Материал: vse_metody_MIKROB

в) фаготипирование – проба с поливалентным дизентерийным фагом. Посевы ставят в термостат на 24 часа при температуре 370С.

IV этап исследования.

Учет полученных результатов и выдача заключения о виде возбудителя.

16

Занятие №23

Тема. Микробиологическая характеристика холеры, псевдотуберкулеза, ки-

шечного иерсиниоза и пищевых отравлений микробной природы.

Цель занятия. Изучить характеристику и микробиологическую диагностику холеры, вибриозов, псевдотуберкулеза, кишечного иерсиниоза и пищевых от-

равлений микробной природы.

I.Теоретические знания:

1.Характеристика возбудителей холеры. Микробиологическая диагностика и специфическая профилактика холеры.

2.Микробиологическая характеристика вибриозов.

3.Характеристика возбудителей псевдотуберкулеза и кишечного иерсиниоза.

Микробиологическая диагностика.

4.Этиологическая структура пищевых отравлений. Микробиологическая ди-

агностика пищевых отравлений бактериальной природы.

II. Практические навыки:

1. Световая микроскопия препаратов из чистых культур V.cholerae, окрашен-

ных по Граму.

2.Изучение схемы бактериологического исследования фекалий больного с клиническим диагнозом «холера». Учет и интерпретация результатов.

3.Изучение схемы бактериологического исследования фекалий больного с

предполагаемым диагнозом пищевая токсикоинфекция. Учет и интерпрета-

ция результатов.

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ К ЗАНЯТИЮ

1. Характеристика возбудителей холеры. Микробиологическая диагности-

ка и специфическая профилактика холеры.

Возбудителями холеры являются: Vibrio cholerae, Vibrio El-Tor (основной)

и Vibrio О-139 «Бенгал», относящиеся к семейству Vibrionaceae, роду Vibrio,

виду V.choleraе.

Морфология: грамотрицательные, слегка изогнутые в виде запятой палоч-

ки средних размеров, монотрихи, спор и капсул не образуют.

Культуральные свойства: облигатные аэробы, хорошо растут на щелоч-

ных средах (pH 8,5-9,0). В 1% пептонной воде через 6-8 часов образуют неж-

ную пленку. На щелочном агаре образуют гладкие прозрачные с голубоватым оттенком колонии.

Биохимические свойства: по классификации Хейберга, на основании способности ферментировать сахарозу, маннозу и арабинозу, представители рода Vibrio разделены на 8 групп. Возбудителей холеры относят к 1 группе Хейберга: расщепляют сахарозу и маннозу, не расщепляют арабинозу.

Антигенная структура:

О– соматический антиген (специфический);

Н– жгутиковый антиген (неспецифический).

По различию строения О-антигена представители вида Vibrio cholerae под-

разделяют на 206 серогрупп, среди которых возбудителями холеры являются

2

серогруппы О1 и О139«Бенгал». V.cholerae и V.El-Tor относят к О1 серогруппе.

Они представлены 3 сероварами: Огава, Инаба и Гикошима. Чаще холеру вы-

зывают серовары Инаба и Огава.

Несмотря на общность морфологических, культуральных, биохимических

иантигенных свойств, V.cholerae и V.El-Tor являются разными биологическими вариантами (биоварами), т.к. отличаются по некоторым биологическим (фено-

игенотипическим) свойствам. Серогруппа О1 (V.El-Tor) вызывает холерные пандемии с высокой смертностью в развивающихся странах. Серогруппа О139«Бенгал» вызывает холероподобные заболевания.

Факторы патогенности возбудителей холеры:

1.Адгезины – pili для прикрепления к энтероцитам.

2.Нейраминидаза способствует прикреплению фракции В холерного эк-

зотоксина к рецепторам энтероцитов.

3.Экзоэнтеротоксин – белок, состоящий из двух субъединиц: А и В.

Субъединица В взаимодействует с рецепторами энтероцитов и обусловливает проникновение в них субъединицы А. А-субъединица – собственно токсиче-

ская, активирует аденилатциклазу, что приводит к увеличению цАМФ, гипер-

секреции солей и воды в просвет кишечника. Развивается диарея, сопровож-

дающаяся резким обезвоживанием организма.

Холера – особо опасное инфекционное заболевание.

Источники инфекции: больной человек или вибрионоситель.

Путь заражения: алиментарный при употреблении инфицированной воды или пищевых продуктов.

Микробиологические и эпидемиологические особенности современной

холеры (Информационный бюллетень ВОЗ, 2014 г.):

1.Основной возбудитель (95-99%) V.El-Tor (серогруппы О1).

2.Антисанитарные условия окружающей среды в эндемичных районах и мес-

тах поселения мигрантов, беженцев и др., где не удовлетворяются потребно-

сти в чистой воде и средствах гигиены.

3.Последствия технических катастроф с разрушением систем водоснабжения.

3

4.Высокая скорость распространения заболевания (обусловлена скоростными транспортными средствами).

5.Значительный процент вибрионосительства в эндемичных очагах (Юго-

Восточная Азия, Африка, Латинская Америка) с легким клиническим тече-

нием холеры.

Клиническая картина заболевания: основными клиническими формами заболевания является холерный энтерит и гастроэнтерит. Первым клинически выраженным признаком является диарея. Частота стула от 3-10 раз (при легких формах) до 200-300 раз в сутки (при тяжелых формах). Может быть обильная рвота фонтаном, не сопровождающаяся тошнотой. Потеря жидкости без лече-

ния может достигать до 10-15% от массы тела больного и приводит к резкому нарушению водно-электролитного баланса организма. В результате возникает

холерный алгид – клиническая форма, которая характеризуется снижением тургора кожи, нарушением функции сердечно-сосудистой, дыхательной и мо-

чевыделительной системы, падением температуры тела ниже нормы. Отсюда название этой формы заболевания от лат. algidus – холодный.

Материал на исследование: испражнения и рвотные массы.

Микробиологическая диагностика холеры.

1. Бактериологический метод (основной): посев исследуемого материала

на 1% пептонную воду и щелочной агар.

Идентификация выделенной культуры:

1)по морфологическим признакам;

2)по культуральным и биохимическим признакам;

3)по антигенным признакам: постановка ориентировочной РА на стекле, а за-

тем развернутой РА (в пробирках) с О1-холерной сывороткой, сыворотками Инаба, Огава и О-139;

4) для дифференциации V.cholerae от V.El-Tor и V.О-139 «Бенгал» проводят фа-

готипирование и посев исследуемой культуры на среду с полимиксином.

2. Экспресс – диагностика:

РИФ (прямая);

4