Изучение некоторых биологических свойств культуры рода Alcaligenes spp
Палаткина А.Ю., Сверкалова Д.Г.
Род Alcaligenes -- представлен грамотрицательными палочками или коккобациллами размером 0,5--1,2 Ч 1--3 мкм, не образующими спор, подвижными за счёт наличия от одного до девяти жгутиков, расположенных перетрихиально.
Хемоорганогетеротрофы, облигатные аэробы, некоторые штаммы способны к нитритному дыханию, образуют оксидазу и каталазу. Оптимальная температура роста 20--37 °С. Образует непигментированные либо серовато-белые, прозрачные до мутных, плоские или слегка выпуклые круглые, гладкие (изредка шероховатые) колонии с неправильным краем на питательном агаре. Не способны использовать углеводы как единственный источник углерода, способны утилизировать ацетат, пропионат, бутират, цитрат, аланин и некоторые другие аминокислоты[2].
Представителей рода Alcaligenes выделяют из кишечного тракта позвоночных, разлагающихся материалов, молочных продуктов, воды и почвы; они могут быть изолированы из дыхательных путей, желудочнокишечного тракта человека, ран госпитализированных пациентов с ослабленной иммунной системой. Они иногда являются причиной оппортунистических инфекций, включая нозокомиальный сепсис [1] [2].
Некоторые виды Alcaligenes были использованы для промышленного производства нестандартных аминокислот; А. eutrophus также производит биополимер полигидроксибутират [2].
Представителей рода Alcaligenes в последнее время часто включают в состав биологических препаратов, предназначенных для биологической очистки сточных вод, биодиструкции нефти и нефтепродуктов.
Считаем важным вопросом изучение биологических свойств данного объекта. alcaligenes ферментативных каталаза биологический
Материалы и методы. Набор для окраски по Граму, среды Гисса, 0,7% мясопептонный агар, 1,2 % мясопептонный агар (ГРМ), мясопептонный бульон (ГРМ), 3% раствор перекиси водорода, 1 % раствор тетраметилпарафенилендиамина дигидрохлорида. световой микроскоп МБИ3, бактериологическая петля, цифровая камера-окуляр для микроскопа модель DCM 130, термостат ТС 1/80 СПУ, штативы, пробирки, пробки, предметные стекла, вода дистиллированная, автоклав ВК-75, штамм B 5269 Alcaligenes spp., МВКПМ. Исследование проводили стандартными бактериологическими методами, многократно апробированном сотрудниками кафедры МВЭиВСЭ ФГБОУ ВО Ульяновской ГСХА [3-8].
Заранее подготовленную суточную культуру Alcaligenes spp. в мясопептонном бульоне, высеяли на мясопептонный агар (ГРМ), в пробирки со средами Гисса, полужидкий агар. Посевы культивировали при 30 єС сутки, затем учитывали некоторые результаты: реакция сред Гисса, подвижность (рост в полужидком агаре), характер роста на мясопептонном агаре. Затем были поставлены по стандартным методикам тесты на определение способности продуцировать ферменты каталазу и оксидазу, приготовлен мазок и окрашен по Граму.
В результате проведенных исследований, установлено, что исследуемая культура Alcaligenes sp. каталазоположительная, оксидазоположительная (рисунок 1). Не ферментирует исследуемые сахара и многоатомные спирты: глюкозу, лактозу, сахарозу, мальтозу, маннит, сорбит, инулин, дульцит (рисунок 2). Подвижна, так как в полужидком агаре виден распространяющийся рост от укола в толщу среды, рост в полужидком ангаре локализуется строго в верхней части ближе к поверхности среды, что говорит о том, что изучаемая культура являются аэробом (рисунок 3).
Рисунок 1 - Результат постановки тестов
Рисунок 2 - Результат определения на наличие ферментов оксидазы и ферментативных свойств Alcaligenes spp. каталазы у культуры Alcaligenes spp. в средах Гисса
Рисунок 2 - Результат определения
Рисунок 3 - Колонии культуры Alcaligenes подвижности Alcaligenes spp. spp. на мясопептонном агаре
В мазке, окрашенном по Граму культура представлена грамотрицательными коккобациллами, располагающиеся попарно и одиночно.
На мясопептонном агаре через сутки культивирования образует глянцевые, непигментированные, серовато-белые, слегка выпуклые круглые, гладкие колонии с неправильным краем, маслянистой консистенции колонии (рисунок 4).
Выводы
В результате проведенной работы, установлено, что штамм Alcaligenes spp. по исследуемым культуральным, морфологическим, тинкториальным и биохимическим свойствам является типичным представителем рода Alcaligenes spp.
Список используемых источников
1 Stedman's Medical Dictionary [Электронный ресурс] - Режим доступа: http://www.medilexicon.com/medicaldictionary.php?t=2048
2 Medical Dictionary for the Dental Professions © Farlex 2012
[Электронный ресурс] - Режим доступа: http://medical-
dictionary.thefreedictionary.com/Alcaligenes
3. Садртдинова Г.Р. Сравнительная эффективность методов выделения бактериофагов Klebsiellaoxytoca/ Г.Р. Садртдинова, Д.А. Васильев, С.Н. Золотухин/ Вестник Ульяновской сельскохозяйственной академии.-№4 (32).- С.68-72.
4. Садртдинова Г.Р. Выделение бактериофага бактерий
Klebsiellaoxytoca под действием рентгеновского облучения/ Г.Р.Садртдинова, Д.А.Васильев, С.Н.Золотухин // Вестник Ульяновской сельскохозяйственной академии.-№1 (33).- С.76-81.
5. Ефрейторова Е.О., Пульчеровская Л.П., Васильев Д.А. Изучение биологических свойств бактерий serratia marcescen выделенных из пищевых продуктов и объектов окружающей среды / Научный вестник Выпуск №13.г. Дмитровград. Технологический институт филиал ФГБОУ ВПО «Ульяновская
ГСХА им. П.А.Столыпина» С. 175-180
6. Пульчеровская Л.П. Индикация бактерий рода Citrobacter с помощью реакции нарастания титра фага (РНФ)/ Л.П.Пульчеровская,
С.Н.Золотухин, Д.А.Васильев// Вестник Ульяновской государственной сельскохозяйственной академии. - 2013. - № 1(21). - С. 60 - 64.
7. Кузнецова, О.В. Изучение биологических свойств бактерий вида Serratia marcescens/ О.В.Кузнецова, Л.П.Пульчеровская, Д.А.Васильев, Е.О.Бахаровская Материалы международной научно-практической конференции. «Ветеринарная медицина XXI века: инновации, опыт,
проблемы и пути их решения» Том 1, Ульяновск 2011. - с.154-155 .
8. Золотухин, С.Н. Выделение фагов бактерий рода Citrobacter из объектов внешней среды и патологического материала // С.Н.Золотухин, Л.П.Пульчеровская, Н.А. Кирьянова, Д.А. Васильев «Вестник УГСХА», Сборник научных трудов, Ульяновск, - 2002. - С. 29-32.