Таблица 3 – Схема постановки реакции агглютинации (развернутая).
Разведение сы- |
1/50 |
1/100 |
1/200 |
1/400 |
1/800 |
Контроль |
Кон- |
||
воротки |
|
|
|
|
|
|
|
сыворотки |
троль |
Ингредиенты |
|
|
|
|
|
|
|
|
антигена |
Физиологиче- |
- |
1,0 |
1,0 |
1,0 |
1,0 |
- |
1,0 |
||
ский раствор |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Сыворотка |
1,0 |
1,0 |
1,0 |
1,0 |
1,0 |
1,0 |
- |
||
больного 1/50 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Бруцеллезный |
2 |
2 |
2 |
2 |
|
2 |
- |
2 |
|
диагностикум |
кап. |
кап. |
кап. |
кап. |
кап. |
|
кап. |
||
1,0 в дез. раствор 2 часа при 370С , затем 18-20 часов при комнатной температуре.
Учет:
2.Учѐт реакции преципитации в геле для определения токсигенности дифтерийной культуры.
3.Учет РНГА для диагностики брюшного тифа (по демонстрации).
4.Учет РСК (табл.4) с сывороткой крови двух пациентов при подозрении на сифилис (по демонстрации).
Таблица 4 – Схема учета РСК при подозрении на сифилис
Пробирки |
Опытная |
|
Контроль сыворот- |
Контроль |
||
|
|
|
пробирка |
|
ки больного |
антигена |
Ингредиенты: |
|
|
|
|
|
|
исследуемая сыворотка |
0,5 мл |
|
0,5 мл |
- |
||
антиген |
|
0,5 мл |
|
- |
0,5 мл |
|
комплемент |
|
0,5 мл |
|
0,5 мл |
0,5 мл |
|
физиологический раствор |
- |
|
0,5 мл |
0,5 мл |
||
В термостат при 370С на 1 час для контакта |
|
|
||||
гемолитическая система |
|
|
|
|
||
(3% взвесь |
эритроцитов |
1,0 мл |
|
1,0 мл |
1,0 мл |
|
барана + гемолитическая |
|
|
|
|
||
сыворотка) |
|
|
|
|
|
|
В термостат при 370С 40 мин |
., затем при 4 |
0С 15-18 часов. |
|
|||
Учет: |
|
а) |
|
|
|
|
|
|
б) |
|
|
|
|
14
Занятие № 11
Тема. Иммунная система организма. Специфическая иммунопрофилактика и иммунотерапия.
Цель занятия. Изучить роль иммунной системы организма в создании проти-
воинфекционного иммунитета. Изучить механизм развития аллергической ре-
акции анафилаксии. Изучить основные препараты для специфической профи-
лактики и специфического лечения инфекционных заболеваний.
I.Теоретические знания:
1.Иммунная система организма человека и ее основные функции. Роль АПК, Т-
и В-лимфоцитов.
2. Иммунный ответ по гуморальному и клеточному типу. Иммунологическая память.
3. Аллергия. Классификация аллергических реакций по времени проявления симптомов.
4. Анафилаксия. Анафилактический шок. Методы десенсибилизации организ-
ма.
5. Инфекционная аллергия. Практическое применение кожных аллергических проб для диагностики инфекционных заболеваний.
6. Иммунопрофилактика и иммунотерапия инфекционных заболеваний. Препа-
раты для активной иммунизации. Виды вакцин.
7. Серотерапия и серопрофилактика инфекционных заболеваний. Виды сыворо-
точных препаратов.
II.Практические навыки:
1.Характеристика препаратов для специфической профилактики и специфиче-
ского лечения инфекционных заболеваний.
1
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ К ЗАНЯТИЮ
1.Иммунная система организма человека и ее основные функции. Роль АПК, Т- и B-лимфоцитов.
Иммунная система организма человека представляет совокупность лимфоидных органов и тканей, предназначенных для распознавания, уничтожения и элиминации (удаления) из организма генетически чужеродных веществ (антигенов). В иммунной системе различают центральные (костный мозг и тимус (вилочковая железа)) и периферические органы (лимфатические узлы, селезѐнка, лимфоидная ткань ротоглотки и кишечника).
В центральных органах иммунной системы происходит созревание и дифференцировка лимфоцитов, в результате чего они приобретают иммунокомпетентность, т.е. способность реагировать на чужеродные вещества. В периферических органах зрелые лимфоциты распознают и обезвреживают антигены.
