Материал: Методы исследования в медицинской бактериологии
21
зараженных животных, комнаты для обеззараживания инвентаря (клетки, садки и др.), комнаты для надевания и снятия защитной одежды;
-комнаты для проведения серологических исследований;
-комната для люминесцентной микроскопии;
-помещения для ПЦР-диагностики;
-автоклавная для обеззараживания инфицированных объектов и материалов;
-термостатная (термальная) комната;
-комната для ведения записей в рабочих журналах;
-туалет.
Влабораториях, проводящих исследования с микроорганизмами 3-4 групп патогенности, в “заразной” зоне располагаются:
- помещения для приема и регистрации поступающего на исследование материала;
- лабораторные помещения, оснащенные боксами биологической безопасности;
- комнаты для проведения бактериологических исследований; - комнаты для проведения серологических исследований; - комнаты для люминесцентной микроскопии; - комнаты для гельминтологических исследований; - термостатная комната; - автоклавная для обеззараживания материала.
Влабораториях, проводящих исследования с микроорганизмами 4 группы патогенности, в “заразной” зоне располагаются:
- комната для посевов и проведения исследований с микроорганизмами; - комната для обеззараживания и стерилизации используемых материалов.
На границе “чистой” и “заразной” зон находится санпропускник, включающий в себя комнату для снятия личной одежды, душевую и комнату для надевания рабочей одежды.
В“заразной” зоне персонал работает в рабочей одежде. В помещениях, где проводится непосредственная работа с патогенными биологическими агентами, надевается дополнительная защитная одежда. Тип защитной одежды зависит от характера выполняемой работы и патогенности возбудителя. Надевают защитную одежду в предбокснике или при входе в комнату для микробиологических манипуляций, а снимают - в предбокснике или на выходе из этой комнаты.
К внутренней отделке и оборудованию помещений “заразной” зоны предъявляются специфические требования. Так, поверхность пола, стен и потолка должна быть гладкой, без щелей, устойчивой к действию моющих и дезинфицирующих средств, полы не должны быть скользкими. Трубопроводы и батареи отопления должны располагаться на некотором расстоянии от стен для проведения их дезинфекции. Места ввода инженерных коммуникаций в эти помещения герметизируются. Системы водоснабжения защищаются техническими средствами от подсоса и обратного тока воды. Категорически запрещается слив необеззараженных отходов в канализационную систему. Окна в помещениях “заразной” зоны не открываются, а двери должны плотно закрываться.
Боксированные помещения для работы с инфицированными материалами и животными оборудуются автономной системой приточно-вытяжной вентиляции. От
22
других вентиляционных систем здания эти системы изолируются и оборудуются специальными фильтрами тонкой очистки выводящего воздуха.
Лабораторное оборудование и мебель (столы, стеллажи для содержания животных, стулья и т. д.) должны быть гладкими, без острых краев и шероховатостей и иметь покрытие, устойчивое к действию моющих и дезинфицирующих средств. Поверхность столов не должна иметь швов и трещин. Покрытие мебели изготавливают из химически устойчивого пластика или другого материала, который легко очищается и дезинфицируется. Деревянную мебель красят масляной или эмалевой краской светлых тонов.
Лабораторные помещения оборудуют системой пожарной сигнализации и обеспечивают средствами пожаротушения.
2.2. Техника безопасности при работе в микробиологической лаборатории
Основными опасными факторами в микробиологической лаборатории являются:
1.Микробы, их токсины и материалы, подозрительные на инфицирование.
2.Огнеопасные и взрывоопасные химические вещества.
3.Кислоты, щелочи и другие токсичные соединения.
4.Электрические приборы.
В процессе работы в микробиологической лаборатории должны соблюдаться правила, предотвращающие воздействие этих факторов на людей и окружающую среду, предупреждающие попадание бактерий и плесневых грибов в исследуемый материал, а также исключающие возможность внутрилабораторных заражений персонала и распространения инфекции за пределы лаборатории. К таким правилам работы в микробиологической лаборатории относятся:
1. Проведение исследований в защитной одежде (халат, шапочка или косынка). Защитная одежда одевается перед входом в лабораторию и снимается после выхода из нее. Выход за пределы лаборатории в защитной одежде запрещен. Запрещается также без необходимости ходить в защитной одежде из одной лаборатории в другую или надевать верхнюю одежду на халат.
2.Дополнительное использование при работе с микробными культурами резиновых перчаток и ватно-марлевой повязки (маски). При работе в боксе применяют стерильные халат, маску и шапочку, при этом обязательно меняют обувь. При необходимости (в случае работы с опасными и особо опасными микроорганизмами, при работе в виварии) дополнительно надевают вторую пару резиновых перчаток, передник, нарукавники, защитные очки, а на ноги – резиновые сапоги.
3.Строгое соблюдение правил личной гигиены: содержание в чистоте рук, применение косынки для защиты волос.
4.В лаборатории строго запрещено пить, принимать пищу, курить, хранить продукты питания, вносить посторонние личные вещи.
