агулазы в пищеводе блохи формируется пробка из чумных бактерий (чумный блок), который блоха срыгивает в место укуса.
При попадании высоковирулентного штамма в популяцию животных – природных хозяев возбудителя чумы, среди животных наблюдается массовая гибель (эпизоотия), что вынуждает блох искать новые источники питания и нападать на человека.
При температуре тела блохи (280С) чумной микроб не образует F-АГ, V-W-АГ. При попадании в организм человека при температуре 370С начинает продуцировать эти факторы, в результате вирулентность возрастает. В месте внедрения Y.pestis поглощается макрофагами, где частично погибает, а выжившие бактерии попадают в регионарные лимфоузлы – развивается серозно-геморрагическое воспаление, образуется первичный бубон (спаянные между собой лимфатические узлы), который характеризуется резкой болезненностью. Гнилостная микрофлора вызывает нагноение бубона.
Сначала развивается бактериемия, а затем септицемия. Большое значение в патогенезе отводится незавершённому фагоцитозу, лимфогенному и гематогенному распространению возбудителя, развитию множественных полиаденитов и возникновению серозногеморрагических очагов в лимфатических узлах и внутренних органах, угнетению иммунных реакций. Этому способствуют и другие факторы патогенности возбудителя.
Выделяют 7 форм чумы: кожная форма сопровождается появлением некротической язвы у входных ворот; бубонная – резко увеличивается регионарный лимфоузел, развивается геморрагическое воспаление; первично-септическая форма – бурное начало, озноб, лихорадка, сильнейшая головная боль, возбуждение, бред, токсический шок, кома, чаще заканчивается смертью; вторично-септическая форма – осложнение других форм, течение очень тяжёлое, прижизненная диагностика затруднена; первично-легочная форма – наиболее тяжёлая и эпидемиологически очень опасная. Характеризуется тяжелой пневмонией с геморрагическими изменениями в легких и кровянистой жидкой мокротой с большим количеством возбудителя, присоединяются изменения со стороны сердечно-сосудистой системы, отёк лёгких, смерть; вторично-легочная форма – осложнение других форм; чума у вакцинированных больных протекает легче с удлинённым инкубационным периодом, но если не начинают активную терапию – заболевание может протекать так же тяжело, как у невакцинированных.
Иммунитет стойкий, клеточный, велика роль Т-лимфоцитов, макрофагов и завершенного фагоцитоза.
220
Лабораторная диагностика
Исследуют отделяемое из язв, пунктаты лимфоузлов, ликвор, кровь, мокроту.
Бактериоскопический метод. Готовят мазки, окрашивают по Граму с целью выявления грамотрицательных биполярных овоидных микроорганизмов.
Бактериологический метод. Материал сеют на простые питательные среды. Идентификацию возбудителя проводят по морфологическим, тинкториальным, культуральным, биохимическим, антигенным, биологическим свойствам и признакам патогенности.
Ускоренный бактериологический метод. Делают посев на среды со специфическим бактериофагом. Оценивают результаты по наличию негативных фаговых колоний.
Ускоренный метод для определения антигена возбудителя чумы в материале от больного. С этой целью можно использовать ИФА, РИФ, РПГА с антительным эритроцитарным диагностикумом.
Молекулярно-генетический метод – постановка ПЦР. Биологический метод. Заражают морских свинок с целью выде-
ления возбудителя и его идентификации.
Профилактика. Поскольку чума является особо опасной инфекцией, то профилактика должна проводиться в нескольких направлениях.
Активная специфическая профилактика проводится живой аттенуированной вакциной из штамма ЕV, реже используют химическую вакцину. Вакцинацию проводят лицам из группы риска (врачи инфекционных больниц, работники санитарно-эпидемиологической службы.) В очагах чумы вакцинируют пастухов, охотников, геологов, работников противочумных учреждений. Иммунитет сохраняется 6-8 месяцев. Неспецифическая профилактика предусматривает профилактическую работу по выявлению очагов чумы; дезинфекцию, дератизацию и дезинсекцию в очагах; раннюю диагностику заболевания, изоляцию и лечение больных; объявление карантина; обсервацию контактных; работу в специальных костюмах с материалом от больных или подозреваемых на заболевание чумой; охрану границ от заноса чумы; выполнение международных конвенций по профилактике чумы.
