Материал: Новиков Д.К. Медицинская микробиология

выделил возбудителя при инфекционном аборте свиней. В 1920 г. все эти возбудители были отнесены к одному роду, и в честь первого открывателя Д. Брюса род получил название Brucella, семейство Brucellaceae, а виды получили различные названия, зависящие от источника инфекции:

B.melitensis – мелкий рогатый скот. B.abortus (bovis) – крупный рогатый скот.

B. suis – свиньи. B.canis – собаки. B. ovis – овцы.

B.neotomаe – крысы.

Заболевание у человека чаще вызывают первых три возбудителя.

Свойства

Морфологические. Бруцеллы представляют собой мелкие, грамотрицательные коккобактерии, не имеют жгутиков и спор, могут образовывать капсулу при культивировании на специальных средах с добавлением иммунной сыворотки.

Культуральные свойства. Бруцеллы растут на сложных средах с добавлением глюкозы, крови, тиамина и биотина. Первые генерации размножаются очень медленно (2-4 недели), последующие – 1-2 недели. Можно культивировать их на печеночных средах. На плотных средах бруцеллы могут диссоциировать на S и R-формы, а под действием антибиотиков могут переходить в L-формы. Строгие аэробы. B.abortus в первых генерациях являются микроаэрофилами и нуждаются в повышенной концентрации углекислого газа (5-10%).

Биохимические свойства. Разлагают глюкозу и некоторые другие углеводы до кислоты, разлагают мочевину, аспарагин, гидролизуют белки до аминокислот, а B.abortus – до сероводорода. Выделяют каталазу, пероксидазу, липазу, фосфатазу, гиалуронидазу. С учетом ферментативной активности, чувствительности к фуксину и тиамину, лизабельности фагом Т-6 и способности агглютинироваться монорецепторными сыворотками бруцеллы подразделяются на биовары. B. melitensis имеет 3 биовара, B. abortus – 8, B.suis – 4.

Антигенные свойства. Бруцеллы имеют два термостабильных соматических антигена А и М. Количество их варьирует у разных видов бруцелл. Есть еще L-антиген – поверхностный термолабильный, сходен с Vi-антигеном у сальмонелл. У R-форм бруцелл есть R- антиген. Его определяют специфическими антисыворотками при серотипировании бруцелл. Имеется G-антиген – полисахаридный, общий для всех бруцелл.

Факторы патогенности: эндотоксин, гиалуронидаза, низкомолекулярные продукты бруцелл ингибируют фагосомо-лизосомальное слияние, что способствует незавершенному фагоцитозу.

230

Устойчивость в окружающей среде. Устойчивы к низким температурам, долго сохраняются в почве, навозе (4-5 месяцев), в шерсти овец (3-4 месяца). В замороженных мясных продуктах сохраняют жизнеспособность до 5 месяцев. К высоким температурам, дезинфицирующим растворам и УФ-лучам бруцеллы очень чувствительны, что используется для неспецифической профилактики бруцеллеза.

Характеристика заболевания

Источники инфекции – больные животные.

B.melitensis, B.abortus, B. suis являются патогенными для людей.

B.ovis, B. canis и B.neotomae патогенны только для животных и грызунов. Все они выделяются в окружающую среду и обсеменяют ее.

Пути передачи – алиментарный (через мясные и молочные продукты от больных животных при недостаточной их термической обработке); контактный (прямой контакт с больными животными, у них особенно много возбудителя в околоплодных водах; возможен непрямой контакт через объекты окружающей среды); воздушно-

капельный.

