Дипломная (вкр): Отличительная ферментодиагностика больных с поражением печени неинфекционной этиологии

2.2.3 Определение активности аланинаминотрансферазы

Принцип метода: аланинаминотрансфераза катализирует реакцию между L-аланином и 2-оксоглутаратом, в результате которой они превращаются в L-глутамат и соль пировиноградной кислоты. Определение основано на измерении оптической плотности гидразонов 2-оксоглутаровой и пировиноградной кислот в щелочной среде. Гидразон пировиноградной кислоты обладает более высокой оптической плотностью. Референтные показатели уровня аланинаминотрансфераза в сыворотке крови - 7 - 45 [Абдулаев, 2005].

2.2.4 Определение активности гамма-глютамилтранспептидазы

Принцип метода: гамма - глутамилтрансфераза катализирует перенос гамма - глутамила с глутатиона на пептид или аминокислоту. Точнее ГГТП переносит глутамильный остаток с гамма - L - плюс - глутамил - четыре - нитроанилида на дипептидный акцептор. Дипептидный акцептор - это глицилглицин, одновременно выполняющий функцию буфера. Концентрацию освобожденного четыре - нитроанилина измеряют фотометрически, и после остановки ферментативной реакции - подкислением [Меньшиков, 2009].

Референтные значения ГГТП для мужчин - до 55 Ед/л, для женщин - до 38 Ед/л.

2.2.5 Определение активности билирубина

Принцип метода: под воздействием соляной кислоты разрывается тетрапирроловая связь билирубина, в результате чего образуются два дипиррола, которые диазотируются диазобензосульфоновой кислотой с образованием розово-фиолетового азобилирубина [Камышников, 2011].

Связанный билирубин реагирует быстро, несвязанный билирубин реагирует после добавления кофеинового реактива.

Содержание общего билирубина в сыворотке в норме 6,8 - 20,5 мкмоль/л, а норма прямого билирубина крови - до 4,3 мкмоль/л.

Повышение содержания билирубина. Возрастание уровня билирубина в сыворотке крови до уровня выше 20,5 мкмоль/л называется гипербилирубинемией [Карпищенко, 2001].

2.3 Метод ультразвукового исследования

Обследовано 50 пациентов с заболеваниями печени неинфекционной этиологии. УЗИ проводили на современном ультразвуковом приборе Hawk 2102 XL с использованием линейного датчика с диапазоном частот 6-12 Мгц.

2.4 Статистическая обработка результатов

Для получения правомерного заключения по материалам исследований была проведена статистическая обработка результатов. Математическая обработка данных проводилась с помощью методов вариационной статистики. Определялась средняя арифметическая величина (X) показателей в каждой группе, равная сумме вариантов, деленной на число наблюдений (+m) стандартная ошибка проводилась программой Microsoft office Excel 2007.

3. Отличительная ферментодиагностика больных с поражением печени неинфекционной этиологии

.1      Изменение биохимических показателей при токсическом циррозе

печень цирроз токсический биохимический

У первой экспериментальной группы большинство показателей превышают референтные значения (аспартатаминотрансфераза, аланинаминотрансфераза, общий и конъюгированный билирубин).

Отличились показатели общий белок и ГГТП, так как их значения лишь у немногих пациентов выше нормы, согласно таблице 2 общий белок равен 80,2±10,2 г/л , а ГГТП - 30,5±5,2 Е/л, при референтных значениях соответственно 65 - 85 г/л и 9 - 34 Е/л.

По сравнению со второй и третьей экспериментальными группами показатели аспартатаминотрансфераза, аланинаминотрансфераза, общий и конъюгированный билирубин превышают свои референтные значения.

Таблица 2 - Изменение биохимических показателей при токсическом циррозе

Достоверность общего белка, АСТ, ГГТП, общего и конъюгированного билирубина между контрольной и экспериментальной группой менее 0,01, так же и достоверна разница между экспериментальной и последующей экспериментальной группой, которая менее 0,01. Достоверность различий АЛТ в первой группе между экспериментальной и последующей экспериментальной группой более 0,05, а достоверность между контрольной и экспериментальной группой менее 0,01.

При токсическом циррозе соотношение общего билирубина и конъюгированного билирубина составляет три к одному, что свидетельствует о том, что снижен метаболизм и транспорт билирубина в желчь, и о тяжелой форме желтухе.

В таблице 2 также наглядна специфичность АСТ, в большей степени, и АЛТ. АСТ - 72,3+5,95 Е/л, при норме 7 - 35 Е/л. Это изменение связано с поражением гепатоцитов.

Таким образом, увеличение значений аспартатаминотрансферазы, аланинаминотрансферазы обусловлено поражением гепатоцитов, а изменение показателей общего и конъюгированного билирубина обусловлено снижением метаболизма и транспорта билирубина.

Морфологическое исследование печени у первой группы фиксирует увеличение размеров органа, повышение эхогенности, неровный контур, неоднородность структуры паренхимы печени и отсутствие визуализации печеночных вен мелкого и среднего калибра.

3.2 Изменение биохимических показателей при первичном билиарном циррозе

Биохимические показатели второй экспериментальной группы (пациенты с заболеванием первичным билиарным циррозом) все превышают референтные значения (аспартатаминотрансфераза, аланинаминотрансфераза, гамма-глютамилтранспептидаза, общий и конъюгированный билирубин), кроме общего белка, который ниже нормы.

По сравнению с первой и третьей экспериментальными группами показатели АСТ, АЛТ, гамма-глютамилтранспептидаза, общий и конъюгированный билирубин превышают свои референтные значения; общий белок ниже нормы, так же как и при хроническом лекарственном гепатите, а при токсическом циррозе общий белок в норме.

