Занятие 31 Тема: «Патогенные спирохеты. Патогенные простейшие»
ОБЩАЯ ХАРАКТ СПИРОХЕТ Спирохеты отличаются от бак и грибов строением в виде штопорообразной извитой формы. Размеры их колеблются в больших пределах (ширина 0,3 - 1,5 мкм и длина 7 - 500 мкм).
Спирохеты – тонкие одноклет изогнутые или спиральные палочки с рядом отличительных ультраструктурных особенностей, испол в дифференцировании родов. Цитоплазма окружена цитоплазматической мембраной, пептидогликановый слой обеспечивает ригидность кл и ее форму. Нуклеоид спирохет не отделен от цитоплазмы ядер мембраной. При электронной микроскопии обнаруживается нежная цитоплазматич мембрана, в кот заключ цитоплазма. У спирохет нет клет стенки, характерной для бакт, но при электронной микроскопии выявл, что они имеют тонкую клет стенку (перипласт), кот прилагает к цитоплазме. Спирохеты не образуют спор и капсул. По Романовскому - Гимзе 1 виды окрашиваются в синий, др - в сине-фиолет, 3и - в розовый цвет. Хорошим методом обработки спирохет явл серебрение. Тинкториальные св-ва испол для дифференциации сапрофитов и патогенных спирохет.
Представит патогенных спирохет относятся к 2-м семейст – Spirochaetaceae и Leptospiraceae. Возбуд болезней у чела явл представители родов Borrelia и Treponema, входящие в 1ое семейство. Семейство Leptospiraceae вкл род Leptospira, кот также содержит патогенных представителей.
Сифилис: Порядок Spirochaetales Сем: Spirochaetaceae Род: Тreponema Вид: Тreponema pallidum
Морфология: спиралевидные бактерии размером 6-14х0,2-0,3 мкм, число первичных завитков от 8 до 12, распол на равном расстоянии друг от друга; от концов кл отходят 3 периплазматических жгутика. Спор и капсул -, но в орг экспериментальных животных могут синтезир мукополисахаридной природы капсулоподоб чехол. При неблагопр условиях могут превращаться в цисты, зернистые и кистоподобные сферические тела.
Тинкториальные св-ва: плохо окраш анилиновыми красителями, грам-, по Романовскому-Гимзе – в слабо-розовый цвет (pallidum – бледная), осущ метод серебрения по Морозову и негативное контраститрование по Бурри, наиболее эффективное изучение в темнопольном или или фазовоконтрастном микроскопе.
Резистентность: чувствит к воздейст ф-ров внеш среды, УФЛ, высушиванию, высок Т (при 40°C в теч 1 ч теряют патоген св-ва, при 48°C погибают через 10 мин); дез. Р-ры в рабочих концентрациях оказ губит действ; выдержив низк Т (на холоде сохр до 50 сут, при замораживании до 1 г), в цельной крови и сыворотке при 4°C остаются жизнеспособными в течение 24 ч; чувствит к солям тяжелых мет и а/б (пенициллин, эритромицин, карбенициллн). Вне орг бледная трепонема хорошо сохр при низк Т и во влажн среде.
Строгий антропоноз. Ист инфекции – больные Пути передачи: контактно-половой, контактно-бытовой, трансплацентарный, гематогенный Входные ворота: слиз урогенитального тракта, ануса, рта, и др.
Периоды сифилиса Течение сифилиса – длит волнообразное, с чередованием периодов активного и скрытого проявл болезни. В развитии сифилиса выделяют периоды, различающиеся набором сифилидов - различных форм кожных высыпаний и эрозий, появл в ответ на внедрение в организм бледных спирохет.
· Инкубац период Начинается с момента заражения, длится в среднем 3-4 нед. Бледные спирохеты распр по лимфат и кровенос путям по всему орг, размножаются, но клинич симптомы не проявл. Больной сифилисом не подозревает о своей болезни, хотя он уже заразен. Инкубац период может укорачиваться (до нескол д) и удлиняться (до нескол мес). Удлинен происход при приеме лп, кот несколько инактивируют возбуд сифилиса.
· Первичный сифилис Длится 6-8 нед, характеризуется появлением на месте проникновения бледных спирохет первичной сифиломы или твёрдого шанкра и последующим увеличением близлежащих лимфатических узлов.
