различается у разных видов болезнетворных грибов. Особая группа грибов Dematiaceae, образующих меланин, дает темные колонии с черной обратной стороной.
27.3. Морфологические свойства
Жизненный цикл грибов состоит из двух фаз, или стадий – поло-
вой (репродуктивной) и бесполой (вегетативной). Половая стадия жизненного цикла грибов называется телеоморфой, бесполая – анаморфой. В вегетативной фазе тело гриба (таллом) состоит из похожих клеток, питающихся и размножающихся независимо друг от друга. Существует 2 типа таллома и, соответственно, роста грибов. Таллом может состоять из ветвящихся нитей, составленных из клеток с общей клеточной стенкой. Такие нити называются гифами, а их совокупность – мицелием, или грибницей.
Грибы с талломом, представленным гифами, называются плесневыми, или мицелиальными. Подавляющее большинство грибов являются плесневыми. Другим вариантом роста является почкование. При почковании, как правило, происходит отделение дочерней клетки от материнской, так что дрожжевой вариант таллома является одноклеточным. Грибы, существующие преимущественно в виде почкующихся клеток, называются дрожжевыми, или дрожжами, их тип роста также называется дрожжевым. Те грибы, которые могут менять тип таллома, переходя из дрожжевой формы в плесневую или обратно, называются диморфными.
Гифа имеет параллельные общие стенки и может иметь поперечные перегородки - септы. В септах есть поры, позволяющие перемещение цитоплазмы и органелл. Несептированными (не имеющими перегородок) считаются гифы многих низших грибов (отдел Zygomycota), хотя септы могут образовываться и у них при неблагоприятных условиях. Для низших грибов характерно также неравномерное расположение септ, а все представители отделов Ascomycota и Basidiomycota имеют равномерно септированные гифы.
27.4.Размножение грибов
Врепродуктивной фазе тело гриба имеет более сложное строение
исостоит из дифференцированных клеток, имеет специальные репродуктивные органы. Среди них выделяют структуры переживания, позволяющие переносить неблагоприятные условия, и структуры распространения (споры и несущие их органы). На различиях в этих признаках основана идентификация родов и видов большинства грибов.
402
Грибы размножаются с помощью спор. Споры образуются в результате простого митоза или мейоза. В первом случае тип спорообразования и стадия развития гриба называются бесполыми, а сами бесполые споры – конидиями. Во втором случае тип размножения называется половым, а само имя споры чаще применяется именно к половым спорам. Большинство возбудителей грибковых инфекций в культуре представлено только вегетативной стадией. В связи с этим в идентификации болезнетворных грибов первоочередное значение имеют особенности морфологии органов бесполого размножения (конидиогенеза).
Для многих плесневых грибов характерно наличие особых орга-
нов конидиогенеза: конидиогенных клеток и конидиеносцев, а также характерных комплексов их и самих конидиев – например, в виде метелки у Penicillium, в виде головки у Aspergillus. При образовании одновременно разных типов конидиев (например, у дерматофитов – возбудителей микозов кожи) используют термины «микроконидии» и «макроконидии». Отпочковывающиеся дочерние клетки дрожжевых грибов называют бластоконидиями.
Различают и другие типы бесполого спорообразования. У Zygomycota имеются бесполые споры, не являющиеся конидиями – так называемые спорангиоспоры. Они образуются свободно внутри особой структуры – спорангия. К бесполым органам выживания у многих патогенных грибов относятся хламидоспоры, представленные толстостенными клетками или многоклеточными образованиями. Хламидоспоры позволяют пережить отмирание и разложение вегетативного тела гриба, и при более благоприятных условиях высвобождаются в окружающую среду.
Строение репродуктивных органов при половом размножении определяет принадлежность гриба к одному из отделов царства Fungi. В микробиологической диагностике микозов эти признаки, как правило, не используются.
27.5. Ультраструктура грибов
Клетка грибов имеет характерное для эукариот полноценное, окруженное постоянной мембраной ядро, в котором содержатся несколько хромосом и ядрышко. Органеллы включают пластинчатые митохондрии с линейно расположенными кристами, эндоплазматическую сеть, эукариотические (80S) рибосомы, микросомы и вакуолярный аппарат. Наружные оболочки представлены клеточной мембраной (плазмалеммой) и клеточной стенкой. Плазмалемма содержит большое количество стеринов, преимущественно эргостерина. Эрго-
403
стерин является мишенью для многих современных противогрибковых средств. Цитоскелет представлен актиновыми филаментами и микротрубочками из тубулина.