Основные клетки, участвующие в иммунном ответе: антигенпрезенти-
рующие клетки (дендритные клетки, макрофаги и др.), Т- и В-лимфоциты.
Антигенпрезентирующие клетки (АПК) захватывают микробный анти-
ген, расщепляют (процессируют) его и затем представляют (презентируют) Т-лимфоцитам – хелперам. Антигенпрезентирующей может быть любая клетка организма, несущая на своей поверхности молекулы главного комплекса гистосовместимости I класса (МНСI – major histocompatibility complex (англ.)). Среди АПК существуют так называемые «профессиональные» АПК – три типа клеток, которые, кроме МНСI, несут на своей поверхности молекулы главного комплекса гистосовместимости II класса (МНСII). Такими «профессионалами» презентации являются дендритные клетки, макрофаги и В-лимфоциты.
Т-лимфоциты имеют на поверхности специфические антигенраспознающие рецепторы – TCR (T-cell receptor (англ.)). Кроме TCR, в процессе распознавания микробного антигена также участвуют маркерные рецепторы CD, характер которых зависит от функций Т-лимфоцитов.
CD-молекулы (антигены) располагаются на поверхности клеток иммунной системы и имеют различное функциональное значение. Их используют для идентификации и дифференцировки субпопуляций лейкоцитов (clasters of differentiation – кластеры (группы) дифференцировки). CD-антигены являются рецепторами для взаимодействия между клетками. Эти белковые рецепторы имеют порядковые номера и их присутствие на клетках зависит от функции Т- и В- лимфоцитов.
На основании различий в характеристике CD-маркеров, Т-лимфоциты подразделяют на CD4+ и CD8+.
2
CD4 Т-лимфоциты: к ним относят Т-хелперы активаторы и регуляторные Т-хелперы.
-Т-хелперы (Th, Th1, Th2) – при взаимодействии с АПК специфически распознают микробные антигены с помощью TCR. Одновременно CD4маркерные рецепторы связываются с МНСII для стабилизации взаимодействия Th и АПК. После распознавания антигена Th2 стимулируют иммунный ответ по гуморальному типу, а Th1 – по клеточному типу;
-Т-регуляторы – регулируют интенсивность иммунного ответа, подавляя активность других субпопуляций лимфоцитов.
CD8 Т-лимфоциты: к ним относят цитотоксические Т-лимфоциты (ЦТЛ). С помощью TCR они распознают антиген, а их CD8-рецепторы связываются с МНСI.
ЦТЛ лизируют клетки организма, зараженные вирусами или бактериями, а также опухолевые клетки. Следовательно, CD8 Т-лимфоциты отвечают за
клеточный иммунный ответ.
В-лимфоциты имеют на своей поверхности антигенраспознающий рецептор – ВCR (B-cell receptor (англ.)), а также маркерные рецепторы CD19-21 и др. После встречи с антигеном активированные В-лимфоциты превращаются в плазматические клетки (плазмоциты), вырабатывающие антитела – Ig
всех классов. Следовательно, В-лимфоциты отвечают за гуморальный
иммунный ответ.
Цитокины – гуморальные факторы системы иммунитета белковой природы. Синтезируются различными клетками организма и регулируют межклеточное взаимодействие. Цитокины, которые синтезируются при иммунном ответе, называются интерлейкинами (ИЛ). Они имеют порядковые номера. Основная функция ИЛ стимуляция клеток, участвующих в иммунном ответе.
Весь процесс возникновения защитных механизмов организма состоит из трех действий: 1) распознавание чужеродного микроба специфическими иммунными клетками, 2) активация этих клеток для получения специфического ответа и 3) возникновение реакций, которые ведут к уничтожению конкретных чужеродных микробов.
Независимо от того, какой чужеродный микроб проник в организм, защищать его будут оба звена адаптивного иммунитета: гуморальный (опосредованный антителами) и клеточный.
2. Иммунный ответ по гуморальному и клеточному типу. Иммунологическая память.
Иммунный ответ по гуморальному типу. Для его осуществления необхо-
димо взаимодействие (кооперация) антигенпрезентирующей клетки – профессиональной АПК, Т-хелперов второго порядка (Th2) и В-лимфоцитов. Этот процесс происходит в несколько стадий (рис.10):
3
4