· Вторичный сифилис Может продолж от 2 до 5 лет. Происходит поражение внутр органов, тк и сис-м орг, появл генерализованных высыпаний на слиз оболоч и коже, облысение. Эта стадия сифилиса протекает волнообразно, периоды активных проявл сменяются периодами отсут симптомов. Различают вторичный свежий, вторичный рецидивный и скрытый сифилис.
Скрытый (латентный) сифилис не имеет кожных проявл заб, признаков специф поражения внутр органов и нервной системы, определяется только лаб анализами (положительные серологические реакции).
· Третичный сифилис Встреч сейчас редко, возникает при отсут лечения спустя годы после поражения. Характ необратимыми нарушениями внутр органов и систем, особенно цнс. Явл наиб тяжёлым периодом сифилиса, приводящим к инвалидности и к летал исходу. Обнаружив появлен на коже и слиз бугорков и узлов (гумм), кот, распадаясь, обезображивают больного. Подразделяют на сифилис нс – нейросифилис и висцеральный сифилис, при кот повреждены внутр органы (голов и спин мозг, сердце, лёгкие, желудок, печень, почки).
Иммунитет. Защитный иммунитет после перенес инфекции не формируется. В ответ на антигены возбуд в орг образуются антитела, кот явл свидетелями инфекц процесса, также развивается ГЗТ. 1ми образуются неспецифич антитела на липоидный антиген возбуд, их титр по мере исчезновения трепонем из орг падает. Антитела к специфич антигену появл позже и циркулируют в орг длительно независимо от наличия трепонем.
Микробиолог диаг. Испол бактериоскоп и серологич методы (в зависимости от стадии заб), а также ПЦР. Бактериоскопич исслед проводят при первичном сифилисе и в период высыпаний при вторичном сифилисе. Материал для исслед служат отделяемое тверд шанкра, пунктаты лимф узлов, материал из кожн высыпаний.
Серологич исслед проводится комплексом серологич р-ций, среди кот различают отборочные неспецифич тесты с кардиолипиновым антигеном, применяемые для обследования населения на сифилис, и испол трепонемальный антиген диагностические тесты, кот подтверждают диагноз.
К отборочным тестам относится р-ция микропреципитации или ее аналоги: VDRL (Veneral Disease Research Laboratory), RPR (Rapid Plasma Reagin), флокуляционные тесты и РПГА с кардиолипиновым антигеном.
Отборочные тесты с кардиолипиновым антигеном в количественном варианте постановки испол также для контроля эффективности лечения.
Диагност тесты явл высокочувствит и высокоспецифич - ИФА, РПГА, РИФ (непрямая), иммуноблоттинг.
В этих р-циях в кач-ве антигена испол УЗ-экстракт трепонем, выращенных в яичке кролика.
Из молекулярно-биологических методов чаще всего испол ПЦР.
Лечение. Применяются а/б пенициллинового ряда и висмутсодержащие препараты.
Профилакт. Специфич проф не разработ. Неспециф проф объединяет пропаганду зож и санитарно-просвет работу среди молодежи. Проводится обязат серологич контроль доноров, беременных и бол, поступ во все стационары, а также в гр риска (проститут, гомосекс, нарки) с целью своеврем выявл и эффектив леч бол сиф.
Серологич диаг применяется для подтверждения клинич диагноза сифилиса, постановки диагноза скрытого сифилиса и контроля за эффективностью лечения.
В иммунном ответе орг приним участие как клет, так и гуморал механизмы (синтез специфич антител). Появл противосифилитических антител происх в соответствии с общими закономерностями иммунного ответа: вначале вырабатываются IgM, по мере развития болезни начинает преобладать синтез IgG; IgA в сыворотке крови присутствуют в сравнительно небольших кол-вах. Специфич IgM к белковым антигенам появл на 2—4-й нед после заражения и исчезают у нелеченных больных примерно через 3—4 мес, при лечении раннего сифилиса — через 2 — 3 мес. Иммуноглобулины класса G возникают обычно на 4-й нед после заражения. Антитела этого класса могут сохр длит вр даже после клинич излечения больного.
Современные методы специфич серологич диагност сифилиса основаны на выявл антител разных классов.
