Материал: m34250_2

Работа 35. Реакция обнаружения холестерола в растительном и животном маслах.

Реакция Сальковского на холестерол

Под действием концентрированной серной кислоты происходит дегидратация молекулы холестерола с образованием холестерилена – соединения, окрашенного в красный цвет.

Реактивы: а) холестерол, 1%-ный хлороформный раствор, или растительное масло, хлороформный раствор;

б) серная кислота, концентрированная (р20=1,836).

К 2-3 мл хлороформного раствора холестерола (или растительного масла) в пробирке осторожно, наслаивая по стенке, добавляют 1-2 мл концентрированной серной кислоты. Пробирку легко встряхивают. Вначале верхний слой, а затем и вся жидкость в пробирке принимает красную, оранжевую или красно-фиолетовую окраску.

Реакция Либермана – Бурхарда на холестерол

При реакции холестерола с уксусным ангидридом и серной кислотой образуются сульфокислоты холестерилена, обладающие сине-зеленой или зеленой окраской.

Реактивы: а) холестерол, 1%-ный хлороформный раствор, или растительное масло, хлороформный раствор;

б) уксусный ангидрид;

в) серная кислота, концентрированная (р20=1,836).

Ход опыта

В пробирку наливают 2-3 мл хлороформного раствора холестерола или растительного масла, прибавляют 10 капель уксусного ангидрида и наслаивают по стенке 2-3 капли концентрированной серной кислоты. Через 5-8 мин появляется вначале красное, затем сине-зеленое и зеленое окрашивание расщепляется на свои компоненты в клетках эпителия кишечных ворсинок.

Освободившиеся желчные кислоты всасываются в кровь и через систему воротной вены снова поступают в печень. Жирные же кислоты вступают в сложноэфирную связь с глицерином, образуя жир, свойственный ужу данному виду животного.

Гидролиз фосфолипидов катализируется ферментами фосфолипазами (А,В,С,D), расщепление холестеридов происходит под влиянием холестеролэстеразы.

Задание: 1. Выполнить опыт.

2. Написать химическую структуру холестерола.

3. Биологическая роль холестерола.

4. Применение методов определения холестерола в работе товароведа-эксперта.

Вопросы для самоподготовки по теме 8

1. Липиды и липоиды (понятие, свойства, классификация, биороль).

2. Холестерол (строение, роль, производные).

3. Желчные кислоты (представители, строение, роль).

4. Фосфолипиды (строение, представители, роль).

5. Сфинголипиды (строение, представители, роль).

6. Ацилглицеролы (строение, переваривание, всасыва-

ние продуктов гидролиза, роль желчных кислот в этих процессах).

7. Жирные кислоты (высшие, низшие, заменимые, незамени- мые, предельные, непредельные), строение, представители, роль.

8. Пути использования глицерина и жирных кислот (-окис-ление - схема и др.) в клетках. Роль процессов.

9. Ацетоновые тела (представители, причины и схема их образования, пути устранения).

10. Регуляция обмена липидов в организме животных и человека с целью сохранения их здоровья.

Тема 9. Витамины

Витамины - физиологически активные вещества, принимаю- щие разнообразное участие в обмене веществ живых организмов непосредственно или в составе сложных ферментов в виде коферментов и простетических групп.

Витамины - органические вещества с разнообразным строени- ем молекул и различными физико-химическими свойствами. Все витамины подразделяются на две большие группы: жирорастворимые (A, D, E, K) и водорастворимые (витамины группы В, аскорбиновая кислота).

Определение их в кормах и продуктах питания имеет существенное значение, так как от них зависят здоровье и продуктивность животных. Недостаток витаминов в организме (гиповитаминоз) и избыток (гипервитаминоз) имеют отрицатель-ные последствия.

