Материал: Методы исследования в медицинской бактериологии

36

Рисунок 28 – Посев на плотную питательную среду в чашку Петри. Заимствовано из Интернет-ресурсов.

Пересев микробной культуры в питательную среду с помощью пипетки

проводится следующим образом:

-поместить в штатив пробирки с культурой и питательной средой;

-зажечь горелку;

-извлечь пипетку из пенала (обертки) правой рукой, взяв ее как карандаш;

-взять левой рукой пробирки, как карандаш, разъединив их средним пальцем и извлечь над пламенем горелки пробки;

-опустить пипетку в микробную культуру;

-после накопления пипетки требуемым объемом культуры, закрыть ее тупой конец указательным пальцем;

-извлечь пипетку с культурой из пробирки и перенести ее в пробирку с питательной средой;

-погрузить конец пипетки в среду, отпустить палец и вылить культуру;

-профламбировать края пробирок и закрыть их пробками;

-пипетку поместить в дезраствор, пробирки поставить в штатив.

Посев культуры микроба на поверхность плотной питательной среды шпателем Дригальского (рисунок 29):

-поместить в штатив стерильную мерную пипетку, развернув бумагу с тупого конца, стерильный шпатель Дригальского, перед спиртовкой - чашку Петри с питательной средой;

-взять левой рукой пробирку с культурой, правой рукой - стерильную пипетку с резиновой грушей;

-извлечь пробку из пробирки, прижав ее мизинцем к ладони, профламбировать край пробирки и пробку;

-профламбировать пипетку, опустить ее в пробирку, набрать культуру, извлечь пипетку;

-профламбировать край пробирки и пробку, закрыть пробирку пробкой, поставить ее в штатив;

-приоткрыть крышку чашки Петри, вылить на среду определенный объем культуры, закрыть чашку крышкой;

-пипетку погрузить в дезраствор;

-извлечь из бумаги стерильный шпатель Дригальского, приоткрыть крышку

итщательно растереть каплю по всей поверхности среды, закрыть чашку;

-профламбировать шпатель или поместить его в дезинфицирующий раствор.

37

Рисунок 29 – Схема посева культуры микроба на поверхность плотной питательной среды шпателем Дригальского. Заимствовано из Интернет-ресурсов.

Посевы в пробирках помещают в штативы, чашки Петри с посевами размещают на поддонах или в лотках. Посевы инкубируют в термостате в большинстве случаев при температуре 36ОС в течение 18-24 часов.

38

3. Правила отбора, хранения и транспортировки материала для микробиологического исследования

Отбор, хранение и транспортировка материала составляют так называемый преаналитический этап лабораторных исследований. Правила отбора, хранения и транспортировки материала для микробиологических исследований регламентированы:

-Национальным стандартом Российской Федерации ГОСТ Р 53079.4-2008 “Технологии лабораторные клинические. Обеспечение качества клинических лабораторных исследований. Часть 4. Правила ведения преаналитического этапа”;

-МУ 4.2.2039-05 “Техника сбора и транспортировки биоматериалов в микробиологические лаборатории”.

В микробиологических исследованиях используют разные виды материалов: клинический материал из организма больного или носителя, пробы из объектов внешней среды, пробы пищевых продуктов, лекарственных и косметических препаратов и др. Материал для культурального исследования из организма больного отбирается из мест локализации патологического процесса. В качестве клинического материала из организма больного могут быть использованы гной, кровь, мокрота, испражнения, моча, промывные воды, ликвор, рвотные массы, смывы с кожи и слизистых оболочек и другие жидкости и ткани организма. Пробами из объектов внешней среды могут служить вода, воздух, почва, продукты питания, смывы с предметов и др.

Материал для исследования отбирают с соблюдением правил асептики. При лабораторной диагностике инфекционных заболеваний необходимо отбирать материал до начала антимикробной терапии. Для взятия проб следует использовать стерильные инструменты, а для их транспортировки - стерильные пробирки или контейнеры. Использование нестерильных сухих, чистых пробирок допускается только для отбора и транспортировки крови на серологические исследования. Количество материала должно быть достаточным для проведения исследования.

Для взятия и транспортировки биологического материала следует использовать одноразовые стерильные тубсеры (пробирки с тампонами) промышленного производства или транспортные системы со средой. Нативный материал доставляют в лабораторию в максимально короткие сроки (для большинства образцов не позднее 1,5-2 часов после их получения). Допускается хранение материала в холодильнике при 4ОС. При использовании транспортных сред биологический материал можно хранить в течение 24 часов. Жидкий биологический материал можно транспортировать непосредственно в шприце, на кончик которого надет стерильный колпачок.

Для исследования на анаэробы биологический материал помещают в анаэробные условия. Для жидких образцов (кровь, гной, экссудат, жидкости из стерильных полостей) используют специальные флаконы с жидкой питательной средой, заполненные газовой смесью определенного состава, куда из шприца уколом иглы через резиновую крышку вносят материал.

Транспортировка осуществляется в металлических биксах (пеналах), термоконтейнерах, которые должны легко подвергаться обработке.