Материал: vse_metody_MIKROB

Антибиотики могут вырабатывать клетки животного (лизоцим) и расти-

тельного происхождения (фитонциды чеснока и лука), однако широкого произ-

водственного применения в медицине они не имеют.

Основными источниками получения природных и полусинтетических

антибиотиков являются:

-плесневые грибы родов Penicillium и Cephalosporium – синтезируют бета-

лактамные антибиотики (пенициллины и цефалоспорины);

-актиномицеты (ветвящиеся бактерии) – синтезируют большинство (80%)

природных антибиотиков, в том числе стрептомицин, ванкомицин, нистатин и др.;

-бактерии (бациллы, псевдомонады и др.).

Группы антибиотиков по химической структуре:

бета-лактамные (пенициллины, цефалоспорины, монобактамы, карбапенемы);

макролиды;

производные диоксиаминофенилпропана (левомицетин);

тетрациклины;

аминогликозиды;

спектиномицин;

полимиксины;

гликопептиды;

липопептиды;

ансамицины (рифампицин);

полиеновые антибиотики;

антибиотики других химических групп.

15

Синтетические противомикробные химиотерапевтические препараты.

Методами химического синтеза созданы вещества, которые не встречаются в живой природе, но похожи на антибиотики по механизму и спектру действия.

К наиболее значимым группам относят:

1.сульфаниламиды (производные сульфаниловой кислоты);

2.хинолоны;

3.нитрофураны;

4.8-оксихинолины;

5.производные хиноксалина;

6.5-нитроимидазолы

7.оксазолидиноны.

В бактериальной клетке есть четыре основные области, которые отличают-

ся от клеток человека и определяют клиническую эффективность действия ан-

тибактериальных препаратов: клеточная стенка, рибосомы, нуклеиновые

кислоты и цитоплазматическая мембрана.

По механизму действия антибиотики подразделяют:

1. Бактерицидные:

нарушают синтез клеточной стенки или ее компонентов (бетa-лактамы,

фосфомицин, ристомицин);

нарушают морфо-функциональную организацию цитоплазматической мембраны (полимиксины, полиены);

нарушают репликацию ДНК (фторхинолоны).

2. Бактериостатические:

ингибируют синтез белка на уровне РНК-полимеразы (рифампицины);

ингибируют синтез белка на уровне рибосом (тетрациклины, левомице-

тин, фузидин, макролиды и др.).

16

Антибиотики могут быть узкого спектра (действуют только на грамотри-

цательные бактерии или на некоторые виды грамположительных бактерий), а

также широкого спектра (действуют на грамположительные и грамотрица-

тельные бактерии).

Существуют специальные группы антибиотиков: противотуберкулез-

ные, противогрибковые и др.

Нерациональное применение антимикробных лекарственных средств для лечения инфекционных заболеваний нередко приводит к формированию лекар-

ственной устойчивости – антибиотикорезистентности. Бактерии следует счи-

тать резистентными, если они не обезвреживаются оптимальными терапевтиче-

скими дозами препарата, вводимого в организм. Резистентность может быть

природной и приобретенной. Приобретенная лекарственная резистентность связана с адаптацией микроорганизмов к условиям окружающей среды. Про-

блема формирования и распространения лекарственной резистентности микро-

бов особенно значима для внутрибольничных инфекций, вызываемых госпи-

тальными микробами с множественной лекарственной устойчивостью к не-

скольким антибиотикам (так называемая полирезистентность).

6.Методы определения чувствительности бактерий к антибиотикам.

Осложнения и последствия антибиотикотерапии.

Метод серийных разведений. В пробирках готовят двукратные разведе-

ния антибиотиков, а затем к каждому разведению добавляют взвесь исследуе-

мых бактерий. После термостатирования в течение суток при 370С определяют минимальную подавляющую концентрацию антибиотика (МПК), т.е самую низкую концентрацию препарата, которая полностью задерживает рост бакте-

рий (рисунок 14).

17

Рисунок 14 – Определение чувствительности бактерий к антибиотикам ме-

тодом серийных разведений

Диско-диффузионный метод. Производят посев выделенной от больно-

го культуры бактерий сплошным газоном на пластинчатый МПА. Затем на по-

сев помещают стандартные бумажные диски, пропитанные различными анти-

биотиками, и термостатируют при 370С 24 часа.

Учет результатов проводят по диаметру зон отсутствия роста бактерий во-

круг дисков (рисунок 15). Размеры зон подавления роста сравнивают со стан-

дартами и определяют антибиотик, который необходим для лечения.

Рисунок 15 – Определение чувствительности бактерий к антибиотикам диско-диффузионным методом

18

Осложнения и последствия антибиотикотерапии

Аллергические реакции (крапивница, анафилактический шок и др.). Могут вы-

зывать большинство антибиотиков.

Иммунотоксическое действие на клеточный и гуморальный иммунитет, а так-

же фагоцитоз (тетрациклины, левомицетин и др.).

Токсические реакции в связи с органотропным действием антибиотиков при длительном лечении: поражение печени (тетрациклин, рифампицин), почек

(стрептомицин, полимиксин), костного мозга (левомицетин) и др.

Эндотоксический шок. Развивается в тех случаях, когда под влиянием анти-

биотика происходит массовое разрушение грамотрицательных бактерий и по-

ступление в кровь их эндотоксинов.

Дисбактериозы. Развиваются после длительного применения антибиотиков,

подавляющих резидентную микрофлору организма.

Формирование антибиотикоустойчивых микробов.

Практическая работа

1. Определение фаготипа бактерий.

Провести фаготипирование культур микроорганизмов, выделенных от больного и предполагаемого источника инфекции для выявления эпидемиоло-

гической цепочки при вспышке инфекционного заболевания. Учет фаготипиро-

вания культур S.typhi, выделенных от больных брюшным тифом и брюшноти-

фозного носителя по демонстрации.

2. Определение чувствительности бактерий к антибиотикам.

Метод серийных разведений.

I этап исследования. Приготовить двукратные разведения антибиотика

(гентамицин) в МПБ в объеме 2 мл (таблица 8). Затем во все опытные пробирки внести по 0,2 мл суточной бульонной культуры испытуемых бактерий (E. coli).

Поставить контроль бактерий (КБ) на наличие роста. Пробирки поместить в термостат при 370С на 24 часа.

Таблица 8 – Схема определения чувствительности бактерий к антибиотикам

19