Дипломная (вкр): Изучение сезонного биоритма бациллярно-кокковой трансформации бактерии Helicobacter pylori

Рисунок 12 - Полуколичественное распределение пациентов по степени обсемененности СОЖ кокковыми формами НР за 2002-2009 годы.

.3.3 Сезонный биоритм активности бациллярно-кокковой трансформации Н.pylori в слизистой оболочке желудка

Для выявления сезонного биоритма бациллярно-кокковой трансформации НР в СОЖ мы использовали частоту встречаемости пациентов с хроническим гастритом, оцененных по полуколичественной шкале как кокки +++, ежемесячно на протяжении 8 лет.

В исследование вошли только те пациенты (N=2145), которые имели эндоскопический диагноз хронический гастрит с поддтвержденным хеликобактерилеозом, и которых оказалось подавляющее большинство из всех обследованных НР-инфицированных пациентов.

Таблица 4 Данные иммуноцитохимических исследований, соответствующих степени обсемененности СОЖ кокковыми формами к +++, %

Графическое изображение, иллюстрирующее приведенные выше табличные данные, представлено на рисунке 13.

Рисунок 19 - Помесячное распределение данных иммуноцитохимических исследований, соответствующих степени обсемененности СОЖ кокковыми формами к +++ (%) в 2002-2009 годах

Из данного рисунка видно, что характер распределения данных имеет очевидный периодический колебательный характер, с резкими подъемами осенью и падениями в середине лета (июль).

Для установления достоверности сезонного биоритма, данные за 2002 год были исключены, так как в то время полуколичественная система определения H.pylori в ИЦХ окрашенном мазке еще отрабатывалась и стабилизировалась, и именно это могло дать столь отличные от всех остальных лет данные. 2009 год был так же исключен в связи со сменой исследователя, проводившего прямые бактериоскопические ИЦХ исследования, для исключения субъективного фактора на оценку полуколичественной шкалы степени обсемененности СОЖ бактериальными клетками.

Очевидная минимальная активность бациллярно-кокковой трансформации ежегодно наблюдалась в июле. На этот факт указывают графики с периодом в год, представленные на рисунке 14.

Рисунок 20 - Динамика интенсивной обсемененности СОЖ кокковыми формами H.pylori (кокки = 3, %)

Видно, что в практически во все годы наблюдается снижение активности бациллярно-кокковой трансформации в июле месяце. Отметим, что минимальная, практически нулевая, бациллярно-кокковая активность наблюдалась в течение 5 лет (за исключением 2003 года, который характеризовался вообще максимальной амплитудой колебания этого показателя).

Проведенный статистический анализ по критерию Фишера выявил высокодостоверные (достоверность 95%) различия по показателю "частота встречаемости значительного количества кокковых форм в СОЖ (к +++)", у пациентов, обследованных в июле с пациентами, обследованными в октябре и ноябре (значения эмпирического критерия Фишера >1,64 минимум за 4 года из 6).

Таблица 5 Сравнение данных пациентов, обследованных в июле с данными пациентов, обследованных в остальные месяцы, по статистическому критерию Фишера. Красным выделены данные за месяцы, удовлетворяющие условию "достоверность различия по статистическому критерию Фишера 95% минимум в 4 из 5 лет"

Таким образом, представленные в разделе 3.3.3 данные указывают на сезонный колебательный характер бациллярно-кокковой трансформации, минимальная активность которой приходится на середину лета (июль).

4 Выводы по работе

. В когорте пациентов с хроническим гастритом (без выраженных клинических проявлений) выявлен субмодальный класс пациентов с активной бациллярно-кокковой трансформацией, соответствующей значительной степени обсемененности кокковыми формами НР (к +++).

. Методами жидкостной цитологии и ИЦХ окрашивания определено присутствие переходных У форм и кокковых форм НР при абсолютном преобладании спиралевидных вегетативных форм в СОЖ антрального отдела. Частоты встречаемости кокковых форм НР в цитоцентрифугатах после ЖЦ совпадают с частотами встречаемости кокковых форм в прямых цитологических препаратах - мазках-отпечатках СОЖ.

