распространенной розеолезно-папулезной сыпью. Возбудитель – R. typhi, открыты в 1928 г. Музером.
Общие свойства те же, что у риккетсий Провачека, кроме вышеописанных свойств, характерно активное размножение в мезотелиальных клетках грызунов и образование клеток Музера; имеют термолабильный специфический белковый антиген и полисахаридный, общий с риккетсиями Провачека и протеем ОХ-19.
Характеристика заболевания
Источник инфекции – мелкие грызуны (крысы, мыши), которые выделяют возбудителя в окружающую среду с мочой.
Переносчики и резервуары инфекции – клещи. Переносчиками могут быть блохи.
Пути передачи: трансмиссивный, иногда алиментарный (через продукты, загрязненные выделениями грызунов). Заражение человека чаще осуществляется через укус крысиного клеща и втирания возбудителя с фекалиями в поврежденную кожу и слизистые. Заболевание носит природноочаговый характер.
Для клинической картины заболевания характерны лихорадка, обильная сыпь (начинается с туловища), интоксикация.
Иммунитет – прочный, перекрестный с эпидемическим сыпным тифом.
Лабораторная диагностика
Серологический метод – РПГА, РСК, реакция агглютинации риккетсий, РИФ. Реакции ставят параллельно с риккетсиями Музера и Провачека. С гомологичным антигеном титр АТ выше в 3 и более раз.
Биопроба на морских свинках (самцах), которым вводят материал внутрибрюшинно. При эндемическом сыпном тифе развивается специфический периорхит.
Бактериологический метод: при культивировании в культурах клеток образуются бляшки. Для идентификации возбудителя ставят реакцию нейтрализации бляшкообразования.
Профилактика неспецифическая – изоляция и лечение больных, дератизация, дезинфекция в очаге, охрана пищевых продуктов от загрязнения выделениями грызунов.
Вакцина из риккетсий Музера малоэффективна.
Группа пневмотропных риккетсиозов включает одно заболе-
вание – Ку-лихорадку, которую вызывает Coxiella burnetii. Это острое природно-очаговое риккетсиозное заболевание с разнообразными механизмами заражения. Характеризуется поражением макрофагальной системы, лихорадкой, интоксикацией.
Первое описание этого заболевания сделано Е. Дерриком в 1937 г. среди фермеров в Австралии и названо им «Q-fever» (от английского query – неясный, неопределенный). В 1939 г. Ф. Бернет и
294
М. Риман выделили возбудителя этого заболевания в эксперименте на животных. В последующем возбудителя отнесли к роду Coxiella, вид
С. burnetii.
Свойства
Морфологические свойства. Очень мелкие (проходят через бактериальные фильтры диаметром 0,3-0,4 мкм) плеоморфные микроорганизмы, могут превращаться в L-формы, неподвижны, не имеют спор и капсул, окрашиваются по Здродовскому в красный цвет. Отличаются от других риккетсий по содержанию Г+Ц в ДНК (43 моль%), размножаются в фаголизосомах (вакуолях) эукариотических клеток.
Культуральные свойства. Строгие внутриклеточные паразиты. Размножаются в фаголизосомах (вакуолях) эукариотических клеток при кислом рН. Имеют 2 морфологических варианта в жизненном цикле – малый (вне клетки), большой - внутриклеточный. Из большого варианта образуется форма, напоминающая спору.
Репликация коксиелл происходит очень медленно. Культивируются в желточном мешке куриного эмбриона при 35 С, в культурах клеток куриных фибробластов, в отличие от других риккетсий, имеют собственные системы биосинтеза белка и мобилизации энергии.
Антигены.
При развитии заболевания возбудитель находится в 2 фазах. I фаза соответствует S-форме микроба, II фаза соответствует R-форме. Отсюда различают полисахаридные АГ I и II фаз. Фазовая вариабельность выявляется в РСК. Антигены I фазы выявляют в период поздней реконвалесценции, а II-й фазы определяются в раннем периоде болезни.
Резистентность. Очень устойчивы в окружающей среде. Дезрастворы на них действуют медленно. При температуре 4 С могут сохранять жизнеспособность до 1 года. Нагревание до 70-90 С инактивирует их лишь частично, 100 С оказывает губительное действие через 10 минут. Малочувствительны к формальдегиду, 1%-ному фенолу, высокочувствительны к спирту, эфиру.
