Материал: Методы исследования в медицинской бактериологии

101

ультрафиолетовом облучении. Хромогенные питательные среды используют уже при первичном посеве исследуемого материала для выделения чистой культуры. Поэтому идентификация культуры возможна уже в течение первых суток исследования. Использование хромогенных питательных сред ускоряет процесс идентификации бактерий до 24 часов при первичном посеве до рода и вида.

Основными производителями хромогенных питательных сред являются

компании HiMedia, CHROMagar,ИспользованиеMerck, Oxoid. Разработ ые хромогенные питательные среды предназначены для быстрого бнаружения сследуемом

материале кишечной палочки, сальмонелл, энтерококков, стафилококковхро,

клостридий, синегнойной палочки, устойчивого к метициллину стафилококка и

других бактерий. На рисунке 93 представлс селективнымивариант использования хромогенной питательной среды для выявления кишечной па очки, лебсиеллы и протея.

Рисунок 93 – Использование хромогенных сред для первичной идентификации

бактерий. Заимствовано из Интернет-ресурсов. Идентификация

Лидером производителеймикробоввысококачественныхдо рода, хромогенных сред для микробиологических исследований является компания HiMedia (Индия). Эта компания поставляет навидарынок хромогенные среды для выделения в течение 24 часов целого ряда микроорганизмов: Escherichia coli и других колиформных

Компания Merck выпускает хромогенные питательные среды для выявления сальмонелл, листерий, кишечной палочки и колиформных бактерий.

Агаризованную питательную среду асептически разливают в чашки Петри в расплавленном состоянии при температуре 45-50°С. Среду, разлитую в чашки Петри, больше не стерилизуют.

5.2.2. Системы создания специальных атмосферных условий культивирования

Для культивирования некоторых бактерий (облигатных анаэробов, микроаэрофилов, капнофилов) необходимо создать специальные атмосферные условия. Посевы анаэробов культивируют в атмосфере с содержанием кислорода не более 0,1%. Инкубирование посевов анаэробных бактерий проводят в термостатах в герметически закрытых емкостях – эксикаторах, микроанаэростатах, анаэробных пакетах или в специальных анаэробных камерах, снабженных термостатом.

Просто устроенные системы для культивирования анаэробных бактерий представлены на рисунке 94.

103

а б в Рисунок 94 – Системы для выращивания анаэробных бактерий: а – эксикатор, б –

анаэростат, в – использование стеклянной емкости и зажженной свечи. Заимствовано из Интернет-ресурсов.

Для поглощения кислорода в замкнутой воздушной среде таких систем используют раствор пирогаллола, гидросульфит натрия, для получения углекислого газа применяют смесь лимонной или серной кислоты с бикарбонатом натрия. Например, при использовании эксикатора на дно помещают открытую чашку Петри с химическими веществами, связывающими кислород (например, пирогаллол с едким натром). Сверху на специальный выступ эксикатора ставят фарфоровую решетку, а на нее – пробирки или чашки с посевами. Крышку эксикатора плотно закрывают. Для герметичности края эксикатора смазывают вазелином. После этого эксикатор помещают в термостат.

В настоящее время для создания анаэробных или микроаэрофильных условий в основном применяют герметичные контейнеры и специальные газогенерирующие пакеты. Производителями подобных герметичных контейнеров и газогенерирующих пакетов являются специализированные компании.

Контейнеры представляют собой пластиковые герметически закрывающиеся емкости, в которых сохраняется создаваемая с помощью генерирующих пакетов газовая атмосфера (рисунок 95).

Рисунок 95 – Герметичные контейнеры для создания специальной атмосферы. Заимствовано из Интернет-ресурсов.

104

Газогенерирующие пакеты содержат химические соединения, способные создавать определенную атмосферу (таблица 15). В газогенерирующих системах водород генерируется таблетками боргидрида натрия, углекислый газ вырабатывается при взаимодействии лимонной кислоты с бикарбонатом натрия и т.д.

Таблица 15 – Примеры газогенерирующих пакетов фирмы GasPak для создания специальных атмосферных условий для культивирования бактерий

Внешний вид газогенерирующих пакетов представлен на рисунке 96.

Рисунок 96 – Газогенерирующие пакеты. Заимствовано из Интернет-ресурсов.

Анаэробная камера (рисунок 97) представляет собой герметичный бокс, оснащенный термостатом, системой подачи “анаэробного газа”. “Анаэробный газ” может быть трехкомпонентным (смесь азота, углекислого газа и водорода) или двухкомпонентным (смесь азота и водорода). Все манипуляции в такой камере выполняются в бескислородных условиях. Вместимость анаэробной камеры – до 200 чашек Петри. В основном такими камерами оснащаются референс-лаборатории.

105

Рисунок 97 – Анаэробная камера. Заимствовано из Интернет-ресурсов.

Микроанаэростат (рисунок 98) представляет собой герметично закрывающуюся емкость объемом 3-7 л и вместимостью 10-12 чашек Петри. Бескислородные условия в микроанаэростате создаются путем создания в нем вакуума и последующего заполнения “анаэробным газом” или путем химического связывания кислорода газогенерирующими системами. Создание бескислородных условий в микроанаэростатах контролируется с помощью индикаторной тестполоски, импрегнированной метиленовой синью, которая обесцвечивается в случае образования бескислородной атмосферы.

Рисунок 98 – Микроанаэростаты. Заимствовано из Интернет-ресурсов.

В лабораторной практике часто используются СО2-термостаты, позволяющие создавать атмосферу углекислого газа (рисунок 99).