Материал: Тец руководство

Серодиагностика. Для обнаружения антител к возбудителю используют реакцию агглютинации с парными сыворотками пациента. Диагностическим считается титр реакции 1:80 и на­растание титра антител не менее чем в 4 раза.

• Микробиологическая диагностика инфекций, вызванных Spirillum minus

МАТЕРИАЛ ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ: кровь, экссудат из очага инфекции, пунктат лимфатических узлов.

МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ:

Бактериоскопическое исследование. Является ведущим мето­дом диагностики. Возбудителя в нативных препаратах из ис­следуемого материала обнаруживают с помощью темнопольной микроскопии. Бактерии 3—5 мкм длиной и 0,2—0,5 мкм тол­щиной, подвижны, имеют извитую форму (2—6 завитков).

Бактериологическое исследование. Не проводится, поскольку Spirillum minus не удается культивировать in vitro.

Экспресс-методы диагностики. Биохимические и моле-кулярно-биологические исследования. Исследуемый материал, полученный из очага инфекции, используют для обнаружения ДНК возбудителя с помощью ПЦР. В случае обнаружения соответствующих молекул можно поставить предварительный диагноз.

Биопроба. Материал от больного вводят внутрибрюшинно морским свинкам. Через 7—10 дней перитонеальный экссудат и кровь зараженного животного исследуют методом темно­польной микроскопии.

• Микробиологическая диагностика пастереллеза

МАТЕРИАЛ ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ: отделяемое кожных язв, гной из абсцессов, кровь, спинномозговая жидкость.

МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ:

Бактериоскопическое исследование. В препаратах из исследу­емого материала, окрашенных по методу Грама, обнаруживают короткие (0,3—1,5 мкм длиной и 0,15—0,25 мкм толщиной) грамотрицательные палочки овоидной формы, которые могут окрашиваться биполярно.

Бактериологическое исследование. Pasteurella multocida хоро­шо растут на простых питательных средах, через 24 ч образуют мелкие непигментированные колонии. На кровяном агаре ге­молиз нехарактерен. Чистую культуру возбудителя идентифи­цируют по морфологии микробных клеток, тинкториальным, культуральным и биохимическим признакам.

Экспресс-методы диагностики. Биохимические и моле-кулярно-биологические исследования. Исследуемый материал, полученный из очага инфекции, используют для обнаружения ДНК возбудителя с помощью ПЦР. В случае обнаружения соответствующих молекул можно поставить пред­варительный диагноз.

Серодиагностика мало информативна и практически не при­меняется.

• Микробиологическая диагностика инфекций, вызванных
Erysipelothrix rhusiopathiae

МАТЕРИАЛ ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ: биоптаты поражен­ных участков кожи, отечная жидкость, кровь при септической форме инфекции.

МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ:

Бактериоскопическое исследование. В препаратах из исследу­емого материала, окрашенных по методу Грама, обнаруживают мелкие (0,8—2,5 мкм длиной и 0,2—0,5 мкм толщиной) грам-положительные палочки, располагающиеся поодиночке, в ви­де коротких цепочек или образующих длинные неветвящиеся нити.

Бактериологическое исследование. Исследуемый материал за­севают на богатые питательные среды и инкубируют в течение 7 дней в атмосфере с повышенным содержанием СО2- Бакте­рии образуют колонии двух типов: мелкие гладкие и крупные шероховатые, на кровяном агаре дают а \ -гемолиз. Чистую куль­туру возбудителя идентифицируют по морфологии микробных клеток, тинкториальным, культуральным и биохимическим при­знакам, внутривидовое типирование (серотипирование) осу­ществляют по соматическому антигену клеточной стенки в РА с типоспецифическими антителами.

Экспресс-методы диагностики. Биохимические и моле-кулярно-биологические исследования. Исследуемый ма­териал используют для обнаружения ДНК возбудителя с помо­щью ПЦР. В случае обнаружения соответствующих молекул можно поставить предварительный диагноз.

Серодиагностика не применяется.

• Микробиологическая диагностика инфекций, вызванных Bartonella hensella

МАТЕРИАЛ ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ: биоптат из поражен­ного участка кожи, лимфатического узла или органа, кровь.

МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ:

Бактериоскопическое исследование. В гистологических пре­паратах из очагов поражения, окрашенных по методу Грама, могут быть обнаружены мелкие грамотрицательные палочки, располагающиеся преимущественно внутриклеточно. Метод обладает чрезвычайно низкой чувствительностью в связи с малыми размерами возбудителя. Вероятность обнаружения бактерий повышается при использовании окраски серебрени­ем, позволяющей выявлять объекты малых размеров. Метод имеет ориентировочное значение.

Бактериологическое исследование. Бартонеллы выделяют из крови пациентов на богатых средах сложного состава (с добав­лением сердечно-мозгового экстракта, крови и других факто­ров роста) или путем заражения клеточных культур (Vero и др.). Культивирование занимает несколько недель, поскольку бар-тонеллы являются прихотливыми медленно растущими бакте­риями. Для идентификации используют серологические (реак­ция ИФ) и молекулярно-биологические методы (ПЦР, метод ДНК-зондов). Бактериологическое исследование при болезни кошачьей царапины применяется сравнительно редко по при­чине трудоемкости.