Характеристика заболевания
Источники инфекции – грызуны, дикие и домашние животные.
Пути передачи – аэрогенный, гораздо реже алиментарный (через молоко) и трансмиссивный через укусы иксодовых, аргасовых и гамазовых клещей. У клещей есть трансовариальная передача возбудителя.
Патогенез. В патогенезе выделяют несколько фаз:
–внедрение риккетсий без первичного аффекта у входных ворот;
–лимфогенная и гематогенная диссеминация риккетсий, сопровождается внедрением возбудителя в эндотелиальные клетки;
295
–размножение риккетсий в макрофагах и гистиоцитах, выход их
вкровь. Развивается повторная риккетсиемия, токсинемия и появляются вторичные очаги инфекции во внутренних органах. Параллельно развивается ПЧЗТ.
Инкубационный период длится от 10 до 26 дней. Клиническая картина очень вариабельна. В 60% случаев болезнь имеет бессимп-
томное течение. При развернутых формах заболевания начало острое, лихорадка 39-40оС (2-3 недели), интоксикация, головная боль, боли в мышцах, носовые кровотечения, кашель, гиперемия лица, инъекция склер. Основными органными поражениями являются пневмония, гранулематозный гепатит, повреждение клапанов сердца (эндокардит), который возникает при хронической форме болезни.
Лабораторная диагностика
Материал для исследования: кровь, сыворотка, биоптаты тканей. Серологический метод – РСК с 10-12 дня. Диагностический титр
АТ – 1:40 – острая форма болезни (АГ 2 фазы), 1:200 – хроническая форма (АГ 1 фазы). Также применяется МИФ для выявления АТ. Можно использовать реакцию агглютинации, ИФА с 8-10 дня болезни. В разгар заболевания выявляют антитела к II фазе антигена. При анамнестической реакции определяются антитела к I и II фазе.
Культивирование проводят только в специализированных лабораториях на куриных эмбрионах и культурах клеток.
Аллергическая проба строго специфична с 3-8 дня заболевания. Биопроба проводится на морских свинках, белых мышах, хлоп-
ковых крысах. У них через 7 дней после заражения возбудитель накапливается в печени, селезенке и других органах, что можно выявить при вскрытии трупов животных и приготовлении мазковотпечатков для выделения возбудителя.
Реакция иммунной флюоресценции применяется для выявления антигена.
Используют молекулярные методы: ПЦР (в том числе в молоке), метод гибридизации ДНК, вестерн-блотинг.
Профилактика. Неспецифическая проводится в очагах, включает контроль за состоянием здоровья животных, достаточную термическую обработку молочных и мясных продуктов, дезинфекцию. Для специфической профилактики используют живую вакцину из штамма М-44. Применяют ее накожно.
Лечение. Коксиеллы имеют природную устойчивость к беталактамам и аминогликозидам. При острой форме назначают доксициклин, офлоксацин, макролиды (кларитромицин). При хронической форме – комбинации антибиотиков (доксициклин, офлоксацин), которые применяют в течение нескольких лет.
296
XVIII. ХЛАМИДИИ
Хламидии – микроорганизмы со строгим внутриклеточным паразитизмом. Они впервые были обнаружены С. Провачеком и Л. Гальберштедтером в 1907 г. в отделяемом конъюнктивы при трахоме. Обнаруженные Провачеком микроколонии (тельца Гальберштедтера – Провачека) были окутаны мантией («хламидой»). С этого периода все микроорганизмы с аналогичными фенотипическими признаками стали относить к семейству Chlamydiaceae, роду Chlamydia.
Начиная с 1970 г. благодаря развитию ДНК-систематики, при изучении генома хламидий были использованы методы генетической рестрикции и молекулярной гибридизации, что позволило изучить структуру генов 16S и 23S рРНК у различных представителей порядка Chlamydiales. Результаты этих исследований (процент гомологии в последовательности генов 16S и 23S рибосомальной РНК), а также различия культуральных, биохимических, антигенных свойств хламидий, клинические проявления заболеваний и строго определенный круг хозяев явились предпосылкой к изменению номенклатуры и таксономии микроорганизмов, входивших в порядок Chlamydiales
(К. Еwerett, 1999).
