26
2.3. Подготовка принадлежностей к микробиологическому исследованию
Первым этапом всей микробиологической работы является подготовка используемых в работе принадлежностей, посуды, материалов к стерилизации и стерилизация этих предметов. При микробиологических исследованиях широко используют такие принадлежности как бактериологическая игла, бактериологическая петля, пипетки разного объема, чашки Петри, пробирки, колбы, флаконы.
Бактериологическая игла предназначена для извлечения и инокуляции микробной культуры. Она состоят из стальной иглы (проволоки) и держателя. Ее стерилизуют фламбированием (прокаливанием в пламени горелки).
Бактериологическая петля предназначена для извлечения и пересева микробных культур. Она состоит из ручки, покрытой термоизоляционным материалом (длинна 60-80 мм), держателя петли - хромированного прута (диаметром 3-5, длиной 100-150 мм) и непосредственно самой петли - термостойкой платиновой или нихромовой проволоки (диаметром 1-2 мм, длина 60-80 мм) с круглой петлей на конце (диаметром 3-4 мм). Правильно изготовленная петля должна быть замкнута в кольцо, иначе в ней не будет удерживаться капля микробной культуры. Петлю и ее держатель стерилизуют фламбированием.
Строение бактериологической иглы и бактериологической петли представлено на рисунке 12.
А Б В Г
Рисунок 12 – Бактериологическая игла (А) и бактериологическая петля, подготовленная неправильно (Б, В) и правильно (Г). Заимствовано из Интернет-
ресурсов.
В настоящее время в практической работе часто используют пластиковые стерильные иглы и петли одноразового использования (рисунок 13).
27
Рисунок 13 - Пластиковые стерильные иглы и петли одноразового использования. Заимствовано из Интернет-ресурсов.
Жидкости объемом от нескольких капель до десятков миллилитров (см3) извлекают с помощью пипеток. В бактериологической лаборатории применяются пипетки Пастера, мерные пипетки и пипетки Мора. Пипетку Пастера используют для асептического извлечения жидкостей объемом в несколько капель; мерную пипетку – для извлечения жидкостей объемом от долей до нескольких миллилитров; пипетку Мора - от 1 до 50 мл (рисунок 14).
Рисунок 14 – Стеклянные мерные пипетки. Заимствовано из Интернет-ресурсов.
Пипетка Пастера – это стеклянная трубка диаметром 5-6 мм, с толщиной стенки 1-2 мм. Ее длина составляет 80-220 мм, длина толстой части 50-80 мм, длина оттянутой тонкой части с запаянным концом - 100-120 мм (рисунок 15).
28
Рисунок 15 – Пастеровские пипетки. Заимствовано из Интернет-ресурсов.
Перед стерилизацией в тупой конец пипетки помещают комочек ваты, пипетку заворачивают в бумагу или вкладывают в пенал. Подготовленные пипетки стерилизуют в сухожаровом шкафу при температуре 160-165ОС в течение 60-120 минут.
Ватно-марлевые пробки готовят следующим образом: скатывают валик из ваты по диаметру, соответствующему горловине сосуда (пробирки, колбы, флакона); покрывают валик марлей; перевязывают приготовленный ватно-марлевый валик ниткой у края; обрезают избыток марли и ниток; проверяют соответствие пробки сосуду (при ее извлечении из сосуда должен быть слышен хлопок).
В настоящее время в практической работе используют пробки, изготовленные из прессованной целлюлозы, или силиконовые пробки (рисунок 16).
Рисунок 16 – Пробки из прессованной целлюлозы. Заимствовано из Интернетресурсов.
Подготовка пробирок для стерилизации (рисунок 17):
-пробирки моют и высушивают;
-в сухую пробирку помещают ватно-марлевую пробку;
-горловину и пробку одиночных пробирок заворачивают перед стерилизацией бумагой в виде колпака; несколько пробирок (5, 10, 20, 100 штук) можно одновременно завернуть полностью в бумагу или поместить в бикс;
29
- стерилизация приготовленного пакета.
Рисунок 17 – Подготовка пробирок к стерилизации.
Подготовка колб для стерилизации осуществляют аналогичным образом: после мойки и высушивания горловину колбы с пробкой обертывают бумагой и колбы стерилизуют.
Подготовка пипеток для стерилизации:
-пипетки моют и высушивают;
-с тупого конца внутрь пипетки вставляют вату для фильтрации воздуха и задержки жидкости в случае чрезмерного ее всасывания;
-волоски ваты обжигают на пламени спиртовки, чтобы они не мешали надевать резиновую трубку с баллончиком на пипетку при работе;
-подготовленные пипетки помещают в пенал или обертывают бумагой. При завертывании одной пипетки (рисунок 18) полоску бумаги размером 6х30 см помещают на стол и закатывают пипетку. Свободный конец полоски бумаги закручивают.
Рисунок 18 – Подготовка пипеток для стерилизации.
Заготовку подписывают, указав объем пипетки. Одновременно можно завернуть несколько пипеток (3-5 штук) аналогичным образом.
Подготовка чашек Петри для стерилизации:
-чашки моют и высушивают;
-чашку накрывают крышкой;
-чашки помещают в контейнер (бикс) или заворачивают бумагой (рисунок 19). Для этого одну или несколько чашек помещают на квадратный лист бумаги, последовательно заворачивают углы и закрепляют последний угол за боковыми углами.
30
Рисунок 19 – Подготовка чашек Петри к стерилизации.
Чашки Петри можно не заворачивать в бумагу, а стерилизовать в металлических биксах, расположив их слоями.
Современные чашки Петри – пластиковые. Они выпускаются стерильными, запакованными в полиэтиленовую пленку (рисунок 20).
Рисунок 20 – Стерильные пластиковые чашки Петри. Заимствовано из Интернетресурсов.
Стеклянный шпатель Дригальского моют, высушивают, обертывают бумагой каждый шпатель по-отдельности или несколько штук вместе и стерилизуют (рисунок 21).
Рисунок 21 – Подготовка шпателя для стерилизации.
В настоящее время наряду со стеклянными шпателями Дригальского используют металлические и пластиковые шпатели разных форм, выпускаемые в стерильных упаковках (рисунок 22).