Экспресс-методы диагностики: иммунохимические, биохими­ческие и молекулярно-биологические исследования. Иммуно­химические исследования. Антигены возбудителя в био-птатах из очагов поражения могут быть обнаружены методом ИФ.

Молекулярно-биологические исследования. ДНК возбудителя в биоптатах из очагов поражения и крови может быть обнаружена с помощью метода ДНК-зондов и ПЦР.

Серодиагностика недостаточно информативна, поскольку антитела часто присутствуют в крови здоровых лиц. Для обна­ружения специфических IgM в крови больных применяют ме­тод непрямой ИФ: клетки культуры Vero, зараженные тест-штаммом бартонелл, обрабатывают сывороткой крови пациен­та. Специфические IgM выявляют с помощью моноклональных антител (МКАТ) к человеческим IgM, меченных флюорохромом. В положительном случае наблюдается специфическое свечение бактерий в зараженных клетках.

• Микробиологическая диагностика пситтакоза и Q-лихорадки. Изложена ранее (см. тему 14.1).

• Диагностические, профилактические и лечебные препараты

Бруцеллезный единый диагностикум. Взвесь убитых бруцелл, окрашенных метиленовым синим, применяется для серодиаг­ностики бруцеллеза в реакции агглютинации Райта и Хеддель-сона.

Туляремийный диагностикум. Взвесь убитых бактерий F.tu-larensis применяется для постановки реакции агглютинации при серодиагностике туляремии.

Преципитирующая сибиреязвенная сыворотка. Получена из крови лошадей, гипериммунизированных культурой B.anthracis. Применяют для постановки реакции термопреципитации по Асколи.

Чумной бактериофаг. Используется для идентификации Y.pestis.

Сибиреязвенный бактериофаг. Применяют для идентифика­ции B.anthracis.

Бруцеллин. Фильтрат 3-недельных бульонных культур Б. те-litensis, B.abortus, B.suis, убитых нагреванием. Применяют для постановки кожно-аллергической пробы Бюрне.

Тулярин. Взвесь F.tularensis (вакцинного штамма), убитых нагреванием, используется для постановки кожно-аллергичес­кой пробы.

Антраксин. Белково-полисахаридно-нуклеиновый комплекс, извлеченный при гидролизе B.anthracis, применяется для по­становки кожно-аллергической пробы.

Чумная живая сухая вакцина. Высушенная живая культура Y.pestis вакцинного штамма EV используется для активной спе­цифической профилактики чумы (создание активного имму­нитета).

Туляремийная живая сухая накожная вакцина. Высушенная живая культура вакцинного штамма F.tularensis применяется для активной специфической профилактики туляремии.

Накожная сухая живая бруцеллезная профилактическая вак­цина. Высушенная живая культура вакцинного штамма B.abor­tus применяется для активной специфической профилактики бруцеллеза (создание активного иммунитета).

Бруцеллезная лечебная вакцина. Взвесь убитых нагреванием бруцелл используется с лечебной целью, способствует десен­сибилизации организма.

Сибиреязвенная живая вакцина СТИ. Названа в честь Сани-тарно-технического института, в котором была впервые полу­чена. Представляет собой высушенную взвесь живых спор авирулентного бескапсульного штамма B.anthracis. Применяют для профилактики сибирской язвы.

Противосибиреязвенный иммуноглобулин. Гамма-глобулино-вая фракция сыворотки крови лошади, гипериммунизирован­ной живой сибиреязвенной вакциной и вирулентным штаммом B.anthracis, используется с профилактической и лечебной целью.

Лептоспирозный антиген. Живая 7—10-дневная культура ос­новных сероваров лептоспир. Применяется для серодиагности­ки лептоспирозов в реакции агглютинации-лизиса.

Лептоспирозная вакцина. Содержит культуры основных се­роваров лептоспир, убитых нагреванием и консервированных фенолом. Применяют для профилактики лептоспирозов в эн­демичных очагах инфекции.

Лептоспирозный иммуноглобулин. Применяют для лечения и профилактики лептоспирозов.

Антибиотики: аминогликозиды, тетрациклины, хлорамфени-кол, пенициллины и цефалоспорины, фторхинолоны и др.

Ф Brucella spp.\ тетрациклины, аминогликозиды.

4 Yersinia pestis: тетрациклины, аминогликозиды.

4 Yersinia pseudotuberculosis: ампициллин, цефалоспорины, аминогликозиды, тетрациклины, хлорамфеникол.

4 Francisella tularensis: аминогликозиды, тетрациклин, хлор­амфеникол.

4 Pasteurella multocida: пенициллины, макролиды.

4- Bacillus anthracis: пенициллины, тетрациклины, цефало­спорины, аминогликозиды, хлорамфеникол, фторхино­лоны.

4 Leptospira interrogans: тетрациклины, пенициллины, цефа­лоспорины, фторхинолоны.

4 Burkholderia mallei: аминогликозиды, тетрациклины, суль­фаниламиды.

4 Listeria monocytogenes: пенициллины, аминогликозиды, сульфаниламиды с триметопримом.

4 Streptobacillus moniliformis: пенициллин.

4 Erysipelothrix rhysiopathiae: пенициллин.