Материал: vse_metody_MIKROB

Молекула иммуноглобулина G состоит из двух идентичных лѐгких (L) и двух тяжѐлых (H) полипептидных цепей, различающихся по длине и молекулярной массе. Тяжелые и легкие цепи связаны между собой попарно дисульфидными (S-S) связями.

Каждая из цепей имеет вариабельные и константные участки. Легкая цепь имеет один вариабельный участок (VL) и один константный участок (CL).

Тяжелая цепь имеет один вариабельный участок (VH) и три константных участка (CH1, CH2, CH3). Константные участки CH2 и CH3 формируют Fcфрагмент. Этот фрагмент связывает комплемент, фиксирует молекулу иммуноглобулина на мембранах клеток и обеспечивает проникновение IgG через плаценту.

Вариабельные участки легких и тяжелых цепей формируют два активных центра, вступающих во взаимодействие с эпитопами антигена.

В месте перегибов тяжѐлых цепей находятся шарнирные участки, что придаѐт молекуле иммуноглобулина гибкость при взаимодействии с антигеном.

АКТИВНЫЕ ЦЕНТРЫ

ШАРНИРНЫЙ

УЧАСТОК

Fc-фрагмент

Условные обозначения: L – лѐгкая цепь; Н – тяжѐлая цепь; VL, и VH – вариабельные участки, СL, CH, CH2, CH3 – константные участки. Утолщѐнные линии Н-цепей соответствуют шарнирному участку; Fc – константный фрагмент.

Рисунок 2 – Схематическое изображение молекулы lgG.

4

Свойства антител:

-гетерогенность (многообразие);

-специфичность – способность реагировать с конкретным антигеном;

-аффинность – сила связи одного из активных центров Ig с одним эпитопом антигена;

-авидность (жадность) – показывает, какое количество антигенов может связать молекула антитела. Авидность зависит от количества активных центров, взаимодействующих с антигенным эпитопом.

Классификация, функциональное и диагностическое значение отдельных классов иммуноглобулинов.

IgM (тяжѐлые): состоят из 5 молекул иммуноглобулина G; филогенетически самый древний класс иммуноглобулинов. Первыми синтезируются в организме плода. Появляются в сыворотке крови больного в начале инфекционного заболевания, что указывает на острое течение. Не проходят через плаценту. Содержание в сыворотке крови 5-10% от общего количества иммуноглобулинов. Обладают в основном антибактериальным действием, хорошо фиксируют своим Fc-фрагментом комплемент с последующей его активацией. Обладают самой высокой авидностью. Мономеры IgM находятся на поверхности В- лимфоцитов в виде мембранного Ig и образуют В-клеточный рецептор (BCR) (см. занятие №11).

IgG (лѐгкие): проходят от матери к плоду через плаценту, что определяет защиту новорожденного от инфекции. Образуются в организме в разгар острого заболевания. При реинфекции и рецидиве IgG образуются в начале заболевания. Являются универсальными, т.к. обладают антибактериальным, антивирусным, антитоксическим действием. Содержание в сыворотке крови – около 80% от общего количества Ig.

IgА бывают 2-х видов: сывороточные и секреторные.

Сывороточные IgА представлены мономерами IgG. Содержание их в сыворотки крови 10-15%. Через плаценту не проходят.

Секреторные IgA (SIgA) присутствуют на слизистых оболочках дыхательных путей, кишечника, мочеполовых органов, а также в слюне и грудном молоке. Встречаются чаще в виде димеров IgG. Для защиты от действия протеолитических ферментов имеют особую структуру – секреторный компонент (Sc). SIgA – это основной фактор местного иммунитета слизистых оболочек организма, т.к. предотвращает прикрепление микробов к слизистым оболочкам.

IgE (реагины): мономеры IgG, не проходят через плаценту, содержание в сыворотке крови 0,01-0,02%. Обладают цитофильностью – соединяются Fc– фрагментом с тучными клетками и базофилами. Играют важную роль в развитии аллергических реакций немедленного типа. Обладают антигельминтозной активностью.

IgD: мономеры IgG, не проходят через плаценту. Составляют 0,1% от общего количества иммуноглобулинов. Находятся на поверхности В-лимфоцита, контролируя его активацию.

5

По направленности действия различают следующие антитела:

-противогрибковые;

2.Серологические реакции. Классификация серологических реакций (табл.2).

Основой серологических (serum (лат.) – сыворотка крови, logos (лат.) – учение) реакций являются особенности взаимодействия антител с антигеном в присутствии физиологического раствора (0,85% NaCl).

Назначение серологических реакций:

проведение серологического метода диагностики – определение в сыворотке крови больного антител к конкретному возбудителю инфекционного заболевания с помощью известного антигена. Результаты такой диагностики выражаются в виде концентрации антител – титра реакции. Титром серологической реакции называется наибольшее разведение сыворотки, при котором наблюдается положительный результат;

идентификация возбудителя с помощью известных антител – иммунных диагностических сывороток.

Все диагностические реакции характеризуются высокой специфичностью и чувствительностью.

Таблица 2 – Классификация серологических реакций

Примечание: Простые 2- и 3-компонентные реакции – это реакции, для реализации и визуального учета которых достаточно 2 или 3 иммунологических компонентов. Сложные 2- и 3-компонентные реакции – это реакции, для реализации которых достаточно 2 или 3 иммунологических компонентов, а для визуального учѐта необходима индикаторная система.

Реакция агглютинации («agglutinatiо» (лат.) – склеивание): 2-

компонентная простая серологическая реакция (рис. 3). Компоненты реакции

6

агглютинации (РА): корпускулярный антиген (бактериальные клетки) и антитела. В результате реакции образуется агглютинат (комплекс [Аг+Ат]).

Антитела «склеивают» бактерии и препятствуют их размножению.

Рисунок 3 – Схема РА с IgM-антителами (а) и IgG-антителами (б)

РА используется:

1.Для идентификации микробов (определение вида возбудителя, выделенного от больного) с помощью известных антител (диагностическая сыворотка). Этот вариант реакции агглютинации выполняется в 2-х технических модификациях: ориентировочная (на предметном стекле); развернутая (в пробирках) – для окончательной идентификации исследуемой культуры. Используется для диагностики брюшного тифа, дизентерии, холеры и др. заболеваний.

2.Для определения титра антител в сыворотке крови обследуемого с помощью известных антигенов (диагностикумы). Технически всегда выполняется в виде развернутой РА. Используется для диагностики брюшного тифа, бруцеллеза и др. заболеваний.

Чтобы подтвердить клинический диагноз, титр антител, обнаруженных в сыворотке больного, сравнивают с диагностическим титром для данного заболевания.

Диагностический титр – это минимальное содержание антител в сыворотке крови больного, позволяющее установить диагноз инфекционного заболевания. Например, при брюшном тифе и бруцеллѐзе диагностический титр РА для взрослых – 1/200, для детей – 1/100.

Если титр реакции совпадает с диагностическим титром, значит, пациент болен.

7