K. rhinoscleromatis вызывает склерому – хроническое заболевание дыхательных путей человека, сопровождающееся образованием инфильтратов на слизистых носа, глотки, трахеи, которые постепенно превращаются в рубцы и затрудняют дыхание. Реже развиваются атрофические формы риносклеромы.
Свойства общие для всех клебсиелл, но не обладают ферментативной активностью, непостоянно могут разлагать только глюкозу, используют цитрат, имеют специфические АГ, при микроскопии юных колоний выявляются палочки, плотно расположенные по концентрическим окружностям. В организме могут располагаться внутриклеточно, образуя гигантские «клетки Микулича», в склеромной ткани много плазмоцитов.
Иммунитет непрочный, в основном носит клеточный характер, возможна ПЧЗТ.
Лабораторная диагностика
Бактериоскопический (цитологический) метод – выявление типичной морфологии возбудителя в соскобе пораженных тканей и феномена «набухания» капсул со специфическими сыворотками.
Бактериологический метод. Посев на среды с мочевиной, углеводом, бромтимоловым синим. Идентификация по морфологическим, культуральным, биохимическим, антигенным свойствам в реакции агглютинации или преципитации со специфическими К-сыворотками и действию специфического бактериофага.
Серологический метод. РСК, РПГА, ИФА со специфическими О- антигенами. Диагностическое значение имеет четырехкратное увеличение титра антител.
Для идентификации по структуре ДНК используют ПЦР. Профилактика неспецифическая (соблюдение санитарно-
гигиенических норм).
Лечение – аминогликозиды и бета-лактамные антибиотики широкого спектра действия с учетом чувствительности к ним, иммуностимуляторы.
13.1.5. Протеи
Общая характеристика. Род Proteus относятся к семейству
Enterobacteriaceae и включает P. mirabilis, P. myxofaciens, P. рenneri, P. vulgaris, P.hauseri. P. mirabilis выделил Хаузер из гниющего мяса
(1885 г.) и предложил название рода, связанное с изменчивостью признаков проявления роста на твердых средах. Близкими к роду Proteus
являются роды Providencia (виды P.rettgeri, P.alcalifaciens, P.stuartii и
др., всего 5 видов), а также род Morganella (содержит один вид,
M.morganii).
210
Распространенность. Протеи – постоянные обитатели кишечника человека, многих видов позвоночных и беспозвоночных животных, встречаются в почве, сточных водах и гниющих органических субстратах. Протеи вызывают инфекции мочевыводящих путей, сепсис у больных с иммунодефицитами.
Свойства. Прямые палочки размерами 1-3х0,4-0,8 мкм, иногда выглядят в виде нитей или кокков, обладают подвижностью за счет жгутиков (перитрихи), факультативные анаэробы, хемоорганотрофы, имеют дыхательный и ферментативный метаболизм. Обладают каталазной активностью, сбраживают углеводы с образованием кислоты и газа, разжижают желатин, выделяют сероводород, гидролизуют мочевину, восстанавливают нитраты.
Культуральные свойства. Виды отличаются по способности выделять индол (P. vulgaris), расщеплению мальтозы (P. mirabilis), по реакции Фогеса-Проскауэра (положительна у P. mirabilis и P.myxofaciens), выделению сероводорода (тест отрицателен у P.myxofaciens и слабоположителен у P. рenneri) и другим свойствам. Растут на простых средах при 35-37оС, но могут расти в диапазоне от 10 до 430С, рН 7,2-7,4. В О-форме колонии округлые, выпуклые и полупрозрачные; в Н-форме – ползучий, роящийся рост. Характерен гнилостный запах (индол, сероводород). При росте на висмутсульфитном агаре образуют серо-коричневый пигмент, а на среде Эндо – бесцветный налет.
Антигенная структура. У протеев выявляют 49 О-, 19 Н- и К- антигены. Для антигенной идентификации определяют О- и Н-Аг. При встречном росте на чашках с агаром P. vugaris и P. mirabilis у протеев с одинаковыми Н-АГ происходит слияние зон роста, а если Н-АГ неодинаковы, зоны роста не сливаются.