Клеточная стенка грибов состоит из нескольких слоев. Наружные слои представляют собой аморфную массу, внутренние слои служат прочным корпусом, скелетом, определяющим форму клетки. Наружные слои клеточной стенки содержат водорастворимые вещества, преимущественно гликопротеины и -глюканы. Внутренние слои нерастворимы в воде, содержат хитин (неветвящийся полимер из единиц N-ацетилглюкозамина, связанных -1,4 связями) и -глюканы.
27.6. Физиология грибов
Грибы неспособны к фотосинтезу, неподвижны и имеют толстые клеточные стенки, что лишает их возможности захватывать меньшие микроорганизмы, или активно поглощать питательные вещества. Абсорбция питательных веществ из окружающей среды – это единственный способ, которым грибы удовлетворяют свои пищевые потребности. Для этого грибы должны расти на источнике питательных веществ или внутри него. Широкая сеть гиф обеспечивает многим грибам большую площадь всасывания веществ. Нерастворимые вещества (например, кератин) грибы переваривают снаружи клетки, за счет выделения экзоферментов. Разные грибы отличаются обладают отличными друг от друга ферментными системами, определяющими специфические условия существования. Все грибы – гетеротрофы. Это аэробные организмы, для роста им требуются углерод, азот, минеральные вещества. Витамины отдельные виды синтезируют сами, но некоторым видам их необходимо добавлять в питательную среду.
Грибы предпочитают кислую среду обитания. Они растут в широком диапазоне температур (от 5 до 45 С), но для большинства оптимальная температура роста 20-30 С. Все патогенные виды способны расти при 37(С, а истинные диморфные грибы при этой температуре меняют форму с плесневой на дрожжевую.
404
XXVIII. ВОЗБУДИТЕЛИ ПОВЕРХНОСТНЫХ МИКОЗОВ
Поверхностные микозы поражают кожу, ее придатки и слизистые оболочки. Эти инфекции начинаются на поверхности наружных покровов, а возбудитель не проникает глубже базальной мембраны эпидермиса. Широко распространенными поверхностными микозами являются дерматофитии, разноцветный лишай и поверхностный кандидоз. К редким поверхностным микозам относятся белая и черная пьедра, а также черный лишай (Tinea nigra). Кроме того, очень многие грибы могут быть возбудителями инфекций ногтей – онихомикозов. Дерматофитии, разноцветный лишай и пьедра контагиозны.
28.1. Дерматофиты
Дерматофиты – грибы из родов Trichophyton, Microsporum и Epidermophyton – являются возбудителями дерматофитий. Этими инфекциями, по разным данным, поражено от одной трети до половины населения земного шара. Из 40 с лишним известных видов дерматофитов в нашей стране наиболее часто встречаются три – Trichophyton rubrum, Trichophyton mentagrophytes var. interdigitale и Microsporum canis.
Экология и эпидемиология. Дерматофитии распространены повсеместно. По среде обитания и источнику инфекции все дерматофиты делятся на три группы: антропофильные (например, T. rubrum и T. mentagrophytes var. interdigitale), зоофильные (например, M. canis,
T. verrucosum) и геофильные (например, M. gypseum). Источником вызываемых ими инфекций является, соответственно, человек или больное животное или почва. Предполагается, что предки всех дерматофитов обитали в почве. Дерматофиты устойчивы к действию факторов окружающей среды. В частности, их споры в высушенном состоянии сохраняют способность к прорастанию в течение многих месяцев.
Морфология и физиология. Мицелий дерматофитов светлый, равномерно септирован и, как правило, однороден. Для части видов характерны особые разновидности мицелия, используемые в идентификации и нередко позволяющие определить вид. К таковым относят: спиральные гифы, типичные для T. mentagrophytes; гифы, ветвящиеся наподобие оленьих рогов, типичные для T. shoenleinii; гребешковые (с боковыми выростами) гифы; ракетковидные (утолщенные на одном конце и напоминающие теннисную ракетку) гифы, характерные для
Microsporum spp.
405
Бесполые споры дерматофитов представлены одноклеточными микроконидиями и многоклеточными макроконидиями. Кроме того, у многих видов встречаются хламидоспоры и артроспоры (фрагменты мицелия).
Для большинства дерматофитов характерна средняя скорость роста (при оценке на чистой среде Сабуро – колонии диаметром 10–30 мм за 7–14 дней). Для медленно растущих дерматофитов характерны колонии гладкие или кожистые, для прочих дерматофитов – пушистые и шерстистые (большинство) или, при обильном образовании конидий, порошковатые (T. mentagrophytes). Как правило, дерматофиты имеют белые или светлые колонии, а при наличии пигмента цвет колонии и обратной ее стороны относится к гамме теплых цветов.
