по форме:
• правильная — энтеробактерии, псевдомонады;
• неправильная — коринебактерии;
• размеру.
• мелкие — бруцеллы, бордетеллы;
• средние — бактероиды, кишечная палочка; .
• крупные — бациллы, клостридии;
форме концов:
• обрубленные — бациллы;
• закругленные — сальмонеллы, псевдомонады;
• заостренные — фузобактерии;
• утолщенные — коринебактерии;
расположенные поодиночке;
диплобактерии и диплобациллы — сцепленные попарно;
• стрептобактерии и стрептобациллы — сцепленные в цепочку;
• извитые формы.
Ряд Гисса: лактоза, глюкоза, манит, мальтоза и сахароза. Эти углеводы расщепляются бактериями.
38) МЕТОДЫ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ АНАЭРОБОВ
Для культивирования анаэробных микроорганизмов необходимо создание бескислородных условий, достигаемое различными методами.
Физические методы основаны на создании вакуума в специальных аппаратах — анаэростатах. Иногда воздух в них заменяют каким-либо другим газом, например СО2.
Химические методы заключаются в том, что при культивировании исследуемого материала на плотных средах в эксикатор помещают химические вещества, например пирогаллол и щелочь, реакция между которыми идет с поглощением кислорода.
Биологический метод основан на одновременном культивировании аэробов и анаэробов на плотных питательных средах в чашках Петри, герметически закупоренных.
Рост изолированных колоний анаэробов можно получить при рассеве исследуемого материала по поверхности кровяно-сахарного агара, разлитого в чашки Петри. После посева чашки помещают в анаэростат. Исследуемый материал в убывающей концентрации можно засевать в высокий столбик агара.
39) ОПРЕДЕЛЕНИЕ ПОДВИЖНОСТИ БАКТЕРИЙ ПО ПЕШКОВУ
Пешкова среда - дифференциально-диагностическая полужидкая питательная среда для определения у микроорганизмов подвижности и способности сбраживать глюкозу; содержит агар, глюкозу и индикатор бромтимоловый синий.
Среда Пешкова: мазок фиксируют, окрашивают метиленовой синью с подогревом, смывают водой, докрашивают р-ром нейтрального Красного 10 сек, смывают водой, высушивают фильтровальной бумагой. Споры синие, кл — красная.
40)КАК У БАКТЕРИЙ ОПРЕДЕЛЯЮТ СПОСОБНОСТЬ ВЫДЕЛЯТЬ ИНДОЛ
Индол — ароматическое соединение — выделяют гнилостные бактерии. При добавлении к колонии, которая выделяет индол, щавелевой кислоты колония приобретает розовый цвет, а про добавлении лакмуса — синий (индикатор на кислоту).
41)КАК У БАКТЕРИЙ ОПРЕДЕЛЯЮТ СПОСОБНОСТЬ ВЫДЕЛЯТЬ СЕРОВОДОРОД
Колонии, выделяющие сероводород, имеют характерный запах и черный цвет.
42) СОСТАВ СРЕДЫ ЭНДО
Эндо среда (S. Endo) — дифференциально-диагностическая среда для выделения и идентификации кишечных бактерий при бактериологических исследованиях пищевых продуктов, сточных вод и пр.
Состав среды Эндо: пептона — 1%, лактозы — 1 %, двузамещенного фосфорнокислого калия (К2НРO4) — 0,35%, агар-агара — 1,5%.Свежеприготовленная среда бесцветна или имеет бледно-розовую окраску. При росте лактозоположительных бактерий их колонии окрашиваются в темно-красный цвет с металлическим блеском; лактозоотрицательные кишечные палочки образуют бесцветные колонии.
43.КАК ИЗУЧАЮТ РАЗВЕРНУТЫЕ БИОХИМИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА БАКТЕРИЙ
По характеру связи с цитоплазменными структурами и по месту проявления своего действия ферменты делятся на внутри - и внеклеточные. Каждый вид микроорганизмов продуцирует постоянный для него набор ферментов, одни из которых расщепляют в разной степени белки и углеводы, а другие вызывают окисление и восстановление различных субстратов. Стабильность ферментативных систем бактерий позволяет использовать биохимические свойства бактерий в сочетании с их морфологическими, культуральным и и другими постоянными признаками для определения видов и типов бактерий.
Для обнаружения ферментов исследуемую культуру микробов засевают на специальные дифференциально-диагностические питательные среды.
Сахаролитические ферменты микробов. Для обнаружения сахаролитических ферментов исследуемую культуру бактерий засевают в питательные среды Гисса, называемые также «пестрым» рядом. «Пестрый» ряд Гисса содержит обычно 5 пробирок: с глюкозой, лактозой, маннитом, мальтозой и сахарозой.
