При нарушении радиационной упаковки необходимо, не вскрывая защитный контейнер и не проверяя его содержимое, создать комиссию и оформить в установленном порядке акт, а также немедленно известить грузоотправителя, местные органы санитарного надзора. Если при проверке обнаружится частичное или полное отсутствие радиоактивного вещества, то должны быть приняты неотложные меры по установлению местонахождения утраченного количества вещества, выявлению причин этой недостачи и мест возможных загрязнений радиоактивными веществами.

Применяя радиофармацевтические препараты, необходимо строго соблюдать технику безопасности и правила работыс радиоактивными веществами, установленные нормативными актами.

Работа с радиофармацевтическими препаратами допускается только в условиях, исключающих превышение допустимых норм излучения.

1. Халат должен надежно защищать одежду от радиоактивных загрязнений.

2. Работать следует в косынке (шапочке), защитных очках и резиновых (хлорвинило­вых) перчатках.

3. После работы необходимо тщательно мыть руки теплой водой с мылом.

4. Для исключения возможности за­грязнения радиоактивными веществами руки и одежду периодически проверяют с помощью радиометрических приборов.

Растворы радиофармацевтических препаратов упаковывают и хранят, руководствуясь требованиями ФС и специальны­ми правилами.

Растворы фармакопейных радиофармацевтических препаратов выпускают во флаконах, не только закрытых резиновыми пробками и металлическими колпаками, но и обязательно упакованных в защитные контейнеры.

Флаконы должны иметь этикетку с названием препарата и изотопа,

а к контейнеру прилагают паспорт, в котором указывают актив­ность препарата и содержание в нем химических, радиохимических и радиоизотопных примесей.

Хранят растворы радио­фармацевтических препаратов по списку Ав специальных шкафах для радиоактивных веществ, строго соблюдая ОСПОРБ-99 «Основ­ные санитарные правила обеспечения радиационной безопасности».

Срок годности радиофармацевтического препарата определяется такими факторами, как

· стабильность его химического и радиохимического состава;

· уменьшение активности с течением времени по закону радиоактивного распада, т.е. от периода полураспада и составляют от нескольких минут до нескольких суток;

· возрастание относительного состава долгоживущих радионуклидных примесей, имеющих периоды полураспада большие, чем у основ­ного радионуклида.

Срок хранения каждого радиофармацевтического препарата приводится в соответствующей ФС.

После истечения срока годности препараты подлежат возврату на завод-изготовитель. Ни в коем случае не разрешается выбрасывать растворы радиоак­тивных веществ в канализацию или мусоропроводы (мусорные ящики).

В последние годы в медицине все шире используются радиофармацевтические препараты, меченные позитронизлучающими радионуклидами:

¹¹С с периодом полураспада 20 мин.,

¹³N — период полураспада 10 мин,

¹⁵О — период полурапада 2 мин.

Относительно малый период полураспада указанных радионуклидов не позволяет проводить их аналитичес­кий и радиоаналитический контроль в полном объеме и на тех методических принципах, которые используются для дру­гих радиофармацевтических препаратов (¹³¹I, ¹²³ I, ¹¹¹ I и др.).

В связи с дополнительными техническими и аппаратными сложностями возникают трудности составления для них НД. Это усугубляется также небольшими объемами производства радиофармацевтических препаратов с короткоживущими радионуклидами за один технологический цикл 3-5 единиц упаковок в серии

27. Анализ лекарственных веществ в биологических жидкостях. Общее представление о фармакокинетике и биологической доступности. Терминология – константа скорости элиминации, период полуэлиминации, клиренс, объём распределения.

Количественное определение ЛС в биологических жидкостях является основным этапом фармакокинетических исследований ЛС.

Определение ЛС в биологических жидкостях включает в себя следующие стадии:

1)отбор проб и их хранение. Чаще всего определение ЛС проводят в крови (цельной, плазме или сыворотке крови), также бывает необходимо анализировать содержание ЛС в слюне, моче, реже спинномозговой или внутрисуставной жидкости. Время отбора проб после приема анализируемого ЛС определяется задачами исследования. Количество жидкости отбираемое для исследования должно обеспечивать два определения (в слу-

чае если возникнет необходимость повторного измерения). Хранятся пробы в замороженном виде при температуре от -180Си ниже. Так, например при температуре-350С90 % ЛС могут храниться без изменения содержания в течение 6 месяцев. Незначительное число ЛС требуют еще более низкой температуры хранения или не хранятся и должны анализироваться сразу после отбора проб. Пробы могут быть заморожены только один раз. Разморозка, повторная заморозка и затем опять разморозка для анализа недопустимы. Поэтому рекомендуется одну пробу разливать и хранить в двух пробирках: одна берется для анализа, а вторая остается в морозилке для повторного анализа этой пробы в случае необходимости. Все пробы должны иметь четкую, подробную маркировку;

2)выбор метода количественного определения и подбор условий анализа. Для получения достоверных результатов важное значение имеет правильный выбор метода количественного определения ЛС в биологической жидкости, который зависит от химических свойств вещества и задач исследования. Подбор условий анализа может включать выбор аналитической длины волны, состава подвижной фазы и другие в зависимости от метода;