. Выявлен сезонный колебательный характер бациллярно-кокковой трансформации НР, главной отличительной особенностью которого является снижение степени обсемененности кокковыми формами НР в середине лета.

Практические рекомендации: с учетом выраженной сезонной активности бациллярно-кокковой трансформации НР и повышенной резистентности кокковых форм НР к антихеликобактерной антибиотикотерапии, курсы эрадикационной терапии рекомендовано проводить в летний период. Данная рекомендация может быть дана для пациентов с рецидивирующими НР-ассоциированными кислотозависимыми заболеваниями, находящихся на плановом лечении.

Список литературы

1.       Chumpitaz, C.J. Isolation of helicobacter pylori in dental plaque in patients with gastritis at "Angamos" clinic / C.J. Chumpitaz, M.J. Gutierraz, A.R. Cordova, M.M. Sanchez, V.N. Vasquez, M.C. Rivadeira, B. Del Carpio, M.L. Solano, C.L. Marocho, C.F. Pareja, R.A. Huaman, B.E. Valencia // Review gastroenterology Peru. - 2006. - Vol. 26. - N 4. - P.373-376.

.        Dubois, A. Intracellular Helicobacter pylori and Gastric Carcinogenesis: An "Old" Frontier Worth Revisiting // Gastroenterology. - 2011. - Т. 132. - № 3. - С. 1177-1180.

3.       Бардахчьян, Э.А. Роль Helicobacter pylori при развитии экстрагастродуоденальных заболеваний / Э.А. Бардахчьян С.Ю. Ломов, Н.Г. Харланова, Н.В. Камнева // Экспериментальная и клиническая гастроэнтерология, 2005, №3, с. 20-27.

4.       Barry, J. Marshall Autobiography // Nobel Foundation - 2005

.        Stark, R. M. Biofilm formation by Helicobacter pylori. // Letters in applied microbiology. - 1999. - Т. 28. - № 2. - С. 121-126.

6.       Аруин, Л.И. Helicobacter (campylobacter) pylori в этиологии и патогенезе гастрита и язвенной болезни // Арх. патологии. - 1990. - N 10. - С.3-8.

.        Жебрун, А.Б. Антигенность и связывание сывороточных белков клетками и экстрактами клеток Х. пилори // Акт.пробл.инф.патол., Ч. 1. Спб. - 1993. - с. 25.

8.       Sidebothman, R.L. Hypothesis: Helicobacter pylori, urease, mucus, and gastric ulcer // Lancet. - 2010. - Vol.27, - P.193-195.

.        Olson, J. W. Molecular hydrogen as an energy source for Helicobacter pylori. // Science. - 2011. - Т. 298. - № 5599. - С. 1788-1790

.        Putsep, K.Antibacterial peptide from H. pylori.// Nature - 1999, 398:671-672.

.        Satin, B. The neutrophil-activating protein (HP-NAP) of Helicobacter pylori is a protective antigenand a major virulence factor.// J. Exp. Med.- 2000, 191:1467-1476.

.        Bylund, J. Proinflammatory activity of a cecropin-like antibacterial peptide from Helicobacter pylori.//Antimicrob. Agents Chemother - 2001, 45:1700-1704.

.        Blaser, M.J. Parasitism of "slow" bacterium Helicobacter pylori leads to altered gastric gomeostasis and neoplasia. //J. Clin.Invest. -1994. -Vol. 94 - P.4-8.

.        Rauws, E.A.J. Cure of duodenal ulcer associated with eradication of Helicobacter pylori // Lancet. - 1990. -Vol. 335, №8700 - P.1233-1235.

15.     Довгаль, С.Г. Методы лабораторной диагностики хеликобактериоза // Акт.пробл.инф.патол., Ч. 1. Спб. - 1993. - с. 21.

16.     Covacc, A. The cag pathogenicity island of Helicobacter pylori: origin, molecular biology and relevance to virulence In.// Pathogenesis and Host Response in Helicobacter pylori Infections Ed. By A. P. Moran C. A. O'Morain.-Galway.: National University of Irland.-1997.-P. 88-100

.        Ikenoue, T. Determination of Helicobacter pylori Virulence by Simpl Gene Analisis of the cag Pathogenicity Island // Clin. Diag. Lab. Immunol. -2001. - Vol. 8.№ 1. - Р. 181 - 186.

