Материал: Биохимия учебное пособие

Триглицериды До 1,7 ммоль/л Уздоровых лицзависит отхаНеизвестно рактера питания. Гипертриглицеридемия – один из факторов риска атеросклероза

115

значительно снижает затраты реактивов и биологического материала. Управлениеработойбиохимическогоавтоматическогоанализатора осуществляетсякомпьютером с соответствующим программным обеспечением. Выпускаемые промышленностью современныенаборы реактивов для определения параметров биологических жидкостей человека адаптированы к использованию в автоматических анализаторах. Преимуществом анализатора является возможность определения в одной пробебиологической жидкости до20–40различныхпараметров (концентраций веществ, активности ферментов и т. д.). Современные автоматические биохимическиеанализаторы способнывыполнять до800 и болееисследований в час, что позволяет в течение рабочего дня провести развернутый биохимический анализ крови несколькихсотен пациентов.

Восновеработыбиохимическиханализаторов лежит методфотоэлектроколориметрии. Фотоэлектроколориметрия (от греч. photos – свет, лат. color – цвет) – метод определения концентрации окрашенных растворов, основанный на законе светопоглощения Бугера – Ламберта – Бера:

E lg I l c,

I0

где Е – оптическая плотность (экстинкция) раствора; I и I0 – интенсивность света, прошедшегочерезраствор и падающегона растворсоответственно; –коэффици- ент погашения; l – толщина слоя раствора, см; с – концентрация раствора, моль/л. Коэффициентпогашенияявляетсякоэффициентомпропорциональностии показывает, какая доля светового потока поглощается данным раствором толщиной 1 см.

116

Преобразовав данное уравнение, получим формулу

C E .

l

Такимобразом, измерив спомощьюфотоэлектроколориметра величинуоптической плотности раствора сизвестным коэффициентомпогашения, помещенного в прозрачную кюветуизвестной толщины, мы можем определитьегоконцентрацию.

Принципиальная схема фотоэлектроколориметра включает несколько обязательных элементов (рис. 30).

Рис. 30. Принципиальная схемафотоэлектроколориметра:

а – источник света – лампа накаливания или ультрафиолетовая лампа; б – светофильтр – стекло определенного цвета, пропускающего монохроматический свет; в – стеклянная кювета с исследуемым раствором; г – фотоэлемент для регистрации интенсивности светового потока, прошедшего через раствор

Для определения I0 в данном случае используется раствор сравнения, концентрация определяемого вещества в котором равна нулю. Для перевода единиц оптической плотности (экстинкции) в единицы концентрации проводят измерение экстинкций серии контрольных растворов с известной концентрацией вещества и последующеепостроениекалибровочной кривой.

Далеко не всегда раствор интересующего нас вещества имеет собственную окраску. В этом случае в основу метода измерения берется какая-либо цветная реакцияна данноевещество, при этомконцентрацияпродукта реакции прямопропорциональна концентрации исследуемоговещества и определяется фотоэлектроколориметрически.

Вопросы для проверки усвоения материала

1.Регуляция метаболизма. Гормоны: понятие, свойства, биологическая роль.

2.Этапы метаболизма гормонов. Рецепторы гормонов.

3.Значение биохимических исследований для медицинской практики. Референтныеинтервалылабораторныхпоказателей.Подготовка крови кбиохимическому исследованию. Отличие плазмы и сыворотки крови.

117

4.Показатели крови, характеризующие углеводный обмен: глюкоза, лактат, пируват.

5.Показатели крови, характеризующиелипидный обмен:холестерин, триглицериды, липопротеиды, кетоновые тела.

6.Азотистые вещества плазмы крови: белки и остаточный азот, состав, происхождение, биологическое значение.

7.Минеральныевеществакрови(ионыкалия, натрия,кальция, магния, хлорида, бикарбоната, фосфата).

Письменное домашнее задание

1.В тетради зарисовать принципиальную схему фотоэлектроколориметра, описатьпринцип егоработы.

2.Указать основные преимущества автоматизированных методов биохимических исследований перед ручными.

Типовой вариант тестовогоконтроля по теме «Регуляция метаболизма. Биохимия крови»

Инструкция: при отсутствии дополнительных указаний в вопросе теста выберите один верный вариант ответа.

1.Каквлияютгормоныинсулиниадреналиннаконцентрациюглюкозывкрови: а) инсулин – увеличивает, адреналин – уменьшает; б) инсулин – уменьшает, адреналин – увеличивает; в)инсулин и адреналин увеличивают; г)инсулин и адреналин уменьшают.

2.Выберитеизменениелипидногоспектра плазмыкрови, увеличивающеериск атеросклероза:

а)снижениеконцентрации общегохолестерина; б)снижениеконцентрациитриглицеридов; в)повышениеконцентрации холестерина ЛПНП;

г)повышениеконцентрации холестерина ЛПВП.

3.Укажитеглавную фракцию белков плазмы крови:

а) альбумины;

б) 1-глобулины; в) 2-глобулины; г) -глобулины;

д) -глобулины.

4.Выберитеправильноесоотношениемеждуконцентрациями катионов в клетках и в плазме крови:

118

а) в плазме крови выше концентрация калия и магния, в клетках – натрия

икальция;

б) в плазме крови выше концентрация натрия и магния, в клетках – калия икальция;

в) в плазме крови выше концентрация натрия и калия, в клетках – магния икальция;

г) в плазме крови выше концентрация натрия и кальция, в клетках – калия

имагния.

5.Какойпараметротличаетсяуклетоки макромолекул, эффективноразделяющихсяметодомцентрифугирования:

а) заряд; б) плотность;

в) химическая природа; г) поглощение света; д) преломление света.

6.Какой метод позволяет разделить белки плазмы крови на фракции в зависимости от соотношения заряда и молекулярной массы:

а) спектрофотометрия; б) электрофорез; в) хроматография;

г)центрифугирование; д) флуориметрия.

7.Укажите основной компонент остаточного азота плазмы крови:

а) мочевина; б) мочевая кислота; в) креатин; г)креатинин;

д) аминокислоты.

8.Причиной повышения активности фермента в плазме крови может быть: а) увеличение синтеза фермента в клетках; б) повышение проницаемости мембран клеток; в) разрушение мембран клеток; г) все перечисленное.

9.Активность каких ферментов в крови чащевсегоисследуют в биохимических лабораториях для диагностики заболеваний человека:

а)фосфолипаза, амилаза, пепсин; б) цитратсинтаза, сукцинатдегидрогеназа, аконитаза;

в) гексокиназа, фосфофруктокиназа, альдолаза; г)креатинкиназа, лактатдегидрогеназа, аланинаминотрансфераза; д) нуклеотидаза, ксантиноксидаза, уриказа.

119