Представленные данные свидетельствовали о том, что при использовании ИХГ метода положительные результаты исследования наблюдались у 99,13% больных активными формами сифилиса и 99,33% больных и ранее перенесших сифилитическую инфекцию пациентов (клиническая чувствительность КЧ1 и КЧ2 соответственно), а отрицательные - у 99,08% лиц, свободных от сифилитической инфекции (клиническая специфичность, КС).
Результаты обследования в ИХГ тестах пациентов всех групп (больные сифилисом и здоровые лица) в 99,26% случаев достоверно отражали наличие сифилитической инфекции у пациента в активной форме или перенесенного заболевания в анамнезе (диагностическая эффективность, ДЭ).
Положительные результаты в иммунохроматографических исследованиях в 99,60% случаев соответствовали наличию клинического диагноза или перенесенной в прошлом сифилитической инфекции (ПЦ+), а отрицательные результаты - в 98,47% случаев - его отсутствию (ПЦ-).
Таким образом, полученные в исследовании результаты позволили оценить ИХГ метод исследования по показателям клинической информативности как адекватный отборочный иммунологический тест для выявления сифилитической инфекции при первичном обследовании населения наряду с такими регламентированными трепонемными методами как ИФА и РПГА.
3. Определение расчетных норм времени выполнения ИХГ исследований для выявления сифилитической инфекции
Установлено, что наименьшее количество рабочего времени для лаборантов клинической лабораторной диагностики требует выполнение единичных ИХГ исследований и РПГА (12 мин 12 сек и 12 мин 25 сек соответственно) и несколько больше - реакция микропреципитации (RPR - 13 мин 20 сек и РМП - 14 мин 10 сек); наибольшая величина расчетного времени установлена при ИФА - 15 мин 55 сек.
Наименьшее количество рабочего времени врачи клинических диагностических лабораторий расходовали при оценке, регистрации и предоставлении результатов единичных ИХГ исследований (2 мин 10 сек); в то время как аналогичные затраты времени при выполнении реакций микропреципитации (РМП и RPR), РПГА и ИФА составили 2 мин 40 сек, 2 мин 45 сек и 2 мин 55 сек соответственно (рис. 5).
Рис. 5. Показатели расчетного времени выполнения единичных иммунологических исследований для выявления сифилиса для врачей и лаборантов КДЛ.
При выполнении серии иммунологических исследований различия в нормативных показателях расчетного времени на выполнение каждого последующего исследования были столь же очевидными.
Минимальное расчетное время установлено для выполнения каждого последующего ИХГ исследования (лаборант - 3 мин 02 сек и врач - 2 мин 00 сек), на 17,5 и 19,2% больше требуется времени для проведения RPR и РМП (лаборант - 3 мин 45 сек и 3 мин 50 сек, врач - по 2 мин 10 сек соответственно) и на 27,5% - при исследованиях в РПГА (лаборант - 4 мин 10 сек и врач - 2 мин 15 сек) и ИФА (лаборант - 4 мин 15 сек и врач - 2 мин 10 сек).
Таким образом, в результате проведенных хронометражных наблюдений и выполненных расчетов были установлены нормы расчетного времени при проведении в клинических диагностических лабораториях иммунохроматографических исследований по выявлению сифилитической инфекции: на выполнение единичных исследований (лаборант - 12 мин 12 сек и врач - 2 мин 10 сек) и каждого последующего исследования в серии (лаборант - 3 мин 02 сек и врач - 2 мин 00 сек).
4. Определение себестоимости финансовых затрат на проведение отборочных иммунологических исследований для выявления сифилитической инфекции
Проведенные расчеты показали снижение материальных затрат при организации проведения иммунологических исследований в серии по сравнению с выполнением единичных тестов: в РМП - на 7,0%, в RPR - на 11,1%, в РПГА - на 10,3%, в ИФА - на 66,2% и в ИХГ - на 2,6%. Это обусловлено дополнительным расходом реагентов и расходных материалов на проведение необходимых контролей и амортизационными отчислениями на работу оборудования.
