Материал: vse_metody_MIKROB

шейных), гепатоспленомегалией. В крови появляется большое количество атипичных мононуклеаров (бластоподобные лимфоциты и моноциты).

Лимфопролиферативные заболевания. Вирус является митогеном для В-

лимфоцитов и способствует развитию опухолей, особенно у пациентов с дефектом Т-клеточного иммунитета, а также опухолей, имеющих эндемичный характер: африканская лимфома Беркитта у детей, в Юго-Восточной Азии – карцинома носоглотки у молодых мужчин.

Диагностика.

1.Общий анализ крови: обнаружение атипичных мононуклеаров (95,5%).

2.ПЦР.

ассоциированные заболевания Вирус иммунодефицита человека (ВИЧ): РНК-содержащий, имеет су-

перкапсидную оболочку.

ВИЧ вызывает инфекцию, сопровождающуюся быстрым эпидемическим распространением и заканчивающуюся синдромом приобретенного иммунодефицита (СПИД). СПИД характеризуется тяжелым поражением иммунной системы, длительным течением, полиморфностью клинических симптомов, абсолютной летальностью.

Характерная особенность вируса – наличие обратной транскриптазы – РНК-зависимой ДНК-полимеразы. Обратная транскриптаза (или ревертаза) обеспечивает обратную направленность передачи генетической информации от РНК к ДНК. Это свойство вирусов придает им способность к интегративной инфекции в клетках организма хозяина.

На поверхности вируса находятся 2 типа вирусных гликопротеинов. Одни из них (gp 120) взаимодействуют с рецепторами CD4+ клеток организма человека (Т-хелперы, макрофаги и моноциты). Наиболее чувствительны к ВИЧ – Т- хелперы, т.к. содержат на своей поверхности большое количество рецепторов

CD4.

8

Выделяют 2 антигенных варианта вируса: ВИЧ-1 и ВИЧ-2, которые различаются по строению генома.

ВИЧ-1 обладает высокой антигенной изменчивостью. Она касается постоянно мутирующего гена, продуцирующего синтез gp120-гликопротеина. В результате образуется много антигенных вариантов. Это затрудняет создание эффективных вакцин.

Патогенез: взаимодействие ВИЧ с клетками организма происходит по типу интегративной инфекции. В интегрированном с ДНК клетки состоянии вирус может длительно персистировать в организме (до 10 и более лет). При активации вируса интегративная инфекция переходит в продуктивную, что приводит к клиническим проявлениям ВИЧ-инфекции.

ВИЧ обладает тремя механизмами уклонения от действия иммунной системы: 1) интеграция вирусной нуклеиновой кислоты с ДНК клетки хозяина, что приводит к длительному сохранению инфекции; 2) вирус нарушает работу МНС I, в результате ЦТЛ не распознает и не уничтожает ВИЧ-инфицированные клетки; 3) ВИЧ инфицирует и убивает CD4+ Th, что приводит к нарушению работы как клеточного, так и гуморального звеньев иммунитета в целом. Наступает состояние иммунодефицита.

Источник инфекции: больной человек или ВИЧ-инфицированный. Наибольшая концентрация вируса, опасная для заражения, присутствует в

крови, семенной жидкости, вагинальном секрете, более низкая – в грудном молоке.

Основные пути передачи и контингенты риска при ВИЧ-инфекции представлены в табл. 4.

Таблица 4 Основные пути передачи и контингенты риска при ВИЧ-инфекции

др.)

4.Трансплацентарный, ин- Дети, рожденные от ВИЧ-инфицированных матетранатальный, при груд- рей ном вскармливании

Исследуемый материал: кровь больного.

Микробиологическая диагностика.

1.ИФА: определение вирусных антигенов (ранняя диагностика) и суммарных антител к ВИЧ (через 2 недели от начала острой инфекции);

2.Иммуноблоттинг (blot (англ.) – пятно): комбинированный метод (электрофорез + ИФА). Блоттинг – перенос разделенных электрофорезом белков ВИЧ на фильтровальную бумагу для дальнейшего определения антител к данным белкам с помощью ИФА. Первые недели после инфицирования представляют собой период «серонегативного окна», когда антитела к ВИЧ не выявляются, его длительность около 3 месяцев, иногда 6-10 месяцев;

3.ПЦР: определение РНК ВИЧ в крови в остром периоде.

