Автореферат: Иммунохроматографический метод исследования в диагностике сифилитической инфекции

Внедрение результатов исследования

Результаты исследования, касающиеся применения иммунохроматографических экспресс-тестов с целью раннего выявления сифилитической инфекции, включены в учебные программы преподавания:

- на циклах общего и тематического усовершенствования в системе последипломной подготовки врачей дерматовенерологов и врачей клинической лабораторной диагностики в ФГБУ «ГНЦДК» Минздравсоцразвития России;

- в курсе дерматовенерологии на кафедре дерматовенерологии лечебного факультета ГБОУ ВПО РНИМУ имени Н.И. Пирогова Минздравсоцразвития России.

Публикации. По теме диссертации опубликованы 8 печатных работ: в том числе 3 научные статьи в рецензируемых научных журналах, рекомендуемых ВАК Минобрнауки России.

Личный вклад автора в проведенное исследование

Автором подготовлен обзор данных отечественных и зарубежных источников литературы и разработан дизайн исследования; проведен сбор и изучение данных государственной статистической отчетности о заболеваемости населения Российской Федерации сифилитической инфекции за период 2000-2010 годов. Осуществлен репрезентативный набор пациентов в основную группу и группу сравнения, их характеристика по возрастному и гендерному составу, а также по клиническим формам сифилитической инфекции у лиц основной группы. Получены образцы крови пациентов и проведено их исследование в иммунологических реакциях для выявления сифилитической инфекции; проведены расчеты и сравнительная оценка клинической информативности использованных лабораторных методов. Выполнены хронометражные наблюдения и финансово-экономических расчеты затрат на выполнение каждого вида иммунологического исследования. Разработан алгоритм обследования населения с целью первичного выявления сифилитической инфекции с использованием ИХГ метода исследования, предназначенный для применения в организациях, оказывающих населению первичную медико-санитарную помощь. Диссертантом сформулированы выводы и практические рекомендации.

Структура и объем диссертации.

Диссертация состоит из введения и 6 глав, включающих обзор литературы, характеристику материалов и методов исследования, результаты собственных исследований, а также заключения, выводов и списка литературы. Работа изложена на 169 страницах компьютерного текста, включает 18 таблиц, 16 рисунков и 5 приложений. Указатель литературы содержит 186 библиографических источников (115 отечественных и 71 иностранных авторов).

2. СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Объекты, материалы и методы исследования

Объектом исследования явились:

- 750 пациентов в составе основной группы: 575 больных активными формами сифилитической инфекции и 175 пациентов, состоявших под клинико-лабораторным наблюдением по поводу перенесенного заболевания в прошлом;

- группа сравнения - 325 пациентов без клинических и лабораторных указаний на наличие сифилитической инфекции: 250 активных доноров крови и 75 лиц с БЛПР в иммунологических тестах для выявления и диагностики сифилиса;

Материалами исследования служили:

- данные официальной государственной статистической отчетности, характеризующие заболеваемость населения Российской Федерации сифилитической инфекцией за 2000-2010 годы;

- 1075 образцов сыворотки/плазмы крови, полученные от пациентов основной группы и группы сравнения;

- данные 65 хронометражных наблюдений по определению норм затрат времени для выполнения иммунологических исследований по выявлению сифилитической инфекцией специалистами КДЛ (врачами и лаборантами);

- результаты финансово-экономических расчетов себестоимости затрат на выполнение иммунологических исследований для диагностики сифилитической инфекции;

- наборы реагентов для ИХГ исследований по выявлению сифилитической инфекции, разрешенные к применению в учреждениях здравоохранения Российской Федерации - «DetermineTM Syphilis TP» (фирмы «Inverness Medical Japan Co., Ltd.», Япония) (РУ № ФЗС 2009/05498 от 03.10.2009 г.).

Методы исследования:

- эпидемиологический анализ данных о распространении сифилитической инфекции среди населения;

- иммунологические исследования для выявления в крови человека специфических антител к возбудителю сифилитической инфекции: РМП, RPR, РПГА, ИФА, ИХГ исследование;

- оценка клинической информативности лабораторных методов исследований (по ГОСТ Р 53022.3-2008);

- хронометражные наблюдения;

- финансово-экономические расчеты затрат на проведение иммунологических исследований для выявления сифилитической инфекции;

- статистическая обработка полученных результатов.

Результаты исследования

1. Показатели заболеваемости сифилитической инфекцией населения Российской Федерации на современном этапе

При изучении абсолютных цифровых значений официальной государственной статистической отчетности и рассчитанных на их основе относительных показателей было установлено, что в Российской Федерации до настоящего времени в полной мере не исправлены последствия эпидемии сифилитической инфекции, наблюдавшейся в 90-х годах прошлого столетия (рис. 1).

За период 2000-2010 годов заболеваемость населения сифилитической инфекцией понизилась в 3,7 раза (со 165,3 случаев на 100 тыс. населения в 2000 году до 44,7 - в 2010 году). Темпы снижения заболеваемости в эти годы не были равномерными, они характеризовались волнообразными колебаниями величины - от 4,31 до 21,16%. Кроме этого показатели заболеваемости населения существенно отличались в разных регионах Российской Федерации.