Лечение. Антибиотики с учётом чувствительности возбудителя к ним, чаще препараты тетрациклинового ряда (доксициклин), аминогликозиды, левомицетин. Параллельно вводят противочумную сыворотку или гамма-глобулин, для дезинтоксикации – полиглюкин, гемодез.
221
13.2. Гемофильные бактерии
Впервые гемофильные бактерии были выделены Р. Кохом в начале 80-х годов XIX века из конъюнктивального экссудата, а позднее М.И. Афанасьев (1891) и Пфейффер (1892) похожий инфект выделили из трупа больного, погибшего от гриппа, и его долго считали причиной гриппа.
Гемофильные бактерии относятся к семейству Pasteurellaceae, роду Haemophilus, который включает 16 видов, среди них есть сапрофиты и патогенные микроорганизмы.
Наибольшую роль в патологии играет H.influenzae, вызывающий воспалительные процессы дыхательных путей, менингиты, бронхиты, и H.ducreyi – возбудитель мягкого шанкра. H. aprophilus, H. paraprophilus вызывают эндокардиты.
Свойства
Морфология. Являются мелкими коккобактериями, выражен полиморфизм, имеют капсулу, не образуют спор, не имеют жгутиков, по Граму окрашиваются отрицательно.
Культуральные свойства. Факультативные анаэробы, прихотливы к питательным средам. Нуждаются в наличии факторов роста в среде. Этими факторами являются факторы Х или V, которые содержатся в эритроцитах: V – термолабильный кофермент, он является составной частью витамина В, содержится в дрожжах, в тканях растений и животных, участвует в энергетическом метаболизме; фактор Х – термостабильный, содержится в эритроцитах. Лучшими средами являются кровяной и шоколадный агар. На этих средах чаще вырастают S- формы колоний или М – слизистые колонии. Непатогенные, бескапсульные штаммы образуют R-формы колоний. Оптимальная температура роста 370С. Длительность роста – 36-48 часов. На кровяном агаре с добавлением сердечно-мозгового экстракта через 24 часа появляется рост мелких колоний с радужными переливами, гемолиз отсутствует. У беcкапсульных вариантов радужная расцветка не выявляется. На жидких средах с кровью рост чаще диффузный, реже – придонный.
Антигены. О – соматический (ЛПС) и К – капсульный полисахаридный антиген; по К-антигену выделяют в реакции агглютинации, ИФА, реакции преципитации с монорецепторными сыворотками 6 серовариантов (a, b, c, d, e, f). Белковый антиген М имеется у непатогенных штаммов.
Биохимические свойства. H.influenzae обладает каталазой, оксидазой, разлагает глюкозу, нуждается в X-, V-факторах. H.ducreyi не обладает сахаролитической активностью, нуждается в X-факторе,
222
имеет каталазу и оксидазу. H.aprophilus разлагает все углеводы короткого «пестрого ряда» до кислоты, не нуждается в X- и V-факторах. H.paraprophilus имеет оксидазу, разлагает все углеводы короткого «пестрого ряда», нуждается в V-факторе для своего роста.
Факторы патогенности: капсулы, пили, IgА-протеазы, липополисахаридные, гликопротеиновые факторы и эндотоксин.
Характеристика заболевания
Источник инфекции – больной человек и носители, в носоглотке которых локализуется возбудитель.
Путь передачи – воздушно-капельный, в меньшей степени контактный.
Патогенез связан с состоянием иммунной системы организма. Возбудители, особенно H.influenzae, могут быть в слизи носоглотки здоровых людей, но на фоне других заболеваний H.influenzae размножается на слизистых оболочках внутри- и внеклеточно, проникает в кровь, а через гематоэнцефалический барьер в мозговые оболочки, что приводит к менингиту.