.        Suerbaum, S. Helicobacter pylori Infection // New Engl. J. Med. - 2002. - Vol. 347, № 15. - P. 1175 - 1186.

.        Covacci, A. // Pathogenesis and Host Response in Helicobacter pylori Infections /A.P.Moran, C.A.O’Morain. ~ Galway, 2007. - P. 88 -100.

.        Mecsas, J. // Island Emerg. Infect. Dis. - 1996.-V. 2.-P. 271.

21.     Макаренко, Е.В. Клиническое значение факторов патогенности Helicobacter pylori // Рос. журн. гастроэнтерол., гепатол., колопроктол. - 2005. - Т. 15. № 3. - С. 22-27

22.     Peek, R.M.J. Adherence to gastric epithelial cell induces expression of a Helicobacter pylori gene, iceA, that is associated with clinical outcom // Proc. Amer. Ass. Cancer Res. - 1998. - Vol. 110. - P. 531 - 544.

.        Louw, J.A. The Relationship Between Helicobacter pylori Infection, the Virulence Genotypes of the Infecting Strain and Gastric Cancer in the African Setting // Helicobacter. - 2001. - Vol. 6, № 4. - P. 268 - 273

.        Sidebothman, R.L. Hypothesis: Helicobacter pylori, urease, mucus, and gastric ulcer // Lancet. - 1990. - Vol.27, - P.193-195. (Atherton J.C. et al., 1995).

.        Atherton, J.C. Mosaicism in vacuolisating cytotoxin alleles of Helicobacter pylori . Association of specific vacA types with cytotoxin production and peptic ulceration // J.Biol. Chem. - 1995. - Vol. 270. - P. 17771 - 17777.

26.     Исаков, В.А. Хеликобактериоз - Медпрактика-М - 2003. - 411с.

27.     Guruge, J.L. Epithelial attachment alters the outcome of Helicobacter pylori infection // Proc.Nalt.Acad.Sci.USA. - 2010 - Vol. 95, №7 - P.

.        Negrini, R. Autoantibidies to gastric mucosa in Helicobacter pylori infection // Helicobacter. - 1997 . - Vol. 2, suppl 1. - P. 13 - 16

29.     Покровский, В.И.//Журн. микро-биол. - 1995. -№3.-С. 32-36.

.        Домарадский, И.В. Helicobacter pylori и его роль в патологии. // Журнал микробиол.. - 2000. - № 4, Приложение. - С. 113 - 117.

.        Лаптев,а Е.С. Хеликобактерная инфицированность и структура гастродуоденальной слизистой оболочки у больных дуоденальными язвами с различными вариантами клинического течения. - Автореф. дисс. канд. мед. наук. - СПб, 1999. - 25 с.

32.     Uemura, N. Helicobacter pylori infection and the development of gastric cancer.//N. Engl.J. Med. - 2001 - Vol. 345 - P.784-789.

.        Catrenich, C.E. Characterization of the morphologic conversion of Helicobacter pylori from bacillary to coccoid forms.//Scand J Gastroenterol -1991 - Vol. 181,suppl 1 - Р.58-64

.        Benaissa, M. Changes in Helicobacter pylori ultrastructure and antigens during conversion from the bacillary to the coccoid form.//Infect. Immun. - 1996 - Vol.64, № 6 -Р. 2331-5

.        Specht, M. Localization of FtsZ in Helicobacter pylori and consequences for cell division.//J Bacteriol - 2013 - 195(7):1411-20

.        Bumann D. , Habibi H., Kan B., Lack of Stage-Specific Proteins in Coccoid Helicobacter pylori Cells// Infection and Immunity. - 2004 - Vol. 72, №. 11 - Р. 6738-6742

.        Saito N, Konishi K, Kato M, Coccoid formation as a mechanism of species-preservation in Helicobacter pylori: an ultrastructural study//Hokkaido Igaku Zasshi - 2008, Sep83(5):291-5.

