная капсула (очаг Гона), микобактерии трансформируются в L-формы. Активация этих очагов ведет к развитию вторичного туберкулеза.

Иммунитет нестерильный, обусловлен наличием в организме L-форм микобактерий. Основной механизм иммунитета – клеточный.

В развитии болезни выделяют первичный, диссеминированный и вторичный туберкулез.

6

Различают 3 клинические формы заболевания: первичная туберкулезная интоксикация у детей и подростков, туберкулез органов дыхания, туберкулез других органов и систем.

Микробиологическая диагностика.

Материал на исследование: мокрота (3 раза с интервалом 2-3 дня), промывные воды бронхов и др.

1.Бактериоскопический метод:

-световая микроскопия в окраске по Цилю-Нильсену;

-люминесцентная микроскопия.

Для повышения концентрации возбудителя в исследуемом материале используют методики обогащения, например, флотацию: мокроту гомогенизируют, затем добавляют ксилол, толуол или бензин, смесь встряхивают, добавляют дистиллированную воду. Ксилол вместе с микобактериями всплывает наверх в виде пленки. Из нее готовят мазки.

2.Бактериологический (основной) метод:

-посев на плотные питательные среды;

-использование автоматизированных систем (BACTEC и др.) – сочетание плотной и жидкой питательных сред.

3.ПЦР.

4.Аллергологический (туберкулинодиагностика) метод: ранняя диагностика ту-

беркулеза у детей и подросток (внутрикожная проба Манту с туберкулином). Проба свидетельствует не о заболевании, а об инфицировании.

7

В дополнение к пробе Манту применяют диаскинтест с аллергеном туберкулезным рекомбинантным, который содержит антигены только вирулентных штаммов M. tuberculosis. Положительная реакция на этот аллерген бывает только у лиц, инфицированных возбудителем туберкулеза, и отсутствует у лиц, вакцинированных БЦЖ.

Специфическая профилактика – живая туберкулезная вакцина BCG, жи-

вая туберкулезная вакцина BCG-м.

3. Характеристика возбудителя проказы, микробиологическая диагностика.

Возбудитель проказы (лепры) – Mycobacterium leprae.

Морфо-тинкториальные свойства: прямые или слегка изогнутые палочки, неподвижны, спор и капсулу не имеют. Кислотоустойчивы, окрашиваются по ЦилюНильсену в красный цвет. В мазках из очагов поражения располагаются внутриклеточно шаровидными скоплениями или параллельными группами («пачки сигар»).

M.leprae в мазке из очага поражения. Окраска по Цилю-Нильсену.

Культуральные свойства: не растут на питательных средах. Являются облигатными внутриклеточными паразитами.

Источник инфекции: больной человек.

Пути заражения: воздушно-капельный, контактный.

Для проказы характерен очень длительный инкубационный период (в среднем 3-7 лет, но может удлиняться до 15-20 лет).

Патогенез: возбудитель проникает через слизистые оболочки и кожу в лимфатические и кровеносные капилляры, нервные окончания и медленно распространяется по организму. M.leprae обладает тропизмом к тканям с низкой температурой (<300C). Это приводит к формированию гранулем различной поверхностной локализации.

Основные клинические формы:

-туберкулоидная – характеризуется поражениями кожи (одиночные, слегка пигментированные пятна), периферических нервов (нарушается температурная, бо-

левая и тактильная чувствительность);

8