Факторы патогенности: эндотоксин, фимбрии, бактериальные протеазы и уреазы, гемолизины и гемагглютинины, факторы адгезии.
1.Выделение уреазы характерно для рода Proteus. Гидролиз мочевины приводит к образованию хлорида аммония, вызывающего воспаление, повышающего рН, что в итоге приводит к образованию камней и застою мочи.
2.Адгезины, имеющиеся у «роящихся» бактерий обеспечивают прикрепление к паренхиме почек и эпителию.
3.P. vulgaris, P. mirabilis и P. penneri выделяют гемолизины и цитолизины, которые вызывают лизис эритроцитов и разрушение клеток эпителия, нейтрофилов и фибробластов.
4.Фимбрии P. mirabilis вызывают агглютинацию эритроцитов.
5.Протеи выделяют протеазы, разрушающие IgA и IgG, повышающие проницаемость сосудов.
Лабораторная диагностика
211
Бактериологический метод – выделение возбудителя.
Протеи определяют по характерному роящемуся, ползучему росту на плотных питательных средах, когда они образуют концентрические кольца по периферии колонии. Чистые культуры идентифицируют на виды по свойствам на дифференциально-диагностических средах. В отличие от других энтеробактерий протеи дезаминируют фенилаланин. Можно использовать фаготипирование протейным фагом.
Профилактика и лечение. Неспецифическая – общесанитарные мероприятия. Для специфической иммунопрофилактики и иммунотерапии используют вакцину из антигенов, полученных из Proteus vulgaris. Препарат предназначен для профилактики протейной инфекции при обширных травматических повреждениях мягких тканей, открытых переломах. Он используется для иммунотерапии гнойновоспалительных заболеваний и осложнений, вызванных протеем. Вакцину применяют для взрослых подкожно.
Бактериофаг протейный жидкий представляет собой стерильный фильтрат фаголизата протеев видов vulgaris и mirabilis и предназначен для лечения заболеваний, вызванных этими протеями.
Плазму противопротейную человеческую получают от доноров, иммунизированных протейной вакциной. Она применяется для иммунотерапии больных с заболеваниями и осложнениями, вызванных протеем.
Протеи нередко устойчивы к антибиотикам. Для лечения назначают ампициллин, цефалоспорины и фторхинолоны.
13.1.6. Иерсинии
13.1.6.1. Иерсинии псевдотуберкулеза
Возбудитель псевдотуберкулеза – Yersinia pseudotuberculosis. Впервые выявлен французскими учеными Малассе и Виньялем в 1883 г. в материале от умершего ребенка с диагнозом туберкулезного менингита. Позже Эберт выделил возбудителя в чистой культуре, изучил свойства и отметил общие с туберкулезом патоморфологические изменения в пораженных органах.
Морфология. Короткая полиморфная овоидная палочка с закругленными концами хорошо воспринимает анилиновые красители, грамотрицательна. Лучше прокрашивается по полюсам – биполярно. В мазках из бульонных культур располагается парами или короткими цепочками. В мазках из агаровой культуры могут быть ветвистые, нитевидные формы. Подвижна при температуре 18-200С, при 370С движение прекращается.
212
Культуральные свойства. Растет на простых и даже голодных средах, факультативный анаэроб. Разработаны и применяются жидкие специальные и плотные питательные среды, например плотная среда Серова (МПА, глюкоза, мочевина, молибденовокислый аммоний, желчь, генцианвиолет, индикатор конгорот – среда темно-вишневого цвета) и жидкая среда Серова (1% пептонная вода, глюкоза, феноловый красный). Оптимальная температура роста 22-280С, могут расти при 40С. Колонии на плотных средах мелкие, полупрозрачные с нежным фестончатым краем, полиморфны по цвету и величине, могут образовывать золотисто-коричневый пигмент. В S-форме колонии напоминают росинки. На плотных средах кроме S-колоний могут появляться R-формы и SR – переходные. При росте на плотной среде дают неприятный запах.
Биохимические свойства. Активны, расщепляют до кислоты многие углеводы: глюкозу, рамнозу, мальтозу, маннит, глицерин, декстрин; не расщепляют лактозу, сахарозу. Обладают уреазной активностью, восстанавливают нитраты в нитриты.