5.Не допускаются хождение и разговоры во время работы.
23
6.Строгое соблюдение правил асептики в процессе работы с микробными культурами, в том числе соблюдение определенного порядка посевов, пересевов и приготовления микробных препаратов.
7.Весь материал, поступающий в лабораторию на анализ, должен рассматриваться как инфицированный.
8.При распаковке поступившего материала необходимо соблюдать осторожность. Емкости снаружи протирают дезинфицирующим раствором и помещают на подносы или в кюветы с ковриком, смоченным дезсредством.
9.Переливание жидкостей, содержащих микроорганизмы, производят над емкостью, наполненной дезинфицирующим раствором.
10.Все операции с микробными культурами выполняются очень осторожно, не допуская возможности образования микробных аэрозолей.
11.Категорически запрещается насасывание суспензий микробов и реактивов ртом в пипетки. При работе с пипетками и жидкими инфицированными материалами применяют резиновые баллончики (груши) небольшого объема или автоматические (полуавтоматические) пипетки.
12.Все отработанные материалы подлежат дезинфекции или обеззараживанию. Зараженный материал подлежит обязательному уничтожению (автоклавированию, сжиганию), по возможности в тот же день. Инструменты, а также поверхность рабочего стола после работы сразу же дезинфицируют. Пипетки, предметные и покровные стекла и другую посуду, бывшую в употреблении, обеззараживают, погружая в 5% раствор перекиси водорода, лизола, фенола или серной кислоты, которые всегда должны быть на рабочих столах. Запрещается оставлять на рабочих столах бактериологические чашки, пробирки и другую посуду
сзаразным материалом по окончании работы.
13.По окончании работы культуры микроорганизмов, необходимые для дальнейших исследований, убирают в холодильник. Руки тщательно дезинфицируют 70% спиртом или другими растворами. Лабораторию закрывают.
14.В случае аварии, приведшей к обсеменению микробами рук, стола или других предметов, немедленно докладывается руководителю работ, и под его контролем проводится дезинфекция. Пролитую суспензию микробов собирают тампоном (ветошью), смоченным дезраствором. При подозрении на заражение необходимо обратиться к врачу.
15.Соблюдать противопожарную безопасность при работе со спиртовками. Во избежание взрыва не зажигать одну спиртовку от другой.
16.Соблюдать правила техники безопасности при работе с электроприборами.
17.В специальном журнале регистрации ежедневно производятся записи по использованию инфицирующего материала и его уничтожении.
18.Запрещается выносить из лаборатории оборудование, инвентарь, материалы и другие предметы без предварительной их дезинфекции и обеззараживания.
Для полного устранения или минимизации воздействия опасных
биологических материалов используют принадлежности и оборудование, которое является первичными барьерами. К первичным барьерам относятся средства индивидуальной защиты персонала, боксы биологической безопасности,
24
герметичные устройства для центрифуг и транспортировки инфицированного материала.
К средствам индивидуальной защиты персонала относятся лабораторная одежда (куртки, халаты, комбинезоны), пластиковые передники, защитные очки, лицевые щитки, респираторы, перчатки (рисунок 9).
Рисунок 9 – Средства индивидуальной защиты персонала. Заимствовано из Интернет-ресурсов.
Для работы с микроорганизмами I-II групп патогенности используют костюмы изолирующего типа с принудительной подачей воздуха (рисунок 10).
Рисунок 10 – Костюм изолирующего типа с принудительной подпчей воздуха для работы с особо опасными возбудителями инфекций I-II групп патогенности.
Заимствовано из Интернет-ресурсов.
25
Боксы биологической безопасности используются для ограничения распространения биологических аэрозолей, образующихся при проведении микробиологических исследований. В микробиологических лабораториях используются боксы первого, второго и третьего класса биологической безопасности (рисунок 11).
а б Рисунок 11 – Боксы биологической безопасности 3 (а) и 2 (б) класса. Заимствовано
из Интернет-ресурсов.
Боксы 1 и 2 классов являются эффективной системой ограничения распространения возбудителей, относящихся к III-IV группам патогенности (российская классификация). Боксы 3 класса обеспечивают максимально возможную защиту персонала и окружающей среды от воздействия биологических агентов I-II групп патогенности (российская классификация). Основные различия классов боксов заключаются в направленности воздушных потоков внутри боксов, в выходе выводящего воздуха внутрь лаборатории или во внешнюю среду через систему вентиляции и количеством ступеней фильтрации воздуха.
К вторичным барьерам относится оборудование для проведения деконтаминации инструментов и принадлежностей (автоклавы), система вентиляции для обеспечения направленного потока воздуха, шлюзовые двери на входе в лабораторию, соответствующая мебель.
В бактериологической лаборатории ведется следующая документация:
1.Инвентарная книга музейных штаммов микроорганизмов.
2.Журнал учета движения материала в лаборатории.
3.Журнал учета стерилизации и уничтожения инфицированного материала.
4.Журнал учета зараженных подопытных животных.
5.Журнал исследований (экспертиз).