При некоторых исследованиях для более углубленного изучения биохимических свойств выделенного микроба ряд Гисса дополняют дульцитом, сорбитом, ксилозой, арабинозой и некоторыми другими сахарами. Название «пестрый» ряд обусловлено тем, что под действием ферментов микроба одни углеводы остаются неизменными и, следовательно, цвет питательной среды не меняется, в то время как другие сахара расщепляются, образуя кислые продукты распада, которые изменяют цвет индикатора и соответственно цвет питательной среды.
Мясопептонный бульон (МПБ)(для культивирования гетеротрофных микроорганизмов.).К мясной воде прибавляют 1% пептона и 0,5% х. ч. натрия хлорида, кипятят на слабом огне 10—15 мин для растворения веществ, устанавливают нужный рН и снова кипятят 30—40 мин до выпадения осадка. Фильтруют, доливают до первоначальною объема водой и стерилизуют 20 мин при 120°С.
Мясопептонный агар (МПА)( основная плотная питательная среда, используемая для выращивания хемоорганотрофных бактерий.). К готовому бульону (до стерилизации или после нее) добавляют 2—3% измельченного агар-агара и кипятят, помешивая, на слабом огне до; полного расплавления агара. МПА можно варить в автоклаве или аппарате Коха. Готовую среду, если нужно, осветляют, фильтруют и стерилизуют 20 мин при 120°С. Полужидкий агар содержит 0,4—0,5% агар-агара.
Из существующих способов выделения чистых культур наибольшее признание получил классический метод Коха. Он заключается в том, что посевной материал наносят на поверхность плотной питательной среды в чашке Петри. Клетки микроорганизмов прикрепляются к определенному участку поверхности и при размножении образуют видимые глазом скопления-колонии. Из отдельных изолированных колоний микробов проводят пересев на жидкую питательную среду и через определенный промежуток времени (характерный для каждого вида микроорганизмов) получают чистую культуру в достаточном объеме. О чистоте выделенной культуры судят по однородности получаемых колоний.
Актиномицеты (myces - гриб, actis - луч) относят к группе грамположительных неспорообразующих бактерий неправильной формы. К этой же группе относят нокардиоформные актиномицеты (нокардии). Отдельные виды рода Actinomyces (A. israelii, A. naeslundii, A. bovis и др.) являются представителями нормальной микрофлоры организма человека или животных, которые в определенных условиях вызывают актиномикозы.
Морфология и физиология
Тонкие прямые или слегка изогнутые палочки и нити с настоящим ветвлением. Короткие палочки часто с булавовидными концами, напоминающие коринебактерии. Типичны разветвленные палочки с ветвящимися нитями на концах. Грамположительные, неподвижные, неспорообразующие, некислотоустойчивые. Конидий не образуют в отличие от грибов. Факультативные анаэробы, нуждаются в дополнительном снабжении СО2 Хемоорганотрофы с бродильным типом метаболизма. При сбраживании углеводов образуют кислоту. На плотных средах через 24 ч формируют характерные для отдельных видов микроколонии, а через 7-14 дней - макроколонии. Ферментируют глюкозу с образованием кислоты, обладают слабой протеолитической активностью.
Колонии грибков (друзы) в большинстве случаев обнаруживаются в гное в виде характерных крупинок.
Мицелий мукоровых пронизывает субстрат (почву, растительные остатки, а также многие продукты питанияхлеб, овощи ит. д.), который покрывается сероватым налетом воздушного мицелия – серая плесень. В некоторых случаях мицелий распадается на отдельные клетки, которые затем размножаются почкованием (мукоровые дрожжи – Mucor racemosus).
Аспергилловые: Мицелий гриба очень сильный, с характерными для высших грибов перегородками. Аспергиллы распространяются спорами, образующимися бесполым путем, что характерно для всего класса вообще. В то же время Aspergillus fumigatus может[2] размножаться половым путём. «Аспергилл» впервые был каталогизирован в 1729 году итальянским священником и биологом Пьером Антонио Микели Вид гриба под микроскопом напомнил Микели форму кропила (англ.) для святой воды (Aspergillum, от лат. spargere — разбрызгивать), и он дал роду соответствующее название.[3] Сегодня название «аспергилл» также относят к бесполым спороформирующим структурам, схожим со всеми Аспергиллами. Уже известно, что около одной трети всех видов имеют и половую фазу развития.[1]
Пеницилл: Вегетативный мицелий пеницилла ветвящийся, прозрачный и состоит из множества клеток. Отличие пеницилла от мукора в том, что его грибница многоклеточная, тогда как у мукора — одноклеточная. Гифы гриба пеницилла либо погружены в субстрат, либо расположены на его поверхности. От гифов отходят прямостоячие или приподнимающиеся конидиеносцы. Эти образования ветвятся в верхнем отделе и формируют кисточки, несущие цепочки одноклеточных окрашенных спор — конидий. Кисточки пеницилла могут быть нескольких видов: одноярусные, двухярусные, трехярусные и несимметричные. У некоторых видов пеницилла конидийконидии образуют пучки — коремии. Размножение пеницилла происходит с помощью спор.