Минимальное повышение финансовых затрат при проведении единичных тестов по отношению к исследованию в серии, установленное для ИХГ исследований и РМП (на 2,6 и 7,0% соответственно), обеспечивает большую их рентабельность при использовании для обследования населения и проведении единичных исследований.
Среди тестов, рекомендуемых в качестве отборочных для обследования населения с целью выявления сифилитической инфекции, наименьшая себестоимость установлена при проведении ИХГ исследований (рис. 6).
По отношению к себестоимости иммунохроматографических исследований, осуществляемых в серии (100%), финансовые затраты на проведение нетрепонемных тестов с кардиолипиновым антигеном - РМП и RPR - составляют 105 и 121% соответственно, на трепонемные тесты - РПГА и ИФА - 161 и 116% соответственно.
Рис. 6. Себестоимость иммунологических исследований для выявления сифилитической инфекции при проведении единичных тестов и в серии.
Таким образом, было показано, что наименьшие финансовые затраты при оказании первичной медико-санитарной помощи населению обеспечиваются применением ИХГ тестов с целью выявлении сифилитической инфекции (190 рублей), в то время как использование других иммунологических методов для скрининга (РМП, RPR, РПГА, ИФА) приводит к повышению расходов на 5, 21, 61 и 16% соответственно. Для ИХГ тестов так же показано минимальное повышение финансовых расходов при выполнении единичных исследований по отношению к затратам, рассчитанным на выполнение исследований в серии.
Полученные данные позволили оценить ИХГ метод исследования с целью выявления сифилитической инфекции как недорогой и пригодный для постановки как в качестве единичного исследования, так и в аналитической серии.
5. Разработка алгоритма обследования населения для выявления сифилитической инфекции с применением ИХГ метода исследования
На основе результатов изучения конструктивных особенностей наборов реагентов для иммунохроматографических исследований и клинической информативности их применениям был разработан алгоритм первичного обследования населения и тактика последующего ведения в зависимости от полученных в иммунохроматографических исследованиях результатов.
иммунохроматографический сифилитический инфекция клинический
Рис. 7. Алгоритм обследования населения с целью выявления сифилитической инфекции с использованием результатов иммунохроматографического исследования.
1. Обследование пациентов, не указывающих на перенесенную в прошлом сифилитическую инфекцию, не предъявляющих жалоб и не имеющих клинических проявлений сифилиса.
1.1. Получение отрицательного результата в ИХГ исследовании свидетельствует об отсутствии трепонемоспецифических антител в образце крови пациента и позволяет врачу, оказывающему первичную медико-санитарную помощь, сделать заключение об отсутствии сифилитической инфекции и рекомендовать последующее медицинское обследование:
- в соответствии с общими положениями о сроках и порядке проведения периодических медицинских осмотров населения в Российской Федерации;
- по эпидемиологическим показаниям (незащищенный половой контакт с больным сифилисом с учетом длительности инкубационного периода заболевания).
1.2. Получение положительного результата в иммунохроматографическом тесте позволяет врачу, оказывающему первичную медико-санитарную помощь, рекомендовать пациенту провести углубленное обследование с целью установления клинического диагноза в условиях медицинской организации дерматовенерологического профиля и выдать заключение о выявленных отклонениях в показателях состоянии здоровья пациента.
2. Обследование пациентов без указаний на перенесенную в прошлом сифилитическую инфекцию, предъявляющих и не предъявляющих жалобы и/или имеющих клинические проявления, характерные для сифилитической инфекции.
2.1. Получение отрицательного результата в ИХГ тесте указывает на отсутствие антител к возбудителю сифилиса и позволяет врачу, оказывающему первичную медико-санитарную помощь, рекомендовать пациенту:
- углубленное обследование в условиях медицинской организации дерматовенерологического профиля с целью прямой идентификации возбудителя инфекционного процесса, обусловившего появление жалоб и/или клинических проявлений, и установления клинического диагноза заболевания;
- повторное иммунологическое исследование (при подозрении на сифилитическую инфекцию) через 1-3 недели от момента появления эрозивно-язвенных высыпаний (срок позитивации трепонемоспецифических серологических тестов) или (при отсутствии сифилитической инфекции) в сроки в соответствии с общими положениями о порядке проведения периодических медицинских осмотров населения в Российской Федерации.