В настоящее время выделено 4 семейства: Chlamydiacea, включающее 2 рода, патогенных для человека микроорганизмов – Chlamydia и Chlamydophila и 3 семейства родственных хламидиям микроорганизмов – Parachlamydiaceae, Simcaniacae и Waddliaceae.
Наибольшую роль в патологии человека из рода Chlamydia играет C. trachomatis, имееющая 15 сероваров. Серовары L-1, L-2, L-3 являются возбудителями пахового лимфогранулематоза; сероварианты А, Ва, В и С – возбудители трахомы. Остальные (от D до К) вызывают различные урогенитальные заболевания, пневмонию новорожденных, путь передачи – контактный.
Из рода Chlamydophila патогенными для людей являются
C.pneumoniae, C. psittaci, C.abortus. C. pneumoniae имеет 4 серовари-
анта – TWAR, AR, KA, CWZ. Они вызывают пневмонии, ОРВИ, изучается их участие в патогенезе атеросклероза, бронхиальной астмы, саркоидоза. Путь передачи данных инфекций – воздушно-капельный.
C.abortus распространены среди животных, они колонизируют плаценту, вызывают аборты у животных, реже у женщин, работающих с овцами.
C. psittaci имеют восемь серовариантов. Они вызывают орнитоз (пситтакоз). Путь передачи – воздушно-капельный. Источник инфекции – птицы (для орнитоза – голуби, для пситтакоза – попугаи).
Свойства
Структура клеточной стенки хламидии соответствует общему
297
принципу построения грамотрицательных бактерий. Она состоит из внутренней цитоплазматической и наружной мембран (обе являются двойными, обеспечивая прочность клеточной стенки). Антигенные свойства хламидий определяются внутренней мембраной, которая представлена липополисахаридами. В нее интегрированы белки наружной мембраны (Outer membrane proteins – ОМР). На основной белок наружной мембраны - Major Outer Membrane Protein (MOMP)
приходится 60% общего количества белка. Остальная антигеннная структура представлена белками наружной мембраны второго типа – ОМР-2.
Все хламидии имеют общий групповой, родоспецифичный антиген (липополисахаридный комплекс, реактивной половиной которого является 2-кето-З-дезоксиоктановая кислота), используемый при диагностике заболевания иммунофлюоресцентными методами с применением специфических антител.
Белки MOMP и ОМР-2 содержат видо- и серотипоспецифические эпитопы. Однако в них имеются также области с высоким сходством среди видов (родоспецифические эпитопы), что обусловливает возможность появления перекрестных реакций. Основной белок клеточной мембраны и богатые цистеином другие белки связаны дисульфидными связями. Обнаружено пять генов дисульфидсвязанных изомераз, возможно играющих роль в реструктуризации цистеинбогатых белков при дифференциации элементарных телец в ретикулярные. У C. trachomatis выявлено 9 генов, кодирующих поверхностные мембранные белки, у C. pneumonia –18.
Хламидии и хламидофилы – строгие внутриклеточные патогены. Они способны синтезировать АТФ в незначительных количествах путем гликолиза и расщепления гликогена. Гликолитический цикл редуцирован, поскольку отсутствуют некоторые ферменты. Он компенсируется через пентозофосфатный и гексозофосфатные шунты. Хламидии в процессе приспособления к внутриклеточному паразитизму выработали уникальные структуры и биосинтетические механизмы, не имеющие аналогов у других бактерий. У хламидий не обнаружен высококонсервативный ген Ftsz, абсолютно необходимый для клеточного деления всех прокариот, поскольку он ответственен за образование клеточной перегородки во время деления клетки. У хламидий отсутствует пептидогликан – компонент клеточной стенки существующий как у грамположительных, так и у грамотрицательных бактерий, но при этом в геноме содержатся гены, кодирующие белки, которые необходимы для его полного синтеза.
Методом сканирующей электронной микроскопии на поверхности хламидий были выявлены куполообразные структуры, пронизанные микрофиламентами. Микрофиламенты выходят из центра, дости-
298