ВИЧ-инфекция характеризуется длительным течением и прогрессирующим снижением иммунитета. Это приводит к развитию тяжелых форм оппортунистических инфекций и заканчивается гибелью больного.

Основные СПИД-ассоциированные заболевания, приводящие к смерти больных с ВИЧ-инфекцией.

1.Оппортунистические инфекции:

вызванные простейшими (токсоплазмы и др.);

вызванные грибками (Pneumocystis сarinii – возбудитель пневмоцистной пневмонии; Candida и др);

вызванные бактериями (микобактерии, условно-патогенные бактерии и др.);

вызванные вирусами (герпетические вирусы).

10

2.Опухолевые процессы:

саркома Кáпоши: множественная злокачественная опухоль сосудистой ткани. Характеризуется кожными поражениями в виде пятен красносинего цвета;

лимфома мозга и других локализаций.

7.Характеристика вируса бешенства, микробиологическая диагностика, лечебно-профилактическая иммунизация

Вирус бешенства: РНК-содержащий, имеет суперкапсидную оболочку.

Выделяют 2 варианта вируса: «уличный», вызывающий бешенство и «фиксированный», аттенуированный (получен Л. Пастером путем много-

кратных пассажей уличного вируса через мозг кроликов) – применяется для получения антирабической вакцины.

Бешенство (rabies) – древняя зоонозная инфекция. Резервуарами возбудителя могут быть практически все теплокровные животные.

Основные источники инфекции для человека: среди диких животных – хищники, в России – чаще лисы и волки; из домашних животных – собаки и кошки.

Заражение в большинстве случаев происходит через укусы больными животными или при попадании их слюны на поврежденные кожные покровы и слизистые оболочки. Животные заразны с конца инкубационного периода, в среднем в течение 10 дней, до появления у них клинических симптомов заболевания.

Инкубационный период варьируется от нескольких дней до нескольких месяцев. Длительность инкубационного периода зависит от близости места укуса к головному мозгу. Наиболее короткий инкубационный период реги-

стрируется при укусах в области головы, шеи, кистей рук.

Патогенез и клиника: при попадании в организм вирус бешенства размножается в тканях на месте укуса. Затем по аксонам периферических нервов достигает клеток головного и спинного мозга, где размножается. В цитоплазме

11

нейронов продолговатого мозга и гиппокампа происходит накопление вируса с образованием включений Бабеша-Негри. Под действием вируса наступает гибель нейронов, что вначале приводит к повышению рефлекторной возбудимости, а затем к развитию судорог и параличей. Из мозга вирус центробежно попадает в различные ткани, в том числе в слюнные железы, откуда выделяется со слюной.

Выделяют 3 стадии заболевания:

1.начальная: неприятные ощущения в области укуса, бессонница, беспокойство, депрессия;

2.возбуждения: основным признаком заболевания является гидрофобия (водобоязнь), т.к. при попытке выпить воду у больного возникают судороги мышц глотки и гортани. Судороги могут быть спровоцированы громким звуком (фонофобия), ярким светом (фотофобия), движением воздуха (аэрофобия);

3.параличей: судороги и приступы фобий прекращаются. Смерть наступает от паралича дыхательного или сердечно-сосудистого центров. Летальность составляет ≈100%.

Микробиологическая диагностика.

Прижизненная диагностика основана на клинических проявлениях заболевания.

Посмертная диагностика.

1.Микроскопический метод: определение в мазках-отпечатках из области гиппокампа вирусных включений в окраске по Селлерсу. В пораженных вирусами нейронах обнаруживают розово-красные включения Бабеша-Негри на голубом фоне цитоплазмы.

2.РИФ: определение вирусного антигена в том же исследуемом материале.

3.Вирусологический: внутримозговое заражение белых мышей. Материал на исследование: кусочки мозга из области гиппокампа и ткань слюнных желез.

12