Материал: vse_metody_MIKROB

Микробиологическая диагностика.

1.Бактериологический метод с определением антибиотико-

чувствительности возбудителя.

2.ПЦР.

Специфическая профилактика заболеваний, вызываемых гемофильными

бактериями в России, не разработана, но разрешены к применению зарубежные

вакцины против H.influenzae типа b.

5. Характеристика бордетелл. Микробиологическая диагностика коклюша

и паракоклюша. Специфическая профилактика коклюша.

Род Bordetella включает 2 патогенных для человека вида:

B.pertussis – возбудитель коклюша;

B.parapertussis – возбудитель паракоклюша (коклюшеподобное заболевание

у человека).

Морфо-тинкториальные свойства: грамотрицательные мелкие, короткие бактерии, спор не образуют, имеют микрокапсулу, неподвижны.

Чистая культура B.pertussis. Окраска по Граму.

Культуральные свойства: строгие аэробы, требовательны к питательным средам. B.pertussis культивируют на специальных питательных средах: казеи-

ново-угольный агар (КУА), среда Борде-Жангу (картофельно-глицериновый агар с кровью человека), молочно-кровяной агар. На среде Борде-Жангу возбу-

8

дитель коклюша растет в виде гладких мелких блестящих выпуклых колоний,

напоминающих капельки ртути. B.parapertussis культивируют на МПА и в

МПБ.

Антигенная структура:

1.О-антиген – родоспецифический;

2.К-антигены (капсульные) имеют значение для идентификации видов бордетелл по антигенным свойствам в реакции агглютинации.

Факторы патогенности B.pertussis:

1.Комплекс адгезинов: филаментозный гемагглютинин (протективный ан-

тиген), пили, белок наружной мембраны (пертактин), капсула;

2.Токсины:

коклюшный экзотоксин вызывает повышенную чувствительность к гистамину, лимфоцитоз;

трахеальный цитотоксин повреждает мерцательный эпителий респира-

торного тракта;

дермонекротоксин вызывает воспаление и некроз эпителия респиратор-

ного тракта;

аденилатциклаза подавляет функции фагоцитов;

эндотоксин (ЛПС) повреждает эпителиальные клетки респираторного тракта, обладает общетоксическим действием.

Коклюш – острое инфекционное заболевание. Чаще болеют дети дошко-

льного возраста.

Источник инфекции: больной человек (особенно в катаральном периоде

заболевания), редко – бактерионоситель.

Путь передачи: воздушно-капельный.

9

Заболевание характеризуется высокой контагиозностью. После контакта неиммунизированного человека с больным коклюшем вероятность развития за-

болевания составляет 75-90%.

Клиника: инкубационный период длится в среднем 2 недели, затем сле-

дует катаральный период (наиболее контагиозный, проявляется симптомами сухого, постоянно усиливающегося кашля). Пароксизмальный период (пери-

од судорожного кашля), который характеризуется появлением приступов спаз-

матического кашля, частые продолжительные приступы кашля могут приво-

дить к перевозбуждению дыхательного центра и остановке дыхания (развитию апноэ), стадия выздоровления характеризуется постепенным уменьшением частоты приступов кашля, выздоровление наступает медленно (в течение 1-2

месяцев).

Паракоклюш имеет более легкое течение.

Материал на исследование: слизь с задней стенки глотки.

Микробиологическая диагностика.

1.Экспресс-диагностика (в начале заболевания): РИФ и ИФА для опре-

деления антигенов возбудителей в материале от больного.

2.Бактериологический метод, основной (наиболее эффективен в конце инкубационного периода и в катаральном периоде): посев слизи с зад-

ней стенки глотки на соответствующие среды с последующей иденти-

фикацией. Забор материала в пароксизмальный период чаще проводят методом «кашлевых пластинок» (во время приступа кашля подносят чашку с питательной средой ко рту на расстояние 10-12 см). Реже берут мазок тампоном с задней стенки глотки.