Серологич тесты на сифилис, рекомендуемые для исслед сыворотки крови: трепонемные тесты (ТТ): -р-ция пассивн гемагглютинации (РПГА); -иммуноферментный анализ (ИФА) на антитела класса IgM, IgG; - р-ция иммунофлюоресценции (РИФ) в 2х модификациях: РИФ200 и РИФабс.
К нетрепонемным относятся: -РСКк — р-ция связывания комплемента с кардиолипиновым антигеном (р-ция Вассермана). -РМП (МРП) — р-ция микропреципитации крови с кардиолипиновым антигеном. -RPR (Rapid Plasma Reagins) — неспецифич антифосфолипидный (реагиновый) тест др.
Леч сифилиса происходит антибиотиками пенициллинового ряда.
Таксономия: Порядок: Spirochaetales Сем: Spirochaetaceae Род: Borrelia Виды: Borrelia recurrentis ( спирохета Обермейера), B. caucasica, persica, duttonii, hispanica и т.д
Морфология: спиралевидные бактерии, 3-8 неравномерных крупных завитков, концы заострены, очень подвижны: сгибательные вращательные и поступательные движения за счет 7-30 фибрилл, на каждом конце кл, кот обвиваются вокруг тела. и частично перекрываются в середине организма с фибриллами, начинающимися от другого конца. Спор и капсул не образуют.
Окраска: грам-, хорошо окраш анилин. красителями, по методу Романовского-Гимза – в сине-фиолет цвет.
Механизм заражения: трансмиссивный- через поврежденную при укусе кожу или через расчесы при втирании гемолимфы раздавленной вши в ранку от укуса.
Патогенез: Через кожу боррелии попадают в лимфат сис-му, захватываются мононуклеарными фагоцитами, размножаются, затем поступают в кровь, где частично погибают с высвобождением эндотоксина, кот обуславливает общую интоксикацию, озноб, лихорадку (первичный лихорадочный период длит 7-10 дней), а также действует на кл эндотелия сосудов (геморрагические инфаркты в печени, селезенке, возможен менингит). Через несколько дней вырабатываются антитела (лизины), боррелии гибнут, и лихорадка прекращается (период нормализации Т длит 4-10 дней). Часть боррелий сохр и дает новое поколение, нечувствительное к образовавшимся лизинам. При их выходе в кровеносное русло начинается вторичный лихорадочный период. Но одновр образуются лизины, растворяющие боррелии второй генерации. Такие приступы, вызванные новыми генерациями боррелий, могут повторяться до 7-10 (и даже 20) раз.
Лаб диаг: · основ метод – микроскопич (исслед кровь в период лихорадки; костн мозг – в период ремиссии), окраска по методу Романовского-Гимза. · биологич метод – заражают белых мышей или молодых крыс, через 2-4 дня проводят исслед (морские свинки не чувствительны к B.recurrentis);
· серологич метод: р-ция лизиса, РСК, р-ция иммобилизации боррелий сывороткой больного, р-ция нагрузки боррелий тромбоцитами.
Препараты для леч: специфич- нет; неспецифич- а/б пенициллинового, тетрациклинового ряда, левомицетины.
Болезнь Лайма (синонимы: системный клещевой боррелиоз, лайм-боррелиоз, хронич мигрирующая эритема) – хронич трансмиссивное природно-очаговое инфекц заб, отличающееся полиморфизмом клинич проявлений, протекающее с эритемой, лихорадкой, признаками поражения ЦНС, сердечно-сосудистой системы и суставов
Возбуд – Borrelia burgdorferi, B.garini, B.afzelii
Морфол. Боррелии представ собой тонкие спирохеты с 3—10 крупными завитками. Двигат апп представ 15—20 фибриллами. Они хорошо воспринимают анилиновые красители, по Романовскому—Гимзе окрашиваются в сине-фиолет цвет. Боррелии обладают уникальным, не имеющим аналогов среди др бакт генетическим аппаратом, кот состоит из небольш размеров линейной хромос и набора циркулярных и линейных плазмид.
Эпидемиология. Ист инфекции – дикие и домашние животные. Переносчики – иксодовые клещи (на террит РФ – Ixodes ricinus и persulcatus) . Механ передачи инфекции – трансмиссивный. Инкубац период – 3-32 дня
Клинич проявл в 3 стадии: I стадия – у 80 % пац на месте укуса развивается первичная эритема 3-20 см, бледнорозового или ярко-красного цвета, в центре бледнее, чем по переферии, также отмечается гриппоподобный симптомокомплекс, лимфаденит.