.        Roe IH, Son SH, Oh HT, Choi J, Shin JH, Lee JH, Hah YC.Changes in the evolution of the antigenic profiles and morphology during coccoid conversion of Helicobacter pylori.// Korean J Intern Med - 1999 - Vol. 14, №1 - Р.9-14

.        Saito N., Konishi K., Sato F., Kato M., Takeda H., Sugiyama T., Asaka M.Plural Transformation-Processes from Spiral to Coccoid Helicobacter pylori and its Viability // J. Infect. - 2003 - Vol. 46, №1 - P.49-55

.        Mizoguchi, H. Evidence for viability of coccoid forms of Helicobacter pylori.//J Gastroenterol - 1999 - Vol.34 Suppl 11 - P.32-6

.        Saito N, Konishi K., Sato F Coccoid Helicobacter pylori Can Directly Adhere and Invade in Agminated Formation to Human Gastric Epithelial Cells// Advances in Microbiology - Vol. 2 No. 2 - 2012, 112-116

.        Mizogushi, H. /Diversity in protein synthesis and viability of Helicobacter pylori coccoid forms in response to various stimuli. //Infect Immun. -1998. -v.66. -p.5555-60.

43.     Хомерики, С.Г. Роль кокковых форм Helicobacter pylori в патогенетических механизмах и персистенции хеликобактерной инфекции // Рос. журнал гастроэнтерол., гепатол., колопроктол., 2011. - T. XI. - № 2. - Прилож. № 13. - С. 99.

44.     She, F.F. Virulence of water-induced coccoid Helicobacter pylori and its experimental infection in mice. //World J. Gastroenterol. - 2003 - Vol. 9, № 3 - Р.516-20

.        Brenciaglia, M.I. Helicobacter pylori: cultivability and antibiotic susceptibility of coccoid forms. //Int. J. Antimicrob Agents - 2000 - Vol.13, № 4 - Р.237-41

46.     Эллиниди, В.Н. Практическая иммуногистохимия (Методические рекомендации) - СПб.: ВЦЭРМ МЧС России, 2010, - стр. 36

47.     Jakic-Razumovic, J. Histopathological features of gastritis before and after treatment for Helicobacter pylori.//Croat Med J - 2000 - Vol. 41, №2 - P. 159-62

48.     Никитина, Л.В. Иммуноцитохимические исследования и жидкостная цитология в диагностике поражений желудка // WWW.MEDLINE.RU, ТОМ 13, ОНКОЛОГИЯ - Москва - 2012

49.     Dowell, S.F. Seasonal Variation in Host Susceptibility and Cycles of Certain Infectious Diseases// Emerg Infect Dis. 2001 May-Jun;7(3):369-74.

.        Nelson, R. J. Seasonal patterns of stress, immune function & disease/ R. J. Nelson, G. E. Demas, S. L. Klein & L. J. Kriegsfeld; Cambridge University Press - 2002, 291

.        Sudha Xirasagar, J. Role of Meteorological Factors in Duodenal Ulcer Seasonality// Study Gen Intern Med - 2009 October; 22(10): 1439-1446.

.        Roberto Manfredini, Seasonal pattern of peptic ulcer hospitalizations: analysis of the hospital discharge data of the Emilia-Romagna region of Italy // BMC Gastroenterology - Italy, 2010, 10:37

.        Savarino, V Are duodenal ulcer seasonal fluctuations paralleled by seasonal changes in 24-hour gastric acidity and Helicobacter pilori infection?//J Clin Gastroenterol - 1996, 22(3):178-181.)

.        Raschka C, Schorr W, Koch HJ, Is there seasonal periodicity in the prevalence of Helicobacter pylori? // Chronobiol Int - 2009, 16(6):811-819.

55.     G Buzás, Á. Seasonal variation of Helicobacter Pylori eradication rates with standard triple therapies: A 11-year retrospective study (2000-2010) // G Buzás, Á Premecz, I Barta, J Józan, J Nagy, É Szilágyi // Z Gastroenterol - Budapest - 2011; 49 - A8

56.     Новиков, Д.А.Статистические методы в медико-биологическом эксперименте (типовые случаи) // Новиков Д.А., Новочадов В.В. // ВолГМУ - Волгоград, 2005 - с 60 - 63