Работа 36. Обнаружение витамина а в жире

Витамин А (ретинол, антиксерофтальмический витамин) находится главным образом в рыбьем жире, печени, желтке, яиц, сливочном масле. В растениях обнаружены его предшественники (провитамины) - каротины, при гидролизе которых в организме из них образуется витамин А.

Проба с H₂SO₄. В три сухие пробирки внести соответственно вазелиновое масло, подсолнечное масло и препарат витамина А - по 2 капли. Добавить в каждую пробирку под вытяжным шкафом по 1 мл хлороформа. Перемешать и очень (!) осторожно внести по 1 капле концентрированной H₂SO₄. Появление красно-фиолетового окрашивания, переходящего в красно-бурое, свидетельствует о наличии витамина А в пробе.

Проба с треххлористой сурьмой. В три сухие пробирки внести соответственно вазелиновое масло, подсолнечное масло и препарат витамина А - по 2 капли. Добавить в каждую под вытяжным шкафом около 1 мл 33% хлороформного раствора сурьмы. Появление синего окрашивания свидетельствует о наличии ретинола.

Задание: 1. Выполнить опыт-пробу с H₂SO₄ или с треххлористой сурьмой.

2. Определить ретинол в вазелиновом, подсолнечном масле и препарате витамина А и сделать вывод о его наличии в них.

3. Указать практическое значение качественных проб на витамин А.

4. Написать схему образования из -каротина ретинола и отметить биороль последнего.

Работа 37. Обнаружение витамина д в жире

Витамин Д (кальциферол, антирахитический витамин) содержится в рыбьем жире, печени, желтке яиц, сливочном масле. В клетках кожи человека и животных он образуется под действием ультрафиолетовых лучей из провитаминов - 7-дегидрохолестерола (витамин Д₃).

Бромхлороформная проба. В три сухие пробирки внести соответственно вазелиновое масло и препарат витамина Д - по 2 капли и по 2 капли (под вытяжным шкафом) раствора брома в хлороформе (1:60).

При наличии витамина Д₃ появляется зеленовато-голубая окраска раствора.

Анилиновая проба. В три сухие пробирки внести соответственно вазелиновое масло, подсолнечное масло и препарат витамина Д - по 2 капли. Добавить в каждую пробу по 10 капель хлороформа и по 1 капле анилинового реактива (15 частей анилина + 1 часть концентрированной НCl). Очень осторожно нагреть. При наличии витамина Д желтая эмульсия приобретает красный цвет.

Задание: 1. Выполнить опыт с бромхлороформной или анилиновой пробой.

2. Определить кальциферол в вазелиновом, подсолнечном масле и препарате витамина Д₃, сделать заключение о его наличии в них.

3. Указать прикладное значение качественных проб на витамин Д₃.

4. Написать схемы образования витаминов Д₂ и Д₃ из их провитаминов и отметить биороль кальциферолов.

Работа 38. Обнаружение витамина с в биоматериале

Витамин С (аскорбиновая кислота, антицинготный витамин) синтезируется в организме животных (кроме морской свинки, обезьяны и человека). Животные и человек испытывают большую необходимость в витамине во время беременности, при различных заболеваниях и т.д. В этих случаях особенно, как и вообще, потребности в нем организма должны покрываться за счет его поступления с растительной пищей.

Ход опыта

Взять кусочек растительного материала (лист капусты, картофель и т. д.), растереть его в ступке. Залить дистиллированной водой. Перемешать. Отфильтровать. Налить в 1-ю пробирку (контроль) 1 мл дистиллированной воды, во 2, 3 и 4-ю - по 1 мл фильтрата. В 3-ю добавить 0,1 н раствора НСl, а в 4-ю - 5 капель 0,1 н раствора NaOH, обе прокипятить и охладить водопроводной водой. Затем в каждую пробирку внести по 1 капле свежеприготовленного 1% раствора красной кровяной соли – К₃Fе(СN)₆ и по 1 капле 1% раствора FеС1₃.

При наличии витамина С в пробе появляется синее окрашивание, а при стоянии образуется осадок берлинской лазури.

