Материал: vse_metody_MIKROB

Классификация бактерий по типам питания и способам получения

энергии:

аутотрофы (лат. autos – сам, trophe – питание) – используют для построе-

ния своих клеток неорганический углерод в виде СО2;

гетеротрофы (лат. heteros – другой, «питающийся за счет других») – усваи-

вают углерод из сложных органических соединений.

Для накопления своей биомассы бактериям, помимо источника углерода,

требуется источник энергии. Энергия запасается бактериальной клеткой в форме молекул АТФ. Бактерии, для которых источником энергии является солнечный свет, называются фототрофами. Бактерии, которые для биосинтеза используют энергию химических реакций, называются хемотрофами. Хемо-

трофы получают энергию за счет окислительно-восстановительных реакций. В

патологии человека ведущую роль играют хемогетеротрофы.

К хемогетеротрофам относят:

сапрофиты (от греч. sapros – гнилой и phyton – растение) – источником пи-

тания для них служит мертвый органический материал. Например: клостри-

дии.

паразиты (от греч. parasitоs – нахлебник) – получают питательные вещест-

ва от макроорганизма и могут наносить ему вред. Различают облигатные и факультативные паразиты. Облигатные паразиты не могут жить вне клеток организма. Например: риккетсии, хламидии. Факультативные па-

разиты могут существовать внеклеточно и размножаться на питательных средах in vitro.

3. Культивирование бактерий. Питательные среды для бактерий, их

классификация.

Культивирование бактерий in vitro осуществляется на питательных средах,

которые должны отвечать следующим требованиям:

1.Необходимый набор питательных веществ и ростовых факторов;

2.Оптимальные значения рН (обеспечивают функционирование ферментов

5

бактерий);

3.Влажность;

4.Изотоничность (обеспечивает осмотическое равновесие между микробной клеткой и средой, облегчает процессы осмоса и диффузии питательных веществ);

5.Стерильность.

Питательные среды для бактерий

Классификации питательных сред.

По консистенции (физическим свойствам):

жидкие – мясо-пептонный бульон (МПБ), 1% пептонная вода;

6

полужидкие – полужидкий мясо-пептонный агар* (МПА с концентра-

цией агар-агара до 1%);

плотные – МПА (концентрация агар-агара 2-3%).

* Агар – полисахарид, получаемый из водорослей «агар-агар». Он плавится при температуре 1000С, а застывает при температуре 400С.

7

По составу:

простые (МПА, МПБ);

сложные (кровяной агар).

По назначению:

транспортные – для первичного посева и транспортировки исследуемо-

го материала в лабораторию;

элективные (селективные) – среды для избирательного культивирова-

ния бактерий определенного вида (1% пептонная вода и щелочной агар для холерных вибрионов, среда Плоскирева – для возбудителей брюш-

ного тифа и дизентерии);

дифференциально-диагностические – для дифференциации отдельных видов бактерий по ферментативным свойствам. Например: среда Эндо –

для кишечных бактерий.

8

Состав и механизм работы среды Эндо.

Состав: МПА + 1% лактозы + индикатор (фуксин, обесцвеченный гипо-

сульфитом натрия).

Дифференциация кишечных бактерий основана на различиях в способно-

сти расщеплять лактозу. Кишечные палочки расщепляют лактозу до кислоты,

которая нейтрализует гипосульфит натрия. В результате фуксин из связанного состояния переходит в свободное. Колонии кишечных палочек окрашиваются в красный цвет (лактозопозитивные). Возбудители брюшного тифа и дизенте-

рии не расщепляют лактозу, поэтому дают на среде Эндо бесцветные (лактозо-

негативные) колонии.

9