Рис. 1. Динамика показателей заболеваемости сифилитической инфекцией населения в субъектах Российской Федерации в 2000-2010 годах.

В изучаемый период времени произошло также изменение структуры заболеваемости населения отдельными клиническими формами сифилитической инфекции. Как абсолютное число, так и доля впервые выявленных больных с манифестными формами заболевания (первичный и вторичный периоды) по мере снижения остроты эпидемиологической ситуации продолжала неуклонно уменьшаться (63,25% в 2000 году до 40,39% в 2010 году; общее снижение - в 1,57 раза). Одновременно с этим наблюдалось увеличение доли латентных форм (с 36,46% в 2000 году до 58,33% в 2010 году; общий рост - в 1,60 раза) (рис. 2).

Рис. 2. Рост доли скрытых и уменьшение доли манифестных форм в структуре заболеваемости сифилитической инфекцией населения Российской Федерации.

Выявленная тенденция сокращения регистрации в Российской Федерации клинических форм с проявлениями и увеличения доли латентных форм в структуре заболеваемости населения сифилитической инфекцией обусловила повышение значимости и сохранения частоты применения непрямых иммунологических тестов в диагностике заболевания. На протяжении ряда лет количество иммунологических исследований, осуществляемых при выявлении и диагностике клинических форм сифилитической инфекции в Российской Федерации, оставалось на относительно стабильном высоком уровне: от 89,4 до 96,6 млн. исследований, а число обследованных лиц колебалось в пределах 53,3-60,8 млн. человек. Проведение такого значительного объема исследований обусловливало существенные затраты из бюджетов органов здравоохранения.

В период 2000-2010 годов в Российской Федерации произошло уменьшение на 35,8% общего количества медицинских организаций, оказывавших населению специализированную помощь дерматовенерологического профиля (с 341 организации, существовавшей в 2000 году, до 219 - в 2010 году).

Уменьшение количества специализированных медицинских организаций дерматовенерологического профиля приводило к более интенсивной работе лабораторий или перераспределению функции выполнения указанных видов исследований в клинические лаборатории медицинских организаций, оказывающих населению первичную медико-санитарную помощь, которые не обладают необходимыми ресурсами для проведения высокоспецифичных подтверждающих исследований для диагностики сифилитической инфекции.

В этой связи на современном этапе возникла потребность в применении на этапе оказания первичной медико-санитарной помощи населению недорогих высокоэффективных отборочных экспресс-методов по выявлению сифилитической инфекции, не требующих для своего выполнения специального лабораторного оборудования и участия медицинских кадров высокой квалификации.

В качестве иммунологического метода, удовлетворяющего возникшим потребностям практического здравоохранения для быстрого обследования населения с целью выявления сифилитической инфекции, проведено изучение иммунохроматографического метода определения антител к антигенам T.pallidum.

2. Оценка показателей клинической информативности иммунологических методов для выявления сифилитической инфекции

В соответствии с задачами настоящего исследования был осуществлен подбор пациентов в основную группу наблюдения (n=750): в том числе 575 больных наиболее часто встречающимися клиническими формами сифилитической инфекции, а также 175 лиц, ранее получивших специфическое лечение по поводу сифилитической инфекции и состоявших под клинико-серологическим наблюдением (рис. 3).

Рис. 3. Распределение пациентов в основной группе по диагнозу или срокам наблюдения после лечения по поводу сифилитической инфекции.

Группу сравнения составили лица без сифилитической инфекции (n=325): 250 активных доноров крови и 75 лиц с биологическими ложноположительными результатами (БЛПР) иммунологических исследований на сифилис.

Результаты исследования образцов крови у пациентов основной группы, полученные в иммунологических тестах для диагностики сифилитической инфекции, представлены в таблице 1. Анализ результатов исследования позволил охарактеризовать иммунохроматографический метод определения антител к антигенам T.pallidum как высокочувствительный, сопоставимый по уровню полученных показателей с ИФА и РПГА и превосходящий РМП (p < 0,05).

Таблица 1. Результаты исследования образцов крови пациентов основной группы в иммунологических реакциях для выявления сифилитической инфекции

Клиническая чувствительность иммунохроматографических исследований у больных с сифилитической инфекцией в зависимости от формы заболевания составила: при первичном сифилисе - 97,96%, при вторичном, скрытом раннем, скрытом неуточненном как ранний или поздний - по 100% и при скрытом сифилисе позднем - 97,37% (рис. 4).

Рис. 4. Показатели клинической чувствительности ИХГ метода у больных различными клиническими формами сифилитической инфекции.

Результаты исследования образцов крови, полученных от лиц группы сравнения, представлены в таблице 2.

Таблица 2. Результаты исследования образцов крови лиц группы сравнения в иммунологических реакциях для выявления сифилитической инфекции

Полученные в исследовании результаты позволили рассчитать показатели клинической информативности применения разных отборочных иммунологических тестов для выявления сифилитической инфекции (таблица 3).

Таблица 3. Показатели клинической информативности иммунологических исследований для выявления сифилитической инфекции