Материал: Методы исследования в медицинской бактериологии

31

Рисунок 22 – Бактериологические шпатели. Заимствовано из Интернет-ресурсов.

Подготовленные принадлежности стерилизуют в специальных цилиндрических решетчатых корзинах или в биксах (рисунок 23).

а б Рисунок 23 – Биксы без бактериального фильтра (а) и с бактериальным фильтром

(б). Заимствовано из Интернет-ресурсов.

Стерилизацию подготовленных материалов проводят, как правило, в паровых стерилизаторах (автоклавах) с вертикальной или горизонтальной загрузкой (рисунок 24).

Рисунок 24 – Различные марки паровых стерилизаторов. Заимствовано из Интернетресурсов.

32

Косновному оборудованию бактериологических лабораторий относятся также штативы, колбы, световые и люминесцентные микроскопы, термостаты и др.

Всовременных бактериологических лабораториях широкое распространение получают автоматизированные системы, например, система WASP (автоматизированная система посева клинических образцов, Copan, Италия), система BD Phoenix 50 (автоматизированная система идентификации микроорганизмов и определения антибиотикочувствительности, Becton Dickinson, США); система ADAGIO (анализатор антибиотикограмм ДДМ, Bio-Rad, США); система MALDI Biotyper (система быстрой идентификации микроорганизмов, Bruker Daltonik, Германия); система Anoxomat (система для создания специальной атмосферы, Advanced Instruments Inc., США).

Квспомогательному оборудованию относятся боксы микробиологической безопасности, холодильники, морозильники, микробиологические инкубаторы,

сухожаровые шкафы, СО2-инкубаторы, весы, рН-метры, шейкеры, центрифуги, системы очистки воды и др.

2.4. Приемы асептической работы с микроорганизмами

При работе в микробиологической лаборатории необходимо соблюдать правила асептики, препятствующие с одной стороны загрязнению чистой культуры бактерий посторонними микроорганизмами и с другой стороны - распространению микробов во внешней среде.

Асептическое извлечение микробной культуры бактериологической петлей из пробирки производится следующим образом (рисунок 25):

-поставить в штатив пробирку с исследуемой культурой и бактериологическую петлю ручкой вниз;

-зажечь горелку;

-взять левой рукой пробирку как карандаш пробкой вверх, правой рукой - бактериологическую петлю за ручку кольцом вниз;

-профламбировать петлю, прокалив ее до красного каления, и держатель петли в пламени горелки;

-над пламенем горелки извлечь из пробирки пробку, прижав ее к ладони правой руки;

-над пламенем ввести петлю в пробирку, прикоснуться ею к стенке пробирки для охлаждения, погрузить петлю в культуру или прикоснуться к газону культуры на поверхности среды;

-извлечь петлю с культурой, профламбировать край пробирки и пробку, вставить пробку в пробирку, поставить пробирку в штатив;

-каплю культуры с петли использовать по назначению;

-профламбировать бактериологическую петлю и поставить ее в штатив ручкой вниз.

34

-взять пробирку с культурой левой рукой как карандаш, извлечь над пламенем спиртовки пробку, прижав ее мизинцем к ладони правой руки;

-опустить пипетку в наклоненную пробирку, погрузить его в жидкую культуру; после заполнения культурой части пипетки, плотно закрыть ее толстый конец указательным пальцем правой руки, извлечь пипетку с культурой;

-профламбировать край пробирки и пробку, закрыть пробирку пробкой, поставить пробирку в штатив;

-вылить культуру из пипетки по назначению (на стекло, в среду);

-поместить пипетку в дезраствор.

Рисунок 26 – Асептическое извлечение жидкой культуры пипеткой Пастера. Заимствовано из Интернет-ресурсов.

Наполнение пипетки Пастера жидкой культурой осуществляется за счет капиллярных сил, а слив - под действием силы тяжести. Для наполнения пипеток больших объемов (мерных пипеток, пипеток Мора) необходимо создавать разрежение, а для слива - давление. Это достигается специальными приспособлениями (резиновыми баллончиками, дозаторами и пр.). В современных лабораториях широкое распространение получают автоматические пипетки со стерильными съемными наконечниками.

Пересев культуры микробов из пробирки в пробирку (рисунок 27)

производится в следующей последовательности:

-поместить в штатив бактериологическую петлю, пробирки с культурой и со средой, подписать их;

-зажечь горелку;

-взять пробирки как карандаш в левую руку и разъединить их на 1-1,5 см средним пальцем;

-профламбировать бактериологическую петлю; затем края пробирок; извлечь пробки из пробирок правой рукой, зажав одну пробку между ладонью и мизинцем, вторую - между мизинцем и безымянным пальцами;

-ввести бактериологическую петлю в пробирку с культурой, прикоснуться петлей к стенке для охлаждения;

-погрузить петлю в культуру, извлечь каплю и перенести ее в питательную

среду;

35

-извлечь петлю;

-профламбировать края пробирок и пробки и закрыть ими пробирки;

-профламбировать петлю и поставить ее в штатив.

Рисунок 27 – Пересев культуры микробов из пробирки в пробирку. Заимствовано из Интернет-ресурсов.

Пересев культуры микробов из пробирки в чашку Петри (рисунок 28)

производится в следующей последовательности:

-поместить пробирку с культурой и бактериологическую петлю в штатив, а чашку – перед горелкой;

-зажечь горелку;

-взять левой рукой пробирку с культурой как карандаш;

-профламбировать петлю;

-профламбировать край пробирки, правой рукой извлечь пробку, прижав ее мизинцем к ладони правой руки;

-опустить бактериологическую петлю в пробирку, прикоснуться к стенке, извлечь каплю культуры;

-профламбировать край пробирки и пробку, закрыть пробирку пробкой и поставить ее в штатив;

-приподнять большим и средним пальцами левой руки крышку чашки Петри, прикоснуться петлей к среде у края под левой ладонью, провести параллельные штрихи от края до края (на расстоянии 3 мм) вплоть до края правой руки, извлечь петлю, накрыть чашку крышкой;

-профламбировать петлю, поместить ее в штатив;

-поместить чашку Петри в термостат вниз крышкой.