Редуктазная проба используется (наряду с другими) для определения качества молока и служит показателем наличия в нем бактерий, содержащих редуктазу. Этот энзим обладает способностью с помощью реакции восстановления обесцвечивать метиленовую синь (МС). По скорости обесцвечивания МС судят об активности фермента и, следовательно, о количестве содержащихся в молоке микробов: чем их больше, тем быстрее происходит обесцвечивание и наоборот.
Определено, что если обесцвечивание происходит в течение 20 мин и ранее, то в 1 мл молока содержится 20 млн. бактерий. Такое молоко очень плохого качества.
Обесцвечивание в течение от 20 мин до 2 ч указывает на содержание от 4 до 20 млн. бактерий в 1 мл молока. Это плохое молоко.
Обесцвечивание в течение 2 - 2,5 ч свидетельствует о содержании от 500 тыс. до 4 млн. бактерий. Такое молоко расценивается как удовлетворительное.
Хорошее молоко содержит бактерий меньше 500 тыс./мл, которые обесцвечивают МС не раньше 5,5 ч.
Микробы в молоко могут поступать при болезнях, в т. ч. молочной железы, несоблюдении санитарии при доении, хранении и транспортировке молока.
Ход опыта
В пробирку налить 1 мл раствора МС (5 мл насыщенного раствора МС в 195 мл дистиллированной воды) и 20 мл молока. Перемешать, залить слоем вазелинового масла или закрыть пробкой (для создания анаэробных условий) и поставить в водяную баню при 38°С. Отметить время, в течение которого произошло обесцвечивание молока.
Задание: 1. Выполнить опыт.
2. Определить количество бактерий в 1 мл молока.
3. По этому показателю сделать заключение о качестве молока.
4. В случае плохого качества молока указать предполагаемые причины этого явления и возможные пути их устранения.
Лактоза - основной сахар молока, его содержание в среднем у коровы 4,9%, козы - 4,4% и кобылы - 6,5%. Дисахарид состоит из остатков D-глюкозы и D-галактозы.
Сущность метода заключается в нахождении коэффициента преломления обработанного специальным методом молока и определении количества лактозы.
Ход опыта
В пробирку поместить 5 мл сыворотки молока и добавить 5-6 капель 4% раствора СаСl2. Закрыть. Перемешать содержимое. Поставить в кипящую водяную баню. По истечении 10 мин охладить водопроводной водой.
Взять 1 каплю сыворотки и поместить на нижнюю призму рефрактометра. Определить коэффициент преломления и, пользуясь таблицей, рассчитать количество лактозы.
Задание: 1. Выполнить анализ.
2. Определить коэффициент преломления, а по нему - количество лактозы в молоке подопытного животного.
3. В случае отклонения содержания лактозы от ее нормы для этого животного указать предполагаемые причины.
4. Написать структурную формулу лактозы.
Количество лактозы (%) в зависимости от коэффициента преломлений (пД)
Количество лактозы (%) в зависимости от коэффициента преломлений (пД)
пД |
Лактоза |
пД |
Лактоза |
пД |
Лактоза |
1,3390 |
3,01 |
1,3404 |
3,70 |
1,3418 |
4,38 |
1,3391 |
3,06 |
1,3405 |
3,72 |
1,3419 |
4,44 |
1,3392 |
3,11 |
1,3406 |
3,77 |
1,3420 |
4,49 |
1,3393 |
3,16 |
1,3407 |
3,82 |
1,3421 |
4,54 |
1,3394 |
3,21 |
1,3408 |
3,87 |
1,3422 |
4,59 |
1,3395 |
3,26 |
1,3409 |
3,93 |
1,3423 |
4,64 |
1,3396 |
3,31 |
1,3410 |
3,98 |
1,3424 |
4,69 |
1,3397 |
3,36 |
1,3411 |
4,03 |
1,3425 |
4,74 |
1,3398 |
3,46 |
1,3412 |
4,08 |
1,3426 |
4,79 |
1,3399 |
3,47 |
1,3413 |
4,13 |
1,3427 |
4,84 |
1,3400 |
3,52 |
1,3414 |
4,18 |
1,3428 |
4,89 |
1,3401 |
3,57 |
1,3415 |
4,23 |
1,3429 |
4,95 |
1,3402 |
3,62 |
1,3416 |
4,28 |
1,3430 |
5,00 |
1,3403 |
3,67 |
1,3417 |
4,33 |
1,3431 |
5,05 |
1. Понятие «молоко» с точки зрения физико-химической биологии.
2. Химический состав молока разных животных.
3. Основные белки молока. Их биосинтез и роль.
4. Углеводы молока. Метаболизм лактозы и роль.
5. Липиды молока, их синтез, роль.
6. Витамины молока.
7. Вода и минеральные вещества молока.
8. Отличие молока от молозива
а) основная литература:
1. Кузьмичёва В.Н. Биохимия в животноводстве / В.Н. Кузьмичёва, И.Ю. Кушнир. – Воронеж: ФГОУ ВПО ВГАУ, 2004. – 183с.
2. Кузьмичёва В.Н. Ферменты: лекция / В.Н. Кузьмичёва, И.Ю. Кушнир. – Воронеж: ФГОУ ВПО ВГАУ, 2006. – 37с.
3. Хазипов Н.3. Биохимия животных: Учебник для студентов вузов. - 2-е изд., переработ., и доп./Н.З. Хазипов, А.Н. Аскарова. – Казань, 2003. – 286с.
4. Хмельницкий Р.А. Физическая и коллоидная химия / Р.А. Хмельницкий. - М.: Высш. шк., 1988. – 240с.
5. Чечеткин А.В., Биохимия сельскохозяйственных животных: Учебник для студ. зооинж. и ветерин. факультетов сельскохозяйственных вузов / А.В. Чечеткин, И.Д. Головацкий. - М.: Высш. шк., 1982. – 510с.
б) дополнительная литература:
1. Березов Т.Т. Биологическая химия: Учебник. 3-е изд., перераб. и доп. / Т.Т. Березов, Б. Ф. Коровкин - М.: Медицина, 2002. – 640с.
2. Кузьмичева В. Н. Гормоны: лекция / В.Н. Кузьмичева, И.Ю. Кушнир. – Воронеж: ФГОУ ВПО ВГАУ, 2006. - 40 с.
3. Мецлер Д. Биохимия. / Д. Мецлер.– М.: Мир, 1980. - Т. 1– 3.