Материал: Методы исследования в медицинской бактериологии

41

При исследовании на кишечную и тифо-паратифозную группу (сальмонеллы, шигеллы) применяют мазок из прямой кишки. В этом случае забор материала производят в пробирку со средой Кэри-Блейр.

При отборе испражнений из судна стараются отобрать слизь, гной, фибриновые пленки. При отборе испражнений петлей или тампоном целесообразно сразу же сделать посев материала на питательную среду. При невозможности проведения посева у постели больного допускается смыть материал с петли или тампона в пробирку со стерильным физраствором для отправки в лабораторию.

Желчь (10–20 мл) отбирают во время дуоденального зондирования. В отдельные пробирки собирают все три порции желчи (А, В и С). Конец зонда предварительно обрабатывают спиртом, затем после выделения 1–2 мл желчи (для исследования не используется) наполняют пробирки непосредственно через зонд или с помощью стерильного шприца.

Мочу (20–30 мл) собирают в стерильную, плотно закрывающуюся посуду при помощи стерильного катетера после предварительного обмывания половых органов с мылом и ополаскивания их стерильным физраствором. Для бактериологического исследования мочи используют среднюю порцию мочи в количестве 20-40 мл. Для сбора мочи на бакпосев используют также вакуумную систему для сбора мочи и систему UriSwab с тампоном-губкой (рисунок 34).

а б

Рисунок 34 – Емкости для отбора мочи (а) и система UriSwab с тампоном-губкой (б). Заимствовано из Интернет-ресурсов.

Трупный материал забирается при вскрытии трупа. Для этого поверхность внутренних органов прижигают раскалённым пинцетом, затем вырезают кусочки органов 1–2 см3.

При подозрении на анаэробную инфекцию (неприятный запах отделяемого, гнилостный характер поражения, экссудат серо-зеленого цвета, наличие газа в тканях и др.) материал отбирают во время вскрытия или дренирования очага в строго анаэробных условиях. Содержимое замкнутых полостей пунктируют стерильным шприцем, и материал вносят во флакон с бескислородной газовой смесью либо в специальную транспортную среду для анаэробов. При анаэробной инфекции не допускается отбор проб с помощью тампонов и с поверхности ран.

42

Для транспортировки исследуемого материала в лабораторию используют специальные транспортные среды: Эймса, Кэри-Блейр, Стюарта. Среды выпускаются в индивидуальных упаковках, стерилизованы оксидом этилена, стик (палочка) полистироловый, тампон вискозный.

Транспортная среда Эймса (Amies) содержит агар и набор солей (натрия хлорид, динатрия гидрофосфат, калия дигидрофосфат, калия хлорид, магния хлорид, натрия тиогликолят). Она используется для транспортировки широкого круга биоматериалов: отделяемого из наружного уха (на аэробные и факультативно анаэробные микроорганизмы), слизи и пленок из носа и зева (на возбудителя дифтерии, стафилококк, возбудителей коклюша и паракоклюша, гемолитический стрептококк и др.), отделяемого раневых поверхностей (на аэробные и факультативно анаэробные микроорганизмы), отделяемого урогенитального тракта (на гонококк) и др. Среда Эймса позволяет более 3 дней поддерживать жизнеспособность таких микроорганизмов как Neisseria, Haemophilus,

Corynebacterium, Streptococcus, Enterobacteriaceae (рисунок 35).

Рисунок 35 – Транспортная среда Эймса. Заимствовано из Интернет-ресурсов.

Транспортная среда Кэри-Блейр (Cary-Blair) содержит агар и соли (натрия хлорид, динатрия гидрофосфат, кальция хлорид, натрия тиогликолят). Среда предназначена для транспортировки возбудителей кишечных инфекций (рисунок 36). Среда Кэри-Блейр позволяет сохранять большинство патогенов, включая требовательные микроорганизмы (Neisseria sp., Haemophilus sp., Streptococcus sp.).

Данная среда является стандартной для транспортировки анаэробов.

43

Рисунок 36 – Транспортная среда Кэри-Блейр. Заимствовано из Интернет-ресурсов.

Транспортная среда Стюарта (Stuart) содержит агар, натрия тиогликолят, натрия глицерофосфат, кальция хлорид и метиленовый синий. Среда предназначена для сохранения и транспортировки широкого спектра патогенных бактерий

(Neisseria gonorrhoeae, Haemophilus influenzae, Corynebacterium diphtheriae и др.).

Наиболее требовательные микроорганизмы сохраняются в данной среде сутки, остальные – несколько дней. Наличие в среде тиогликолата натрия подавляет ферментативную активность бактерий, а отсутствие азота предотвращает их размножение (рисунок 37).

Рисунок 37 – Транспортная среда Стюарта. Заимствовано из Интернет-ресурсов.

Материал для микробиологического исследования от пациента может быть отобран в лаборатории, в процедурном кабинете или в кабинете лечащего врача. Отобранный материал отправляют в лабораторию не позднее 24 часов с момента забора в биксах или в специальных контейнерах (рисунок 38).

44

Рисунок 38 – Укладка-контейнер для доставки биоматериалов в лабораторию. Заимствовано из Интернет-ресурсов.

Транспортировку биологического материала в лабораторию проводят при соблюдении температурного режима. При невозможности быстрой доставки пробы в лабораторию материал хранят в холодильнике при температуре плюс 4ОС. Материал без консерванта допускается хранить в холодильнике при температуре +4ОС в течение 1-2 суток, а консервированные в 50% глицерине кусочки органов – в течение нескольких недель.

При необходимости транспортировку биологического материала в лабораторию осуществляют в термоконтейнерах (рисунок 39).

Рисунок 39 – Медицинский термоконтейнер. Заимствовано из Интернет-ресурсов.

Материал, содержащий анаэробные бактерии, транспортируют в условиях, исключающих воздействие кислорода. Для взятия такого материала используют специальные флаконы, заполненные бескислородной газовой смесью и специальной транспортной средой (рисунок 40).

45

Рисунок 40 – Флаконы для культивирования анаэробов. Заимствовано из Интернетресурсов.

Не подлежат исследованию на анаэробы отделяемое поверхностных ран и язв, мазки из зева, носа и ротовой полости, мазки из влагалища и цервикального канала, мокрота и бронхиальные смывы, фекалии (за исключением предполагаемой Clostridium difficile-ассоциированной диареи).

На транспортировочной таре должна быть этикетка с указанием фамилии больного и даты забора материала. В сопроводительном документе (направлении) обязательно указывают название медицинского учреждения, направившего материал, вид материала, цель исследования, фамилию больного, возраст больного, предполагаемый клинический диагноз.

В настоящее время маркировка бланка-направления и пробы с биологическим материалом унифицирована. Для маркировки используют 2 штрихкода с одинаковым номером (рисунок 41).

Рисунок 41 – Штрих-коды для маркировки направления и пробы. Заимствовано из Интернет-ресурсов.

Один штрих-код наклеивают на бланк-направление в специально предназначенное для этого место, а другой штрих-код наклеивают на пробу. К маркировке бланка-направления и пробы предъявляются определенные требования, которые необходимо строго соблюдать (рисунок 42).