Входные ворота – кожа и слизистые (даже неповрежденные). Патогенез. От входных ворот бруцеллы диссеминируют лимфо-

генно и гематогенно. Депонируются в лимфоузлах, проникают в макрофаги, благодаря незавершенному фагоцитозу размножаются. Параллельно происходит диффузная пролиферация и гиперплазия элементов макрофагальной системы. Попадая в кровь, бруцеллы инфицируют печень, селезенку, почки, костный мозг, ткани лимфопоэтической системы. Бактерицидные факторы крови частично разрушают возбудителя, в результате выделяется эндотоксин, который способствует появлению очагов некроза в пораженных органах. При аэрогенном проникновении возбудителя первым признаком заболевания является вялотекущая пневмония. В патогенезе заболевания имеет значение рано развивающаяся ПЧЗТ. Она сохраняется в течение всей болезни и длительное время после выздоровления. При бруцеллезе развивается вторичный иммунодефицит. Бруцеллы могут персистировать в организме, переходя в L-формы и обеспечивать рецидивы заболевания.

Клинические проявления очень разнообразны. Развиваются полиартрит, невриты, миозиты, пневмония, орхиты, эпидидимиты, часто прерывается беременность. Заболевание приводит к длительной потере трудоспособности и временной инвалидности.

Лабораторная диагностика

Так как заболевание протекает по типу хрониосепсиса, а возбудители плохо культивируются, имеют сходные антигены и малую биохимическую активность, основными методами диагностики явля-

ются серологический и аллергический.

231

Для серологического диагноза исследуют сыворотку первоначально качественным методом (реакция Хеддельсона), а затем количественным (реакция Райта). Реакция Хеддльсона ставится на стекле с концентрированной сывороткой больного в разных количествах с единым бруцеллезным диагностикумом. Для подтверждения диагноза ставят развернутую реакцию агглютинации Райта. Диагностический титр реакции составляет 1:100-1:200. С этой же целью можно использовать РСК, РПГА, ИФА. В ранних сроках в сыворотке выявляют IgМ, в поздних – IgG.

Аллергический метод – кожно-аллергическая проба Бюрне с

бруцеллином (протеиновый фильтрат культуры бруцелл) для выявления ПЧЗТ.

Для ускоренной диагностики используют РИФ с целью выявления антигена в синовиальной жидкости, ликворе, крови или моче. Можно использовать пробу Банга для выявления антигена в молоке. Реакция проводится по принципу кольцепреципитации.

Бактериологический метод проводят в специализированных лабораториях. Делают посев 5-10 мл крови на вышеуказанные жидкие среды. Затем пересевают на плотные среды и через 3-4 недели проводят идентификацию выделенной культуры по антигенным и биохимическим свойствам (таблица № ). Метод используют редко.

Таблица №

Дифференциальные признаки типов бруцелл

Молекулярно-биологический метод – применяют полимеразную цепную реакцию (ПЦР).

Профилактика: неспецифическая – обеззараживание продуктов от больных животных, обработка стойл. Обязательно использование молочных и мясных продуктов с достаточной термической обработкой. Специфическая профилактика – вакцинация лиц из группы риска (работников специализированных лабораторияй, ветврачи, доярки, работники мясокомбинатов) живой ослабленной бруцеллезной вакциной из вакцинного штамма B.abortus. Активный искусственный

232

иммунитет сохраняется 1-3 года. Ревакцинацию проводят, если титр антител низкий и нет ПЧЗТ. Имеется химическая вакцина.

Лечение – убитая вакцина, антибиотики тетрациклинового ряда, стрептомицин, рифампицин, стимуляторы иммунитета.

13.6. Возбудитель туляремии

Туляремия – зоонозное природно-очаговое особо опасное заболевание, протекающее с интоксикацией, лихорадкой с явлениями лимфаденита и поражением различных органов. Возбудитель впервые был обнаружен Ч. Мак-Коем и Ш. Чепиным в 1921 г. при изучении чумоподобного заболевания у сусликов в местности Туляре в Калифорнии и назван Bacterium tularense. В 1921 г. Э. Френсис доказал, что этот возбудитель патогенен для человека. В результате было дано название роду – Francisella, а виду – F.tularensis.

Таксономия. Семейство Brancicellaceae, род Francisella, виды:

F. tularensis, F. novicida (патогенность для людей не доказана).

Свойства

Морфологические. Мелкие, полиморфные, грамотрицательные биполярно окрашиваемые коккобактерии, неподвижны, не имеют спор, есть тонкая слизистая капсулоподобная оболочка. Содержат Г+Ц в ДНК 33-36 моль%.