2.2. При получении положительного результата в ИХГ тесте врач, оказывающий первичную медико-санитарную помощь, должен обеспечить выполнение следующих мероприятий:
- пациента направить для углубленного обследования с целью установления клинического диагноза, определения тактики его дальнейшего ведения и наблюдения в условиях медицинского учреждения дерматовенерологического профиля;
- сообщить о результатах обследования пациента в региональное медицинское учреждение дерматовенерологического профиля в установленном порядке для обеспечения активного привлечения пациента к обследованию на наличие ИППП сотрудниками патронажной службы соответствующего медицинского учреждения дерматовенерологического профиля.
3. Обследование пациентов с указаниями на перенесенную в прошлом сифилитическую инфекцию.
Получение положительных результатов в ИХГ исследовании у таких пациентов не позволяет сделать заключение о состоянии их здоровья, так как положительные результаты могут свидетельствовать как о перенесенной в прошлом, так и об активной инфекции.
Врачу, оказывающему первичную медико-санитарную помощь, рекомендуется:
- направлять таких пациентов в специализированные медицинские организации дерматовенерологического профиля для проведения углубленного обследования с целью установления клинического диагноза;
- передавать данные о результатах обследования в региональное медицинское учреждение дерматовенерологического профиля в установленном порядке для активного привлечения пациента к обследованию сотрудниками патронажной службы соответствующего медицинского учреждения.
Повторное серологическое исследование на сифилис рекомендуется в соответствии с установленными дерматовенерологом указаниями.
Разработанный алгоритм обследования предназначен для использования при периодических медицинских осмотрах населения в условиях медицинских организаций при оказании первичной медико-санитарной помощи. Иммунохроматографические исследования по выявлению сифилитической инфекции также показаны для первичного обследования лиц, впервые привлекаемых к донорству крови, а также для обследования рожениц, поступивших в акушерские отделения без амбулаторных карт и данных их предварительного обследования и наблюдения.
ВЫВОДЫ
1. В Российской Федерации установлены высокие показатели заболеваемости населения сифилитической инфекцией и преобладание в её структуре скрытых клинических форм (до 58,3% по данным 2010 года), что обусловливает необходимость ежегодного проведения большого количества отборочных иммунологических исследований для выявления новых случаев заболевания и применения для этих целей недорогих экспресс-тестов, осуществление которых не требует специального оборудования и лабораторных работников высокой квалификации; к числу удовлетворяющих этим требованиям относятся трепонемные иммунохроматографические тесты.
2. Показатели клинической информативности иммунохроматографических исследований: чувствительность (99,33%), специфичность (99,08%), диагностическая эффективность (99,26%), предсказательная ценность положительных (99,60%) и отрицательных результатов (98,47%) у больных разными клиническими формами сифилитической инфекции идентичны соответствующим показателям, установленным для иммуноферментного анализа (100; 99,69; 99,91; 99,87 и 100%) и реакции пассивной гемагглютинации (99,20; 99,92; 97,30; 97,0 и 98,05%), и достоверно превышают показатели для реакции микропреципитации с кардиолипиновым антигеном (78,60; 78,53; 78,77; 89,51 и 61,39% соответственно).
3. Использование иммунохроматографического метода в качестве отборочного теста для выявления сифилитической инфекции позволяет сокращать затраты рабочего времени лаборантов и врачей клинической лабораторной диагностики по сравнению с реакцией микропреципитации - на 17,2 и 19,2%, быстрым плазмареагиновым тестом - на 11,4 и 17,5%, реакцией пассивной гемагглютинации - на 5,6% и 27,5% и иммуноферментным анализом - на 31,1% и 27,5% (на единичное и каждое последующее исследование в серии соответственно).
4. Применение иммунохроматографического метода для выявления сифилитической инфекции приводит к понижению финансовых расходов по сравнению с другими регламентированными для этой цели иммунологическими методами (РМП, RPR, РПГА, ИФА).