Материал: Методы исследования в медицинской бактериологии
|
|
56 |
Таблица 7 – Критерии оценки воздуха жилых помещений |
||
|
|
|
Оценка воздуха |
Общее количество бактерий в |
Количество стрептококков в 1 |
|
1 м3 |
м3 |
Лето: |
|
|
чистый |
до 1500 |
до 16 |
загрязненный |
до 2500 |
до 36 |
Зима: |
|
|
чистый |
до 4500 |
до 36 |
загрязненный |
до 7000 |
до 124 |
Исследование воздуха на наличие микроорганизмов осуществляют седиментационным или фильтрационным методами.
Седиментационный метод Коха предусматривает использование чашек Петри с питательной средой. Открытую чашку помещают на горизонтальную поверхность на уровне стола на определенное время. Затем чашку закрывают и инкубируют в термостате. Ориентировочно по количеству выросших колоний судят о чистоте воздуха. Воздух оценивается чистым при количестве колоний менее 250, средне загрязненный – при количестве 250-500 колоний и загрязненный – при числе колоний более 500. Для выявления стафилококков используют желточно-солевой агар (ЖСА), стрептококков – кровяной агар (КА), грибов – среду Сабуро.
С помощью седиментационного метода Коха можно определить количество микроорганизмов в 1 м3 воздуха. Для этого используют перерасчет по формуле В.Л. Омелянского, с учетом того, что за 5 минут на площади 100 см2 оседает такое количество бактерий, которое находитсяФормулав 10 воздухаОмелянского:
Ах 100 х 100
Х= ————————
75 см2
Х – количество микроорганизмовколичество1 м воздуха; |
3 |
; |
|||
|
|
Х - |
3икробов в 1 м |
||
А – количество колоний наколичествоагаре чашке Петри; |
|
|
|||
|
|
А - |
колоний на агаре в чашке |
||
75 см |
2 |
Петри. |
|
|
|
|
– площадь стандартной чашки Петри; |
|
|
||
100 – коэффициенты перевода на 100 см2 поверхности и 1 м3 объема.
Аспирационный метод основан на принудительном осаждении микроорганизмов на поверхности плотной питательной среды или в улавливающей жидкости. С этой целью используют аппарат Кротова, бактериоуловитель Речменского, прибор ПОВ-1 и другие приборы-аспираторы.
Принцип работы аппарата Кротова для бактериологического исследования воздуха и его аналога пробоотборника бактериологического Тайфун-Р40 (М) (рисунок 46) основан на просасывании воздуха через клиновидную щель в крышке аппарата. Микроорганизмы, находящиеся в воздухе, попадают внутрь камеры и прилипают к плотной питательной среде в открытой чашке Петри, находящейся под крышкой аппарата.
Тайфун-Р40 (М), аналог Кротова
прибора
57
а б Рисунок 46 – Аппарат Кротова (а) и пробоотборник Тайфун-Р40М (б). Заимствовано
из Интернет-ресурсов.
Аппарат Кротова позволяет контролировать объем отбираемой пробы. Обычно отбор проб производят со скоростью 20-25 л/мин в течение 5 минут. После отбора воздуха чашки закрывают крышкой и помещают в термостат.
В некоторых приборах отбираемый воздух фильтруют через жидкость
(рисунок 47). По окончании отбора воздуха с использованием таких приборов производятФильтрацияпосев жидкостивоздухана плотнуючерезпитат льную среду. В этом случае можно
применять элективные питательные среды и проводить специальные жидкость (прибор бактериологические исследования. Дьяконова)
1- трубка для поступления воздуха.
2– трубка, выводящая воздух
Рисунок 47 – Фильтрация воздуха через жидкость (прибор Дьяконова): 1 – трубка для поступления воздуха; 2 – трубка, выводящая воздух. Заимствовано из Интернетресурсов.
Современные пробоотборники воздуха (Bio Sas Super, Mas 100 и др.) отличаются компактностью, дизайном, удобством в работе и другими преимуществами (рисунок 48).
58
а б в
Рисунок 48 – Пробоотборники воздуха: а - Bio Sas Super, б - Mas 100, в – Sampl Air Lite. Заимствовано из Интернет-ресурсов.
Для помещений разного функционального предназначения установлены определенные требования к уровням бактериальной обсемененности воздуха. В частности, СанПиН 2.1.3.1375-03 регламентирует уровни бактериальной обсемененности воздуха лечебных учреждений в зависимости от их функционального назначения и класса чистоты (таблица 8).