II стадия – диссеминация возбуд по лимфатич и кровенос сис-мам в органы и тк (лимфо- и плазмоцитарные инфильтраты), циркуляция боррелий в составе циркулирующих иммунных комплексов вызывает развитие локальных васкулитов и окклюзий сосудов. Особенно характерно поражение суставов (у 60 % пац).
III стадия – через несколько мес или лет поражается НС (менингиты, менингоэнцефалиты, мононевриты), с-с с (кардиты, тромбозы артерий), суставы (артриты), кожа (вторичная эритема, атрофические акродерматиты)
Лаб диагн: испол –серологич иссл крови в непрямой р-ции иммунофлюоресценции (НРИФ) с антигеном и боррелий. «+» р-цией считают нарастание титра антител через 3 нед от нач заб в 2 р. При отсут нарастания титра антител в динамике диагностич явл титр 1:40. На поздних сроках заб «+» НРИФ в титре 1: 40 и выше, свидетельствует о хронич. Или латентном течении болезни Лайма.
-из иммунохимических методов для выявления антител в классах IgM и G испол ИФА.\
- р-ция с энзим-месенными антителами (ELISA).
-среди перспективных методов диагностики боррелиоза-вестернблот и ПЦР.
Специф проф и леч не разработаны. Назначают а/б тетрациклинового ряда, пенициллин, цефалоспорины.
Тип простейшие(Protozoa). Простейшие — одноклет животные, тело кот функционально соответст целому организму. Тип простейшие делится на 4 класса: Жгутиковые (Flagellata), Саркодовые (Sarcodina), Споровики (Sporozoa) и инфузории (Infusoria) Многие простейшие явл паразитами чела, вызыв различ патоген процессы.
Этиология. Возбуд — Entamoeba histolytica. Жизн цикл этого простейшего вкл 2 стадии: вегетатив (трофозоит) и покоя (циста). Трофозоит в свою очередь может существовать в виде 2х форм : большая вегетативн или тканев (forma magna) и малая вегетативн или просветная (forma minuta). Большая вегетативн форма отличается от малой большими размерами и подвижностью, а также способност фагоцитировать эритроциты.
Во внеш среде вегетативные формы амеб быстро погибают, а цисты сохр свою жизнеспособность. Так, во влажной почве они сохраняются до 8 дней, в водопроводной воде — до 1 мес.
Патогенез. Цисты Е. histolytica, попавшие в желудок, проходят в кишечник без существенных изменений. В нижн отделах тонк к они эксцистируются, а в слепой и восходящей, где амебы встречают наиб благоприятн условия, начинается их активное размножение. Дальнейшее развитие инвазии может протекать по типу бессимптомного носительства.
Специф диаг. Решающими в распознавании амебиаза кишечника явл паразитологич исслед. С этой целью микроскопируют мазки, приготовл из свежевыделенных, теплых испражнений (forma magna остается жизнеспособ в кале только 15-30 мин). Обнаруж в испражн эритрофагов указывает на активность патологич процесса. Просветные формы и цисты выдел бол в периоды ремиссии патологич процесса/ носителями.
При диаг внекишечных форм амебиаза оцениваются рентгенологические, эхотомо- сканнографические и лаб данные, вкл исслед пунктата абсцесса, гной мокроты, а при поражениях кожи и гениталий и содержимого язв.
В наст вр в диаг амебиаза испол также и серологич методы исслед (РНГА, ИФМ, РЭМА, ELISA). следует иметь в виду, что эти методы довольно трудоемки и нередко могут оказаться «+» у лиц, переболев амебиазом.
Лечение. Основа леч амебиаза — назнач противоамебных препарат. но, бол-во препарат не способны эффект действовать на различные стадии развития паразита. Поэтому выделяют 2-е гр амебоцидов: · просветные амебоциды — действуют на просветные формы амеб (forma minuta) и неэффективны в отношении ткан форм: Diloxanide furoate (Furamide), Diodohydroxyquinoline, тетрациклин.
· ткан амебоциды: действуют на ткан формы амеб (forma magna) кишеч и внекишеч локализации и малоэффек в отношении просветных форм из-за низкой концентрации препарата в просвете кишечника: метронидазол, тинидазол, эметин, дегидроэметин и др.