Часть дерматофитов (T. rubrum, T. violaceum, T. megninii) имеет тем-
но-красный или бордовый цвет колонии или обратной ее стороны. Факторы патогенности. Отличительным свойством патогенных
для человека дерматофитов является кератинофилия – способность разрушать и утилизировать кератин. Для этого дерматофиты используют особые ферменты – кератиназы. Антропофильные виды способны перерабатывать только человеческий кератин, а зоофильные – и разных животных. Используя направленный рост гиф и кератиназы, грибы прорастают в роговой слой эпидермиса, роговые структуры волос и ногтей.
Антигенные свойства. Дерматофитии, вызванные зоофильными видами, сопровождаются более выраженными воспалительными реакциями. Среди инфекций, обусловленных антропофильными видами
(T. mentagrophytes var. interdigitale), характерны аллергические ком-
поненты (трихофитиды). Наиболее частый возбудитель дерматофитий T. rubrum, по-видимому, обладает меньшими антигенными свойствами и поэтому вызывает инфекции хронического течения со слабо выраженными воспалительными явлениями. Для оценки сенсибилизации макроорганизма к антигенам распространенных дерматофитов используются внутрикожные пробы с трихофитином.
Иммунитет. Защитные факторы макроорганизма, среди которых основными считают ненасыщенный трансферрин плазмы, комплемент, опсонизирующие антитела и фагоцитоз нейтрофилами, препятствуют вовлечению глубоких тканей. Поэтому дерматофиты, за редкими исключениями, никогда не проникают далее базальной мембраны эпидермиса.
Лабораторная диагностика. Патологический материал: чешуйки кожи, волосы, фрагменты ногтевой пластинки, перед микроскопированием подвергают «просветлению», т.е. обработке раствором щелочи. Это позволяет растворить роговые структуры и оставить в поле зрения только массы гриба. Диагноз подтверждается, если в препара-
406
те видны нити мицелия или цепочки артроконидий. В лабораторной диагностике дерматофитии волосистой части головы учитывают также расположение элементов гриба относительно стержня волоса. Если споры расположены снаружи (характерно для видов Microsporum), такой тип поражения называется эктотрикс, а если внутри – то эндотрикс (характерно для видов Trichophyton). Окончательная идентификация дерматофитов проводится по морфологическим особенностям. При необходимости проводятся дополнительные тесты (уреазная активность, образование пигмента на специальных средах, потребность в питательных добавках и др.). Для быстрой диагностики микроспории используется также люминесцентная лампа Вуда, в лучах которой элементы гриба в очагах микроспории дают светло-зеленое свечение.
Лечение и профилактика. Специфическая профилактика, как правило, не проводится. Для предотвращения заболевания при посещении бассейнов, спортивных залов, бань, возможно использование местных противогрибковых средств в виде присыпок или аэрозолей. Для лечения дерматофитий используются как системные антимикотики (производные аллиламинов – тербинафин, триазолов – итраконазол и флуконазол, имидазолов – кетоконазол, а также гризеофульвин), так и местные: более 20 различных препаратов из производных перечисленных групп.
28.2. Возбудители разноцветного лишая и других поверхностных микозов
Разноцветный лишай поражает до 10% населения в областях с умеренным климатом, встречаясь значительно чаще в жарких странах. Возбудителем инфекции является дрожжевой гриб из отдела
Basidiomycota – Malassezia furfur (син. Pityrosporum orbiculare). Это липофильный гриб, заселяющий кожу преимущественно на участках, богатых кожным салом. Для культивирования M. furfur также используется оливковое масло, помещенное на поверхности среды Сабуро. M. furfur поражает самые верхние части эпидермиса, как правило не вызывая воспалительной реакции. При микроскопии патологического материала видны скопления почкующихся клеток и короткие гифы. Под лампой Вуда очаги разноцветного лишая дают желтое свечение.
Белая и черная пьедра – это тропические инфекции волосистой части головы, которые не встречаются в нашей стране. Возбудителем трихоспороноза или белой пьедры являются разные виды рода Trichosporon. Это дрожжевые грибы из отдела Basidiomycota. При белой пьедре образуются светлые или коричневатые узелки на стержне волоса, отчего последние часто обламываются. Отличительной особенностью Trichosporon spp. является образование артроконидий
407