Иммунитет после заболевания гуморальный, стойкий; естественный пассивный иммунитет от матери сохраняется 3-6 месяцев.
Лабораторная диагностика
Материал зависит от формы заболевания, чаще исследуют спинномозговую жидкость, мокроту, кровь или мочу.
Бактериоскопический метод носит ориентировочный характер, выявляют грамотрицательные полиморфные бактерии, чаще с капсулами.
Бактериологический метод. Делают посев на среды с кровью. Идентификацию проводят по культуральным, биохимическим и антигенным свойствам с использованием специфических монорецепторных сывороток.
Для выявления антигенов в исследуемом материале используют РИФ, ИФА, РПГА с антительным диагностикумом, ВИЭФ. Параллельно проверяют потребность в X и V-факторах. Исследуемую культуру сеют сплошным газоном на плотную питательную среду. На посев накладывают два бумажных диска, смоченных, соответственно X и V-факторами. Если рост выявляется вокруг дисков, то подтверждают зависимость культуры от этих факторов.
Можно использовать тест сателлитных культур. На чашку с посевом культуры на кровяном агаре наносят в нескольких местах культуру S.aureus, за счет выделяемого ими гемолизина вокруг колоний стафилококка наблюдается обильный рост исследуемой культуры.
Профилактика специфическая. Вводят химическую вакцину из капсульных антигенов H.influenzae по эпидемиологическим показани-
223
ям. Неспецифическая профилактика – изоляция и лечение больных, дезинфекция в очагах.
Лечение. Применяют антибиотики с учетом чувствительности. Чаще используют ампициллин, рифампицин, эритромицин.
13.3. Гарднереллы
Таксономия. Род Gardnerella, вид Gardnerella vaginalis.
Раньше их относили к роду Haemophilus, открыл их Гарднер и Дьюкс в 1955 г. Эти возбудители не нуждаются для своего роста и развития в факторах X и V как обычные гемофилы. Имеют свои отличительные признаки и другой путь передачи. В связи с этим их выделили в самостоятельный род.
Гарднереллы вызывают поражение урогенитального тракта в виде бактериального вагиноза, при котором резко уменьшается количество лактобактерий, т.е. изменяется экосистема влагалища, повышается рН среды, что способствует накоплению патогенных микроорганизмов.
Свойства
Морфологические – это коккобактерии малых размеров (0,3-2 мкм). В мазках могут располагаться одиночно, попарно, параллельно друг другу и в виде «V». По Граму окрашиваются неодинаково. Есть и грамположительные и грамотрицательные варианты. Могут иметь суданофильные включения. При окраске по Нейссеру выявляют метахроматические гранулы. Не имеют спор, капсул, жгутиков. Являются кислотонеустойчивыми. По химической структуре имеют принципиальное отличие и от грамположительных, и от грамотрицательных бактерий (отсутствуют тейхоевая и диаминопимелиновая кислоты, нет гидроксилированных жирных кислот, характерных для грамположительных бактерий).
Культуральные свойства. Хемоорганотрофы. Прихотливы к питательным средам. Нуждаются для своего роста в наличии биотина, фолиевой кислоты, ниацина, тиамина, рибофлавина. Лучшей средой является агар с кровью человека или пептон-крахмал-глюкозный агар. На кровяном агаре есть зоны гемолиза вокруг колоний, а на пептон-крахмал-глюкозном агаре в результате гидролиза крахмала образуются зоны просветления. В жидких средах дают помутнение и осадок. По типу дыхания – факультативные анаэробы. Оптимальная температура роста 35-370С, но могут расти и при температуре от 250С до 420С, рН среды 4,0, желателен доступ СО2. Длительность роста 2448 часов.
Биохимические свойства. Гарднереллы разлагают до кислоты глюкозу, мальтозу, рибозу, крахмал, инулин, непостоянно – лактозу,
224