Материал: Тец руководство

• Микробиологическая диагностика внезапной экзантемы

МАТЕРИАЛ ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ: кровь, слюна.

МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ:

Экспресс-методы диагностики: иммунохимические и молеку-лярно-биологические исследования. Иммунохимические исследования. Присутствие белков (антигенов) вирусов-возбудителей (HHV-6, HHV-1) в исследуемом материале может быть выявлено с помощью чувствительных серологических ре­акций: ИФА, РИА и др.

Молекулярно-биологические исследования. Ви­русные нуклеиновые кислоты в исследуемом материале обна­руживают с помощью ПЦР или метода ДНК-зондов.

Серодиагностика. Наличие специфических противовирусных IgM, выявляемых методом ИФА, свидетельствует об активной инфекции.

• Микробиологическая диагностика инфекционного мононуклеоза

МАТЕРИАЛ ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ: кровь, слюна.

МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ:

Цитологическое исследование. В мазках крови при инфекци­онном мононуклеозе обнаруживают атипичные лимфоциты (не менее 10 %), которые являются наиболее ранними маркерами этой инфекции. Атипичные лимфоциты могут присутствовать в крови и при других заболеваниях, но в значительно меньшем количестве.

Вирусологическое исследование. Применяют редко в связи со сложностью культивирования. Чистую культуру вируса Эпш-тейна—Барр выделяют из исследуемого материала путем зара­жения первичных культур В-лимфоцитов, полученных из пу­почного канатика. С целью идентификации в клетках культуры определяют присутствие вирусспецифических антигенов мето­дом ИФ. Для идентификации используют также рестрикцион-ный анализ, ПЦР и метод ДНК-зондов.

Экспресс-методы диагностики: иммунохимические и молеку-лярно-биологические исследования. Иммунохимические исследования. Присутствие антигенов вируса Эпштейна— Барр в клетках крови может быть выявлено методом ИФ.

Молекулярно-биологические исследования. Ви­русные нуклеиновые кислоты в исследуемом материале обна­руживают с помощью ПЦР или метода ДНК-зондов.

Серодиагностика. Для инфекционного мононуклеоза харак­терно появление "гетерофильных" антител. Наиболее часто с диагностической целью определяют наличие антител к антиге­нам бычьих и бараньих эритроцитов (диагностический титр в РА 1:64). Для выявления противовирусных антител к антигенам капсида (УСА) и неструктурным раннему (ЕЛ) и ядерному (EBNA) антигенам применяют чувствительные серологические реакции, в первую очередь ИФА. Для острой инфекции харак­терно наличие антител к VCA (IgM). Антитела к EBNA свиде­тельствуют о перенесенной и хронической латентной инфек­ции. В период реактивации вируса в крови присутствуют анти­тела всех трех типов.

• Микробиологическая диагностика аденовирусной инфекции

МАТЕРИАЛ ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ: кровь, моча, мазки или смывы с конъюнктивы, носоглотки, мокрота, желчь, био-птат пораженного органа.

МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ:

Цитологическое исследование (см. главу 18).

Вирусологическое исследование. Для выделения чистой куль­туры вируса из исследуемого материала применяют клеточные культуры эпителиального происхождения (первичные культуры эмбриональных клеток почки человека, перевиваемые линии HeLa, НЕр-2 и др.). Индикацию вируса производят по ЦПД, которое развивается в среднем через 6 дней и проявляется образованием внутриядерных включений и дегенерацией зара­женных клеток. Для идентификации и типирования использу­ют реакции ИФ, ИФА и др., позволяющие обнаружить вирус­ные антигены в зараженной культуре, а также ПЦР и метод ДНК-зондов. Необходимо помнить, что аденовирусы способны к бессимптомной персистенции в организме, поэтому диагнос­тическое значение имеет присутствие вируса только в материа­ле из пораженного органа.

