Материал: vse_metody_MIKROB

специальные – для выделения и культивирования бактерий, не расту-

щих на простых средах (сывороточный агар, кровяной агар);

накопительные – для накопления возбудителя при его низкой концен-

трации в материале от больного (селенитовая среда – для культивирова-

ния возбудителей дизентерии).

4. Дыхание бактерий. Классификация бактерий по типу дыхания.

Сущность дыхания у микроорганизмов – получение энергии, образующей-

ся в процессе прямого биологического окисления веществ кислородом или пу-

тем ферментативного метаболизма. Накопление энергии происходит в мезосо-

мах.

В соответствии с потребностями в кислороде бактерии классифици-

руют на основные группы:

Облигатные (строгие) аэробы – микроорганизмы, которые растут и раз-

множаются только в присутствии кислорода. Например: Vibrio cholerae, Pseu-

domonas aeruginosa.

10

Облигатные анаэробы – микроорганизмы, которые растут и размно-

жаются только без доступа кислорода. Например: Clostridium botulinum, Clostridium tetani, Bacteroides fragilis.

Факультативные анаэробы – микроорганизмы, которые могут расти и размножаться как в присутствии кислорода, так и в бескислородных условиях.

Например: Escherichia coli, Salmonella typhi, Mycobacterium tuberculosis.

Микроаэрофильные бактерии – микроорганизмы, которые растут и раз-

множаются при повышенном содержании СО2 и низком содержании О2. На-

пример: Helicobacter pylori, Campylobacter coli.

5.Бактериологический метод диагностики инфекционных заболева-

ний. Методы культивирования бактерий. Получение чистой культуры аэ-

робов и анаэробов. Способы создания анаэробных условий.

Основным методом диагностики инфекционных заболеваний является

бактериологический. Он заключается в посеве исследуемого материала

(кровь, моча, фекалии, мокрота, мазок со слизистой оболочки ротоглотки и но-

са и др.) на искусственные питательные среды для выделения чистой культуры возбудителя. Затем проводят его идентификацию по морфологическим, тинкто-

риальным, культуральным, биохимическим, антигенным и др. признакам.

Выделение чистой культуры аэробных возбудителей достигается путем посева исследуемого материала на плотные питательные среды (в чашке Пет-

ри), что приводит к механическому разобщению отдельных микробных клеток друг от друга. Посев производят секторами бактериологической петлей и по-

мещают в термостат при температуре 370С. Размножение изолированных кле-

ток дает потомство (колонию) одного вида, т.е. чистую культуру микробов.

11

чашка Петри с плотной питательной средой

бактериологическая петля

Посев исследуемого материала секторами для получения изолирован-

ных колоний микроорганизмов

Для получения изолированных колоний и чистой культуры анаэробов

производят посев исследуемого материала петлей секторами на специальные

среды для анаэробов с последующим культивированием в анаэробных (бески-

слородных) условиях.

12

Способы создания анаэробных условий:

1) механическое удаление воздуха из анаэростата с последующим заполне-

нием газовой смесью (80% азота, 10% водорода, 10% углекислого газа);

2) использование газогенераторных пакетов с набором специальных реа-

гентов (боргидрит натрия, винная кислота, бикарбонат натрия) для создания бескислородной газовой среды в анаэростате.

13

Проведение бактериологического исследования по схеме.

Цель бактериологического исследования: выделение и идентификация (оп-

ределение вида) возбудителя.

I этап. Посев исследуемого материала на пластинчатый агар с целью полу-

чения изолированных колоний микроорганизмов.

II этап. Изучение выросших колоний и выделение чистой культуры с це-

лью накопления биомассы одного вида микроорганизмов.

III этап. Определение биохимических, антигенных, патогенных и других свойств выделенной культуры с целью идентификации бактерий.

IV этап. Учет свойств бактерий и вывод о виде возбудителя.

14