Таблица 8 – Допустимые уровни бактериальной обсемененности воздушной среды помещений лечебных учреждений в зависимости от их функционального
назначения и класса чистоты
№№ |
Класс |
Название |
Санитарно-микробиологические показатели |
|||||
пп |
чистоты |
помещения |
Общее |
Количество |
Количество |
|||
|
|
|
количество |
колоний S. aureus |
плесневых и |
|||
|
|
|
микроорганизмов |
в 1 м3 воздуха |
дрожжевых |
|||
|
|
|
в 1 м3 воздуха |
(КОЕ/м3) |
грибов в 1 дм3 |
|||
|
|
|
(КОЕ/м3) |
|
|
воздуха |
||
|
|
|
до |
во |
до |
во |
до |
во |
|
|
|
начала |
время |
начала |
время |
начала |
время |
|
|
|
работы |
работы |
работы |
работы |
работы |
работы |
1. |
Особо |
Операционные, |
Не |
Не |
Не |
Не |
Не |
Не |
|
чистые |
родильные залы, |
более |
более |
должно |
должно |
должно |
должно |
|
(А) |
асептические боксы |
200 |
500 |
быть |
быть |
быть |
быть |
|
|
для гематологичес- |
|
|
|
|
|
|
|
|
ких, ожоговых |
|
|
|
|
|
|
|
|
пациентов, палаты |
|
|
|
|
|
|
|
|
для недоношенных |
|
|
|
|
|
|
|
|
детей, асептический |
|
|
|
|
|
|
|
|
блок аптек, стери- |
|
|
|
|
|
|
|
|
лизационная |
|
|
|
|
|
|
|
|
(чистая половина), |
|
|
|
|
|
|
|
|
боксы бактерио- |
|
|
|
|
|
|
|
|
логических |
|
|
|
|
|
|
|
|
лабораторий |
|
|
|
|
|
|
2. |
Чистые |
Процедурные, |
Не |
Не |
Не |
Не |
Не |
Не |
|
(Б) |
перевязочные, |
более |
более |
должно |
должно |
должно |
должно |
|
|
предоперационные, |
500 |
750 |
быть |
быть |
быть |
быть |
|
|
палаты и залы |
|
|
|
|
|
|
59
|
|
реанимации, |
|
|
|
|
|
|
|
|
детские палаты, |
|
|
|
|
|
|
|
|
комнаты сбора и |
|
|
|
|
|
|
|
|
пастеризации |
|
|
|
|
|
|
|
|
грудного молока, |
|
|
|
|
|
|
|
|
ассистентские и |
|
|
|
|
|
|
|
|
фасовочные аптек, |
|
|
|
|
|
|
|
|
помещения |
|
|
|
|
|
|
|
|
бактериологических |
|
|
|
|
|
|
|
|
и клинических |
|
|
|
|
|
|
|
|
лабораторий, |
|
|
|
|
|
|
|
|
предназначенные |
|
|
|
|
|
|
|
|
для проведения |
|
|
|
|
|
|
|
|
исследований |
|
|
|
|
|
|
3. |
Условно |
Палаты хирургичес- |
Не |
Не |
Не |
Не |
Не |
Не |
|
чистые |
ких отделений, |
более |
более |
должно |
более 2 |
должно |
должно |
|
(В) |
коридоры, |
750 |
1000 |
быть |
|
быть |
быть |
|
|
примыкающие к |
|
|
|
|
|
|
|
|
операционным, |
|
|
|
|
|
|
|
|
родильным залам, |
|
|
|
|
|
|
|
|
смотровые, боксы и |
|
|
|
|
|
|
|
|
палаты инфекции- |
|
|
|
|
|
|
|
|
онных отделений, |
|
|
|
|
|
|
|
|
ординаторские, |
|
|
|
|
|
|
|
|
материальные, |
|
|
|
|
|
|
|
|
кладовые чистого |
|
|
|
|
|
|
|
|
белья |
|
|
|
|
|
|
4. |
Грязные |
Коридоры и |
Не нормируется |
Не нормируется |
Не нормируется |
|||
|
(Г) |
помещения |
|
|
|
|
|
|
|
|
административных |
|
|
|
|
|
|
|
|
зданий, лестничные |
|
|
|
|
|
|
|
|
марши лечебно- |
|
|
|
|
|
|
|
|
диагностических |
|
|
|
|
|
|
|
|
корпусов, санитар- |
|
|
|
|
|
|
|
|
ные комнаты, |
|
|
|
|
|
|
|
|
туалеты, комнаты |
|
|
|
|
|
|
|
|
для грязного белья |
|
|
|
|
|
|
|
|
и временного |
|
|
|
|
|
|
|
|
хранения отходов |
|
|
|
|
|
|
Обеззараживание воздуха закрытых помещений проводят разными способами, в том числе с использованием газов, аэрозолей или УФЛаэроионизаторов.
60
5. Классические методы выделения и идентификации бактерий
5.1. Бактериоскопическое исследование
5.1.1. Оборудование рабочего места для микроскопирования
Рабочее место для микроскопирования должно быть оснащено всем необходимым для приготовления препаратов живых или фиксированных микробов, проведения непосредственно микроскопии и предотвращения контаминации изучаемыми микробами окружающей среды. Микроскоп должен располагаться на рабочем столе, устойчивом к сотрясению. Его покрывают материалом (стекло, пластик), стойким к дезинфектантам. Рабочее место должно иметь хорошее искусственное освещение. К работе приступают лишь после проверки полной готовности рабочего места (рисунок 49).
Рисунок 49 – Оборудование рабочего места для микроскопирования. Заимствовано из Интернет-ресурсов.
Для приготовления препарата для микроскопирования на рабочем столе кроме микроскопа должны находиться следующие принадлежности и материалы: штатив, горелка (спиртовка), спички, предметные и покровные стекла в склянке со спиртом, бактериологическая петля, бактериологическая игла, дезраствор, вата, салфетки, бутыль с сифоном и с дистиллированной водой для промывания препаратов, мостик, чашка для окраски препаратов и сбора мусора (кристаллизатор), кювет с ковриком, склянки с красителями и фиксирующими жидкостями, карандаши и другие необходимые материалы. Принадлежности рабочего места для приготовления препаратов для микроскопических исследований представлены на рисунках 50-53.