Экспресс-методы диагностики: иммунохимические и молеку-лярно-биологические исследования. Иммунохимические ис­следования. Присутствие антигенов вируса в клетках иссле­дуемого материала может быть выявлено методом ИФ. При­сутствие вирусных белков (антигенов) в исследуемом матери­але может быть выявлено с помощью чувствительных сероло­гических реакций: ИФА, РИА и др.

Молекулярно-биологические исследования. Вирус­ные нуклеиновые кислоты в исследуемом материале обнару­живают с помощью ПЦР или метода ДНК-зондов.

Серодиагностика. Наличие типоспецифических противоаде-новирусных антител в крови определяют с помощью различных серологических реакций, включая РСК, РТГА, РН, ИФА и др. Серодиагностику осуществляют методом парных сывороток и применяют преимущественно для ретроспективного подтверж­дения диагноза. Диагностическое значение имеет нарастание титра специфических противовирусных антител в поздней сы­воротке не менее чем в 4 раза.

• Микробиологическая диагностика парвовирусной инфекции

МАТЕРИАЛ ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ: кровь, носоглоточ­ные смывы.

МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ:

Экспресс-методы диагностики: иммунохимические и молеку-лярно-биологические исследования. Иммунохимические ис­следования. Присутствие антигенов вирусных частиц в ис­следуемом материале может быть выявлено методом ИЭМ (см. главу 11). Присутствие вирусных белков (антигенов) в иссле­дуемом материале может быть выявлено с помощью чувстви­тельных серологических реакций: ИФА, РИА и др.

Молекулярно-биологические исследования. Ви­русную ДНК в исследуемом материале обнаруживают с помо­щью ПЦР или метода ДНК-зондов.

Серодиагностика. Наличие специфических противовирусных IgM, выявляемых методом ИФА, свидетельствует об активной инфекции.

• Микробиологическая диагностика инфекции, вызванной ви­
русом ВК

МАТЕРИАЛ ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ: кровь, моча.

МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ:

Цитологическое исследование. В осадке мочи присутствуют измененные клетки с признаками ЦПД (увеличение клеток, наличие одиночных базофильных внутриядерных включе­ний).

Вирусоскопическое исследование. Зрелые вирусные частицы в моче и в зараженных клетках могут быть обнаружены мето­дом электронной микроскопии.

Вирусологическое исследование. Выделение BKV из крови и мочи осуществляют путем заражения клеточных культур чело­веческого и животного происхождения.

Экспресс-методы диагностики: иммунохимические и молеку-лярно-биологические исследования .Иммунохимические ис­следования. Присутствие вирусных белков (антигенов) в ис­следуемом материале может быть выявлено с помощью чувст­вительных серологических реакций: ИФА, РИА и др.

Молекулярно-биологические исследования. Вирус­ные ДНК в зараженных клетках обнаруживают методом ДНК-зондов (ДНК-гибридизации in situ), ПЦР.

Серодиагностика. Обнаружение антител к вирусным белкам является малоинформативным, поскольку антитела присутст­вуют также у здоровых вирусоносителей.

• Диагностические, профилактические и лечебные препараты

Живая ослабленная паротитная вакцина. Содержит аттенуи-рованный штамм вируса паротита. Применяют для специфи­ческой профилактики эпидемического паротита. Вводят парен­терально детям в возрасте 12—15 мес.

Живая ослабленная коревая вакцина. Содержит аттенуиро-ванный штамм вируса кори. Применяют для специфической профилактики кори. Вводят парентерально детям в возрасте 12—15 мес.

Иммуноглобулин человеческий противокоревой. Получают из крови серопозитивных здоровых доноров. Применяют для со­здания пассивного иммунитета с целью экстренной профи­лактики кори при контакте.

Живая ослабленная краснушная вакцина. Содержит аттенуи-рованный штамм вируса краснухи. Применяют для специфи­ческой профилактики краснухи. Вводят парентерально детям в возрасте 12—15 мес.