Культуральные свойства. Аэробы, метаболизм окислительный. Очень прихотливы к питательным средам, для роста нуждаются в аминокислотах, пантотеновой кислоте, ионах Мg2+, растут на яичных или на агаровых средах с кровью, лецитином, цистином, рост медленный, скудный (через 3-7 дней). Колонии нежные, блестящие, бесцветные (S-формы). На жидких средах – скудный поверхностный рост. Лучше культивируются в организме морских свинок и кроликов.

Биохимические свойства. Ферментируют глюкозу, мальтозу до кислоты. Белки разлагают до сероводорода, выделяют каталазу, глутаминазу, аспарагиназу, цитруллинуреидазу, не выделяют оксидазу.

Антигенные свойства различны у S- и R-форм туляремийного возбудителя. S-формы имеют 2 антигена: О-АГ – соматический и ViАГ – поверхностный, который выявляется у свежевыделенных культур и обеспечивает вирулентность. У R-форм присутствует только О- антиген. В О-антигене возбудителя туляремии есть общие субстанции с антигенами бруцелл, что может приводить к перекрестным реакциям.

Географические расы (подвиды) возбудителей туляремии:

1. Голарктическая – встречается в странах северного полушария. Не имеет фермента цитруллинуреидазы, не ферментирует глицерин, слабо патогенна для кроликов.

233

2.Среднеазиатская – слабо патогенна для кроликов, имеет цитруллинуреидазу, ферментирует глицерин.

3.Американская – высокопатогенна для кроликов, выделяет цитруллинуреидазу, ферментирует глицерин.

Факторы патогенности. Возбудители туляремии имеют капсулу, которая угнетает фагоцитоз. Фагоцитоз носит незавершённый характер, возбудители размножаются в фагоцитах, подавляя их киллерный эффект. Выделяют нейраминидазу, что способствует адгезии. Аллергены клеточной стенки вызывают ПЧЗТ, имеются рецепторы для взаимодействия с Fс-фрагментами иммуноглобулинов класса IgA. Это способствует нарушению активности комплемента и фагоцитоза. При разрушении выделяют эндотоксин.

Устойчивость возбудителя в окружающей среде: возбудители достаточно устойчивы. В воде при 40С сохраняются 4 месяца, при температуре 200С – 2 месяца. Чувствительны к высоким температурам (60-800), к дезинфицирующим веществам (карболовой кислоте, лизолу), к антибиотикам.

Характеристика заболевания

Источники инфекции. Естественные хозяева возбудителя – грызуны, хомяки, зайцы, домашние мыши, крысы, животные.

Пути передачи. Контактный – при контакте с больными животными или их трупами; алиментарный – через воду и продукты, инфицированные возбудителем. Возможна передача клещами, комарами, которые являются переносчиками. От больного человека возможно заражение только при вторичной бубонной форме.

Входные ворота: кожа, слизистые глаз, ротовой полости, носа, пищеварительного тракта. Возможно проникновение возбудителя через неповрежденную кожу. У входных ворот часто появляется местная реакция в виде язвы.

Патогенез заболевания. От входных ворот возбудитель попадает

влимфу, лимфатические узлы, проникает в фагоциты, но не разрушается в них, размножается, после чего проникает в кровь. В очагах скопления возбудителя образуются специфические туляремийные гранулёмы, т.е. первичные бубоны. При дальнейшем распространении возбудителя могут появляться вторичные бубоны. Бактерицидные факторы крови действуют на возбудителя, он разрушается, высвобождается эндотоксин, который способствует появлению реактивных проявлений со стороны внутренних органов и тканей, развивается ПЧЗТ.

Клинические формы: бубонная (ангинозно-бубонная, глазобубонная, язвенно-бубонная); легочная форма – результат гематогенного заноса возбудителя или при заражении от больного человека воз- душно-капельным путём; генерализованная форма – чаще при зара-

234