Задание: 1. Выполнить опыт.

2. Определить и сделать вывод, есть ли витамин С в исследуемом материале.

3. Как влияют высокая температура и реакция среды на сохранность аскорбиновой кислоты?

4. Написать строение витамина С и схему его разложения.

Вопросы для самоподготовки по теме 9

1. Витамины (понятие, классификация, основные свойства классов, номенклатура, распространение в природе).

2. А-, гипо- и гипервитаминозы (понятия, причины, последст- вия, возможные пути устранения, примеры) .

3. Связь витаминов с ферментами и другими белками (какие витамины, примеры).

4. Провитамины и антивитамины (понятия, примеры, место их в метаболизме витаминов, примеры).

5. Жирорастворимые витамины (А, Д, Е, К), их строение, наиболее характерные свойства, роль в организме, использование в экспертизе продовольственных товаров.

6. Водорастворимые витамины (В₁, В₂, В₆, В₁₂, В₁₅, РР, Н, В_с, ПАБК, С, пантотеновая кислота, инозит, холин и др.), их строение, наиболее характерные свойства, роль в обмене веществ, применение в практике товароведа-эксперта.

Тема 10. Минеральные вещества и вода

В живом организме (растения, животные, человек) находится 60-75% воды и обнаружено около 70 (из 107 известных) химических элементов, содержание которых колеблется от 1/1000% (макроэлементы Na, Са и др.) до 1/1 млн % (микроэлементы J, Zn, Co и др.) и меньше 1/1 млн % (ультрамикроэлементы Аu, U, Ra и др.).

Биологическая роль многих веществ 1 и 2-й групп в разной степени установлена. Она весьма значительна и разнообразна. Поэтому определение их содержания в тканях, органах и биологических жидкостях важно не только с позиций их метаболизма, но и состояния здоровья человека и животных.

Работа 39. Определение количества кальция в молоке и гомогенате мышечной ткани по де Ваарду

Кальций в организме играет исключительно важную роль. 80% его входит в состав костной ткани в виде Са₃(РО₄)₂ и 13% СаСО₃. Около 40% кальция связано с альбуминами в виде сложных комплексных соединений. Кальций, как двухвалентный катион, понижает возбудимость нервной системы, уплотняет клеточную мембрану, возбуждает сердце, активирует актомиозин, АТФ-азу, лецетиназу и тормозит функцию енолазы, дипептазы и других ферментов, способствует свертыванию крови.

Соединение кальция составляет приблизительно 1/5 общего количества миниральных веществ молока. В женском молоке содержится в среднем 34 мг% кальция, коровьем – 125, кобыльем – 80-85.

Молоко важный источник кальция и фосфора в питании не только детей, но и взрослых. 78% кальция молока представлено неорганическими солями, 22% соединено с белком казеина.

Содержание кальция в молоке определяют методом де-Ваарда.

Ход опыта

Реактивы и материалы: а) молоко, его разводят в 10 раз. В мерный цилиндр на 10-25 мл пипеткой вносят 1мл молока, дабавляют 9 мл воды и тщательно перемешивают;

В одну центрифужную пробирку наливают 1мл разведенного молока, в другую 1 мл воды. В обе пробирки наливают по 0,5 мл 4%-ного раствора щавелевокислого аммония и в остальном поступают так же, как при определении кальция в сыворотке крови.

Содержание кальция в молоке (мг%)х вычисляют по формуле:

0,2●(О-К) ●100

Х= ,

0,1

где: 0,1 - содержание молока в 1мл разведенного, мл;

О - количество 0,1н раствора KMnO4, израсходованного на титрование опытной пробы;

К – то же при титровании контрольной пробы;

0,2 – количество кальция соответствует 1мг 0,01 н. раствора KMnO4 мг.

Задание: 1. Выполнить опыт.

2. Определить количество кальция в молоке и гомогенате мышечной ткани.