Материал: vse_metody_MIKROB

IV – фаза отмирания. Характеризуется гибелью бактерий вследствие исто-

щения питательной среды и других факторов.

Непрерывное культивирование с накоплением бактериальной массы ис-

пользуется в биотехнологических процессах и на микробиологических произ-

водствах (получение бактерийных препаратов).

Фазы развития бактериальной популяции

вжидкой питательной среде

4.Влияние факторов окружающей среды на микроорганизмы.

Физические, химические и биологические факторы окружающей среды оказывают различное воздействие на микроорганизмы: бактерицидное – при-

водящее к гибели клеток; бактериостатическое – подавляющее размножение;

мутагенное – изменяющее наследственные свойства бактерий.

Влияние физических факторов на микроорганизмы.

Методы стерилизации. Аппаратура.

1. Ультразвук. Под его действием в цитоплазме бактерий образуются ка-

витационные полости, заполненные парами жидкости под высоким давлением до 10 000 атм. Это приводит к разрушению цитоплазматических и оболочечных структур клетки. Практическое применение: для стерилизации вакцин, жид-

ких пищевых продуктов и др.

5

2. Ультрафиолетовый свет – повреждает ДНК микробной клетки. Дейст-

вие УФ-света на бактерии было доказано опытом Бухнера: в чашку Петри с МПА делают посев культуры микроорганизмов, например, S.typhi «сплошным газоном». На посев накладывают черную бумагу с вырезанными буквами, со-

ставляющими какое-либо слово, например, «typhus» и подвергают его дейст-

вию прямых солнечных лучей в течение 1 часа. После этого черную бумагу снимают и ставят чашку на сутки в термостат при температуре 370С. Рост куль-

туры микробов наблюдается только на тех участках среды, которые были за-

щищены от действия УФ-лучей. Практическое применение УФ-лучей: сте-

рилизация воздуха в операционных, родильных залах, палатах для новорож-

денных, в бактериологических лабораториях и др.

Опыт Бухнера с культурой S.typhi

3. Гамма-излучение вызывает повреждение белков и нуклеиновых кислот мик-

робной клетки (микробицидное действие). Практическое применение: для стерили-

зации одноразовых шприцев, одноразовой пластиковой микробиологической посуды,

перевязочного материала, систем для переливания крови.

4. Высокая температура – вызывает денатурацию белков и инактивацию ферментов микроорганизмов. Практическое применение: для стерилизации

различных объектов.

Стерилизация или обеспложивание (лат. sterilis - бесплодный) – полное уничтожение всех микроорганизмов и их спор в различных объектах (хирурги-

ческие инструменты, перевязочный материал, питательные среды и др.).

6

Методы стерилизации:

I. Физический:

1. Прокаливание в пламени спиртовки. Этот способ имеет ограниченное применение, в частности, для стерилизации бактериологических петель.

2. Сухим жаром в печи Пастера (воздушный стерилизатор). Режим сте-

рилизации: 180°С, 1 час. Стерилизуют стеклянную посуду (чашки Петри, пи-

петки, пробирки), хирургические инструменты.

3. Паром под давлением в автоклаве.

Параметры автоклавирования выбирают в зависимости от свойств мате-

риала. Чаще используют следующие режимы: 1 атм (1210С), 1,5 атм (1250С),

7

2 атм (1340С). При таких режимах вегетативные формы микробов погибают в течение нескольких минут, а споры за 20-30 минут.

Способ автоклавирования основан на том, что образующийся при кипении воды пар не выходит наружу, а, скапливаясь в замкнутом пространстве, повы-

шает давление. Соответственно давлению увеличивается и температура кипе-

ния воды. Тепло, генерируемое при повышении давления, называется латент-

ным теплом, оно имеет большую проникающую способность, разрушающую структуру микроорганизмов и спор.

4. Стерилизация УФ-облучением. Применяется для стерилизации возду-

ха в микробиологических лабораториях, родильных залах, палатах для новоро-

жденных, операционных, процедурных кабинетах и др. Ее проводят ультра-

фиолетовыми бактерицидными лампами различной мощности.

8

II. Химический метод стерилизации основан на использовании токсичных газов: оксида этилена, формальдегида и др. Эти вещества инактивируют фер-

менты и нуклеиновые кислоты микроорганизмов. Химическая стерилизация проводится в специальных камерах при температуре газа от 20 до 600С. Прак-

тическое применение: стерилизация оптических приборов, предметов меди-

цинского назначения из полимерных материалов.

III. Механический метод стерилизации (фильтрование) основан на меха-

нической задержке микроорганизмов и их спор мелкопористыми фильтрами с определенным диаметром пор. В микробиологической промышленности и в ла-

бораторной практике широко применяется фильтрация материала через асбе-

стовые и нитроцеллюлозные фильтры. Фильтрование используют для стерили-

зации биологических препаратов, не выдерживающих нагревания (сывороточ-

ные препараты, антибиотики, бактериальные экзотоксины и др.).

5. Виды дезинфекции. Химические вещества, используемые для де-

зинфекции.

Дезинфекция (от франц. приставки des и лат. infectio – заражение) – это комплекс мероприятий, направленных на уничтожение и удаление возбудите-

лей инфекции из объектов окружающей среды. Дезинфекция отличается от сте-

рилизации по конечному результату. Путем стерилизации уничтожаются все виды микроорганизмов и их споровые формы. При дезинфекции погибают

только вегетативные формы болезнетворных микроорганизмов.

Для проведения дезинфекции обычно используют химические дезинфици-

рующие средства. Выбор дезинфицирующего средства, а также способ его применения определяются особенностями обеззараживаемого объекта и биоло-

гическими свойствами материала.

Различают профилактическую, текущую и заключительную дезинфек-

цию.

9