Факторы патогенности. При разрушении высвобождают эндотоксин с гемолитическими свойствами, который вызывает гемолиз эритроцитов кролика, морской свинки, барана, лошади и не лизирует эритроциты человека. Выражены аллергизирующие свойства.
Антигенная структура. Выделено три антигена: Н-жгутиковый, два соматических О- антигена: S и R. R – общий для всех иерсиний, по S-антигену различают 10 сероваров. От людей чаще выделяют 1, 3 и 4 серовары. Иерсинии 1 и 3 сероваров – токсигенны.
Устойчивость во внешней среде. Чувствительны к нагреванию, высушиванию, дезсредствам; устойчивы к холоду, переносят температуры до –250С. Вне организма в молоке сохраняются до 16 дней, могут размножаться; в хлебе – 24 дня; в масле – 145 дней; в воде – до 244 дней. Долго сохраняются на свежих овощах, фруктах, в квашениях и могут там размножаться.
Характеристика заболевания
Источники инфекции – грызуны, зайцы, лисы, крупный рогатый скот, свиньи и другие животные. Грызуны выделяют иерсинии во внешнюю среду с калом, мочой, загрязняя ее. Это способствует заражению домашних животных, создается дополнительный резервуар инфекции. Люди инфицируются от грызунов и других животных алиментарным путем через продукты, чаще овощные, не подлежащие термической обработке – квашения, салаты. Случаев заражения людей непосредственно от грызунов чрезвычайно редки. Роль человека как источника инфекции не доказана. Чаще болеют дети в возрасте от 3-х лет и старше в любой сезон года, но заболеваемость выше в осен- не-зимнее время.
213
Патогенез. Вместе с пищей возбудитель поступает в слизистую оболочку илеоцекального угла, область слепой кишки, аппендикулярный отросток. Инкубационный период длится в среднем 8-10 дней Патогенность Y.pseudotuberculosis связана с продукцией токсинов и действием ЛПС клеточной стенки. По лимфатическим путям попадают в регионарные лимфатические узлы, затем в кровь. Начало острое, развивается интоксикация, вызванная эндотоксином. Патологические процессы могут развиться в печени, селезенке, легких, суставах и т.д. Клинические формы псевдотуберкулеза самые разнообразные. Всем формам сопутствует аллергия в виде крапивницы. Псевдотуберкулез – токсикоинфекция с циклическим течением, поражением желудочнокишечного тракта, лимфаденитом, поражением различных органов. Летальность 0,3%.
Лабораторная диагностика
Материал для исследования берется различный, но при всех клинических формах обязательно исследуются фекалии.
Бактериологический метод. Первичный посев исследуемого материала производят в консервант – фосфатный буфер или жидкую среду накопления, Серова. В глицериновом консерванте иерсинии гибнут. Посевы выдерживают в холодильнике до 30 суток, делая каждые 3-4 дня высевы на плотные среды, например Эндо, Серова. Выращивание производят при комнатной температуре. Подозрительные колонии пересевают на скошенный агар или на среду Эндо в сектора. Выделенную культуру идентифицируют по комплексу морфологических, культуральных, биохимических, серологических свойств, фаголизабельности. Обязательно дифференцируют от возбудителя чумы (Y.pestis) и от возбудителя кишечного иерсиниоза (см. табл. 10).
Биобактериологический метод. Для накопления иерсиний материалом заражают белых мышей или морских свинок с последующим выделением и идентификацией культуры.
Серологический метод. Применяется на 7-14 дни болезни. Ставится реакция агглютинации (титр 1:200) или в более ранние сроки – РПГА (титр 1:100) с набором эритроцитарных диагностикумов, несущих антигены разных типов иерсиний. Реакция ставится в динамике заболевания, регистрируется нарастание титра антител.
Дополнительно можно ставить экспресс-методы – РПГА для обнаружения возбудителя в материале или МИФ с этой же целью.
Таблица 10.
Дифференциация возбудителей псевдотуберкулеза от возбудителей чумы
214