Иммуноглобулин нормальный человеческий. Получают путем фракционирования крови здоровых доноров. Неспецифичес­кий препарат, содержащий антитела различной специфичности. Применяют для создания пассивного иммунитета с целью экстренной профилактики паротита, кори, краснухи при кон­такте.

Вакцина ящура. Применяют для специфической профилак­тики ящура у сельскохозяйственных животных.

Осповакцина. Содержит вирус осповакцины. Применяют для специфической профилактики натуральной оспы. С 1980 г. обязательная вакцинация отменена.

Живая ослабленная пероральная аденовирусная вакцина. Со­держит аттенуированные штаммы аденовирусов серотипов 4 и 7. Применяют в ряде стран для специфической профилактики аденовирусной пневмонии у новобранцев.

Инактивированная культуральная вакцина против вирусов простого герпеса. Применяют для специфической профилакти­ки рецидивов простого герпеса.

Живая ослабленная вакцина против ветряной оспы. Содержит аттенуированный штамм вируса ветряной оспы/опоясывающе­го лишая. Применяют в ряде стран для специфической про­филактики ветряной оспы.

Иммуноглобулин человеческий против ветряной оспы. Полу­чают из крови серопозитивных здоровых доноров. Применяют для создания пассивного иммунитета с целью экстренной про­филактики ветряной оспы при контакте.

Противовирусные препараты. Интерферон человеческий лей­коцитарный; интерферон рекомбинантный; неовир и другие индукторы интерферона. Применяют для создания пассивно­го иммунитета с целью экстренной профилактики рецидивов и лечения герпесвирусных инфекций.

Ацикловир и его производные, цидофовир, аденозин-ара-бинозид, трифлюридин, ганцикловир, тромантадин, фоскар-нет. Применяют для профилактики рецидивов и лечения гер­песвирусных инфекций.

зистых оболочек, преимущественно респираторного и гени-тального тракта. HPVявляются возбудителями доброкачествен­ных разрастаний — папиллом (бородавок) ладоней и ступней (чаще HPVтипов 1, 2, 3, 4), ротовой полости и гортани (чаще HPV6 и 11-го типов), наружных половых органов — candyloma acuminatum (HPV 6, 11, 42—44-го типов). С ЯРК-инфекцией также связывают развитие ряда злокачественных новообразо­ваний: плоскоклеточного рака кожи, кератокарциномы, мела-номы — в клетках этих опухолей в некоторых случаях удается обнаружить HPV типов 37, 38, 41 и 48, интраэпителиальные неоплазии генитального тракта (шейки матки, вульвы, полово­го члена) ассоциированы преимущественно с HPV типов 6, 11, 16 и 18. Наиболее высоко онкогенными являются HPV типов 16 и 18. Эти вирусы в 90—100 % случаев обнаруживаются в опухолевых клетках при карциноме шейки матки и выявляются при раке прямой кишки и карциноме носоглотки и гортани.

Полиомавирусы вызывают опухоли у лабораторных живот­ных. У человека представители этого рода — вирусы ВК (BKV) и JC (JCV) — вызывают пожизненную бессимптомную латент­ную персистирующую инфекцию. Заболевания развиваются только на фоне иммунодефицита. BKV является возбудителем геморрагического цистита (см. главу 21). JCV вызывает разви­тие медленной инфекции — мультифокальной лейкоэнцефало-патии (см. главу 19).

Вирус Эпштейна—Барр является возбудителем инфекцион­ного мононуклеоза (см. главу 21) и вызывает пожизненную бессимптомную латентную инфекцию, персистируя в незрелых В-лимфоцитах. Латентная инфекция сопровождается транс­формацией В-лимфоцитов. При недостаточном защитном кле­точном иммунитете бесконтрольная пролиферация трансфор­мированных В-лимфоцитов может привести к развитию зло­качественной опухоли — лимфомы. Специальная лабораторная диагностика не проводится.