Таблица 3 - Изменение биохимических показателей при первичном билиарном циррозе

Достоверность ГГТП, общего и конъюгированного билирубина между контрольной и экспериментальной группой менее 0,01, так же и достоверна разница между экспериментальной и последующей экспериментальной группой, которая менее 0,01.

Следует подчеркнуть при токсическом циррозе, первичном билиарном циррозе и при хроническом лекарственном гепатите достоверность гамма-глютамилтранспептидазы, общего и конъюгированного билирубина между контрольной и экспериментальной группами менее 0,01, так же и достоверна разница между экспериментальной и последующей экспериментальной группами, которая менее 0,01.

У второй экспериментальной группы проявляется яркая специфичность ГГТП, согласно таблице 3. ГГТП - 120,1±5,9 при норме 9 - 34 Е/л. Это изменение связано с гибелью гепатоцитов.

В таблице 3 наглядно продемонстрированы показатели при первичном билиарном циррозе, к примеру, общий билирубин составил - 100,3±8,2 мкмоль/л, при норме 6,8 - 20,5 мкмоль/л, что свидетельствует о среднетяжелой форме желтухи.

Таким образом, увеличение значений аспартатаминотрансферазы, аланинаминотрансферазы, гамма-глютамилтранспептидазы обусловлено поражением гепатоцитов, показатели билирубина общего и конъюгированного - наличием желтухи.

Морфологическое исследование печени у второй группы так же, как и первой фиксирует увеличение размеров печени, повышение эхогенности, неровный контур, наблюдается неоднородность структуры паренхимы печени, но сосудистый рисунок претерпевает прогрессивные изменения - ухудшается визуализация ветвей воротной вены в сегментарном и субсегментарном отделах.

3.3    Изменение биохимических показателей при хроническом лекарственном гепатите

По данным обследованиям проведен анализ показателей и выяснилось, что у третьей экпериментальной группы показатели аспартатаминотрансфераза, аланинаминотрансфераза, общий и конъюгированный билирубин превышают свои референтные значения; общий белок ниже нормы, так же как и при первичном билиарном циррозе, в то время как при токсическом циррозе общий белок выше нормы.

При хроническом лекарственном гепатите общий билирубин составил 60,2+7,4 мкмоль/л, о чем свидетельствует о легкой форме желтухи.

Таблица 4 - Изменение биохимических показателей при хроническом лекарственном гепатите

Достоверность АСТ, АЛТ, ГГТП, общего и конъюгированного билирубина между контрольной и экспериментальной группами менее 0,01, так же и достоверна разница между экспериментальной и последующей экспериментальной группами, которая менее 0,01.

У третьей экспериментальной группы, согласно таблице 4, отмечается специфичность АСТ и АЛТ. АСТ - 55,89+6,5 Е/л, АЛТ - 58,2+5,2 при норме соответственно 7 - 35 Е/л и 7 - 45 Е/л. Это изменение связано с поражением гепатоцитов.

Таким образом, увеличение значений аспартатаминотрансферазы, аланинаминотрансферазы обусловлено поражением гепатоцитов, а изменение общего билирубина свидетельствует о легкой форме желтухи.

Третья экспериментальная группа морфологически существенно отличается от двух вышестоящих групп: размер в норме, ровный контур, незначительно повышенная эхогенность и сосудистый рисунок обеднен, ухудшается визуализация мелких переферических ветвей печеночных вен.

3.4    Изменение биохимических и морфологических показателей при заболеваниях печени неинфекционной этиологии

.4.1   Изменение биохимических и морфологических показателей при токсическом циррозе

Эхогенность

При токсическом циррозе по данным исследованиям обнаруживается повышение эхогенности, причем биохимические показатели выше нормы.

АСТ в полтора раза превышает норму, общий билирубин - в девять раз выше нормы, а конъюгированный билирубин - в 15 раз. По АЛТ аналогичного превышения нормы не отмечается. Общий белок и ГГТП в пределах нормы - 80,2+10,2 г/л и 9 - 34 Е/л соответственно. Норма 65-85 г/л. АСТ - 72,3+5,95 Е/л, при норме 7 - 35 Е/л. Это изменение связано с поражением гепатоцитов.

Повышение эхогенности при токсическом циррозе обусловлено изменением формы и строения печени.

Рисунок 1 - Сравнительные данные по значениям эхогенности при токсическом циррозе

Эхоструктура

Рисунок 2 - Сравнительные данные по изменению эхоструктуры при токсическом циррозе

В первой экспериментальной группе с одинаковой частотой встречаются крупно-, смешанноочаговая диффузная неоднородность и наблюдается явление диффузной неоднородности. Превалирует крупноочаговая диффузная неоднородность. Данные эхоструктуры паренхимы печени больных токсическим циррозом не соответствует норме, то есть эхоструктура неоднородна, это связано с поражением и гибелью гепатоцитов. В соотношении морфологической картины печени биохимические показатели превышают норму, так же как и при исследовании эхогенности.

Биохимическая картина свидетельствует о том, что АСТ в полтора раза превышает норму, общий билирубин - в девять раз выше нормы, а конъюгированный билирубин - в 15 раз. По АЛТ аналогичного превышения нормы не отмечается. Общий белок в пределах нормы - 80,2+10,2 г/л. Норма 65-85 г/л. АСТ - 72,3+5,95 Е/л, при норме 7 - 35 Е/л. Это изменение связано с поражением гепатоцитов.