3.Молекулярно-биологический: ПЦР.

4.Серологический метод (используют с 3 недели заболевания): опреде-

ление антител в сыворотке крови с помощью РА, РНГА, РИФ

(непрямая), ИФА.

10

Специфическая плановая профилактика коклюша.

В течение первого года жизни ребенку необходима трехкратная вакцина-

ция убитой коклюшной вакциной в составе АКДС (адсорбированная кок-

люшно-дифтерийно-столбнячная вакцина) (Россия).

Разработаны и применяются бесклеточные вакцины, содержащие очи-

щенные антигены возбудителей коклюша (филаментозный гемагглютинин,

коклюшный анатоксин и др.) (Япония, Бельгия, США и др.).

Экстренная профилактика (для неиммунизированных людей при кон-

такте с больным коклюшем): нормальный человеческий иммуноглобулин.

B.bronchiseptica представляют собой мелкие подвижные грамотрицатель-

ные палочки, которые являются паразитами млекопитающих. Они локализуют-

ся и размножаются среди ресничек эпителия дыхательных путей.

B.bronchiseptica крайне редко вызывает у людей заболевание, напоминающее паракоклюш. Ее можно обнаружить в носоглотке людей со сниженным имму-

нитетом, а также людей, содержащих домашних животных (кроликов, собак и др.). Возможно бессимптомное носительство этих бактерий у человека.

6. Характеристика легионелл, роль в патологии, микробиологическая ди-

агностика легионеллеза.

Из 22 видов легионелл, патогенных для человека, 95% случаев заболева-

ний связаны с видом Legionella pneumophila. Бактерии получили название бла-

годаря вспышке пневмонии со смертельными исходами среди участников съез-

да Американского Легиона в 1976 г. (болезнь легионеров, легионеллез).

Морфо-тинкториальные свойства: L.pneumophila – мелкие грамотрица-

тельные палочки, спор и капсул не образуют, подвижны.

Культуральные свойства: аэробы, требовательны к питательным средам,

размножаются только на сложных питательных средах (с добавлением железа и цистеина).

11

Факторы патогенности. Легионеллы – факультативные внутриклеточные паразиты. Активно размножаются в макрофагах, что приводит к их разруше-

нию и выходу бактерий в легочную ткань. Этот процесс обеспечивается сле-

дующими факторами патогенности: цитотоксином и супероксиддисмутазой.

Эндотоксин (ЛПС) обусловливает симптомы общей интоксикации.

Источники инфекции и путь заражения. Легионеллы в природных усло-

виях обитают в пресноводных водоемах, но способны успешно колонизировать искусственные водоемы системы водоснабжения, водопроводные трубы, кра-

ны, душевые установки, кондиционеры, медицинскую аппаратуру. На синтети-

ческих и резиновых поверхностях бактерии образуют биопленку, устойчивую к дезинфицирующим средствам. Путь заражения: аэрогенный, при вдыхании мелкодисперсного аэрозоля, содержащего возбудителя.

Патогенез и клиника. Ведущим фактором в патогенезе является накопле-

ние возбудителя в альвеолярных макрофагах. Высокая концентрация бактерий приводит к развитию острого воспалительного процесса в легочной ткани.

Болезнь легионеров сопровождается лихорадкой, болями в груди, кашлем,

одышкой. В 20-30% случаев развивается острая дыхательная недостаточность.

Могут развиться инфекционно-токсический шок, почечная недостаточность,

поражения ЦНС. Летальность до 25%.

Второе клиническое проявление этой патологии – лихорадка Понтиак –

ОРЗ без пневмонии. Течение легкое.

Материал на исследование: мокрота, материал при бронхоскопии.

Микробиологическая диагностика.

1. Экспресс-диагностика: РИФ биопсийного материала легких.

2. ПЦР.

3. Бактериологический метод: посев на соответствующие питательные

среды.

4. Серологический метод: РИФ, ИФА.

12