Дрожжи и дрожжеподобные грибы представлены отдельными овальными клетками, морфологически сходными между собой, что делает невозможной их дифференцировку между собой с помощью микроскопии, дрожжи размножаются только почкованием, а дрожжеподобные грибы обычно размножаются почкованием, но иногда образуют псевдомицелий. Почкованию предшествуют лизис участка клеточной стенки и выпячивание фрагмента цитоплазмы. Затем в ядре материнской клетки происходит митоз, и образовавшееся новое ядро переносится в отпочковывающийся фрагмент цитоплазмы. В последующем между материнской клеткой и почкой образуется перегородка, восстанавливающая целостность клеточных стенок и изолирующая дочерние клетки — бластоконидии, или бластоспоры (рис. 2-8). На питательных средах дрожжи и дрожжеподобные грибы образуют блестящие, выпуклые колонии, напоминающие колонии бактерий.
49 ЧТО ТАКОЕ СТЕРИЛИЗАЦИЯ И ДЕЗИНФЕКЦИЯ
Стерилиза́ция — освобождение какого-либо предмета или материала от всех видов микроорганизмов (включая бактерии и ихспоры, грибы, вирусы и прионы), либо их уничтожение. Осуществляется термическим, химическим, радиационным, фильтрационным методами.
Дезинфекция — уничтожение патогенных микробов в окружающей человека среде. Методы и способы дезинфекции. различны, но они преследуют цели уничтожения не всех микроорганизмов, а только патогенных. Уничтожение возбудителей инфекционных заболеваний в переносчиках называют дезинсекцией, а в организме грызунов — источников инфекции дератизацией.
50)МЕТОДЫ СТЕРИЛИЗАЦИИ
Термическая: паровая и воздушная (сухожаровая)
Химическая: газовая или химическими растворами (стерилянтами)
Плазменная (плазмой перекиси водорода)
Радиационная стерилизация — применяется в промышленном варианте
Метод мембранных фильтров — применяется для получения небольшого количества стерильных растворов, качество которых может резко ухудшиться при действии других методов стерилизации(бактериофаг, селективные питательные среды, антибиотики).
51)МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ КАЧЕСТВА СТЕРИЛИЗАЦИИ
Физические методы контроля осуществляются с помощью средств измерения температуры (термометры, термопары), давления (манометры, мановакуумметры) и времени (таймеры). Современные стерилизаторы оснащены также записывающими устройствами, фиксирующими отдельные параметры каждого цикла стерилизации.
Химические. В течение десятков лет для проведения химического контроля применялись химические вещества, изменяющие свое агрегатное состояние или цвет при температуре, близкой к температуре стерилизации (бензойная кислота для контроля паровой стерилизации, сахароза, гидрохинон и ряд других веществ - для контроля воздушной стерилизации). При изменении цвета и расплавлении указанных веществ результат стерилизации признавался удовлетворительным.
Биологический метод: предназначается для контроля эффективности стерилизационного оборудования. для проведения бактериологического контроля используются биотесты, имеющие дозированное количество спор тест-культуры. Контроль эффективности стерилизации с помощью биотестов рекомендуется проводить 1 раз в 2 недели.
53.)ЧТО ТАКОЕ БИОПЛЕНКА,ЕЁ СТРУКТУРА И СВОЙСТВА
Биопленка.
Биопленка — это конгломерат колоний микроорганизмов, которые погружены во внеклеточный матрикс и прикреплены к поверхности. Микроколонии занимают примерно 15% от общей массы биопленки.
Свойства:
- Взаимодействующая общность разных типов микроорганизмов
- Микроорганизмы собраны в микроколонии
- Микроколонии окружены защитным матриксом
- Внутри микроколоний — различная среда
- Микроорганизмы имеют примитивную систему связи
- Микроорганизмы в биопленке устойчивы к антибиотикам, антимикробным средствам и реакции организма хозяина
54).ДЛЯ КАКИХ ЦЕЛЕЙ ИССЛЕДУЕТСЯ МИКРОФЛОРА ПАЛЬЦЕВ И ЗЕВА
Целью работы было активное выявление больных хроническим тонзиллитом, изучение микробных ассоциаций слизистой зева и санация с учетом характера и чувствительности микрофлоры к антибиотикам.
Для исследования брали материал со слизистой зева тампоном, посев делали на кровяной, желточно-солевой агар и среду Сабуро. Идентификацию стафилококков, стрептококков и грибов рода кандида проводили по стандартным методокам. Вид гриба кандида определяли по методикам П. Н. Кашкина (1962) и Н. П. Блинова (1964). Для определения чувствительности стафилококков к антибиотикам ис пользовали метод диффузии в агар.