3)изолирование (выделение) ЛС из биологической жидкости с последующим концентрированием. Для этой цели используюттвердо-фазнуюилижидко-фазнуюэкстракцию ЛС из биологической жидкости. Условия экстракции полностью определяются химическими свойствами ЛС. Длятвердо-фазнойэкстракции используют патроны с различными сорбентами (типаSep-Pakили другие).Жидко-фазнаяэкстракция, как правило, осуществляется органическими экстрагентами (хлороформ, эфир, гексан и другие) в необходимой кислой или щелочной среде. Так, например, диклофенак натрия является производнымо-аминофенилуксуснойкислоты, его рКа = 4.0, следовательно, для эффективной экстракции из плазмы крови необходима кислая реакция среды и рН=2.0, что достигается добавлением к пробе 200 мкл 1M раствора о-фосфорнойкислоты. Реже используются и другие способы выделения ЛС, например, осаждение белков 30% раствором НClO4. Концентрирование ЛС достигается путем либо упаривания экстрагента до сухого остатка, который растворяется в нескольких микролитрах растворителя, либо путем реэкстракции;

4)собственно количественный анализ. Как правило, проводится методами абсолютной калибровки или внутреннего стандарта;

5)обработка результатов. В зависимости от поставленной цели исследования проводится статистическая обработка результатов в соответствии

сзадачами исследования, расчет фармакокинетических параметров, расчет оптимального режима дозирования, обсуждение результатов.

т фотоколориметрию. Этот метод применяют, когда нужно определить большие концентрации вещества или

сумму веществ. Недостаток использования фотоколориметрических методик заключается в сравнительно невысокой их точности.

Простотой выполнения и достаточной точностью отличается метод спектрофотометрии в УФ- и видимой областях спектра. Сравнительно невысокая чувствительность спектрофотометрических методик (от 1 мкг/мл до 1 мг/мл) ограничивает применение данного метода для тех групп ЛС, суточная доза которых составляет около 1 г.

По сравнению с УФ-спектрофотометриейчувствительностьфлуориметрического анализа значительно выше (около 0,01 мкг/мл). Особенно высокой чувствительностью отличаются спектрофлуориметрические определения. Недостатком метода является необходимость тщательной очистки испытуемых веществ, так как флуоресцировать могут многие вещества содержащиеся в биологических жидкостях.

Перечисленные методы отличаются большей эффективностью, если их применяют в сочетании с хроматографическими методами.

Тонкослойная хроматография (ТСХ) обладает высокой разрешающей способностью, чувствительностью, а также отличается простотой выполнения. Метод позволяет обнаруживать до 0,025 мг лекарственного вещества. Сочетание с денситометрией позволяет увеличить чувствительность до10-7,а при использовании специальных пластинок для высокоэффективной тонкослойной хроматографии (ВЭТСХ) чувствительность достигает10-9.

Газо-жидкостная хроматография (ГЖХ) позволяет определять мик-

рограммовые и нанограммовые количества ЛС. Относительная погрешность метода + (8-15)%при содержании10-25нг/мл лекарственного вещества в биологической пробе. Метод ГЖХ обладает высокой разрешающей способностью, скоростью, точностью, эффективностью, наличием как специфических, так и универсальных детекторов.

Однако, способность большинства ЛС поглощать в УФ-диапазоне,термолабильность некоторых из них или необходимость получения более летучих производных – все это делает более пригодным для фармакокине-

тических исследований метод высокоэффективной жидкостной хромато-

графии (ВЭЖХ). Чувствительность ВЭЖХ определяется используемым прибором (оборудованием, детектором), а также свойствами анализируемого объекта и может достигать10-9.Благодаря большому количеству различных колонок метод обладает высокой селективностью и разделительной способностью. Это обусловило широкое внедрение метода в практику определения ЛС в биологических жидкостях.

Одним из современных методов анализа является хромато-масс-спектрометрия, в котороммасс-спектрометриспользуется как высокочувствительный детектор к газовому хроматографу (ГХ/МС – метод). Основ-

629

ное достоинство – чрезвычайно высокая чувствительнось, достигающая нескольких пикограммов (10-12).

Внастоящее время активно развивается новый эффективный метод количественного определения – капиллярный электрофорез (КЭФ). КЭФ объединяет различные электрофоретические и хроматографические процессы в единый метод разделения, позволяющий за несколько минут про-

вести воспроизводимые разделения с высоким разрешением при чувствительности до атоммольного уровня (10-18).Объем вводимой пробы составляет5-50нл. КЭФ прост в обслуживании и легко управляется, достигается быстрое разделение на сравнительно коротких колонках. Важным фактором является поддержание постоянства температуры в системе разделения, так как малейшее ее колебание приводит к резкому изменению времени удерживания веществ вследствие изменения вязкости буфера, рН, сопротивления в капилляре.

Для анализа малых концентраций ЛС и их метаболитов в биологических жидкостях широко применяются иммунохимические методы, которые отличаются высокой чувствительностью, специфичностью, простотой исполнения, позволяют одновременно анализировать большое число проб, не требуют дополнительной или специальной очистки пробы или концентрирования и поэтому очень удобны. В основе этих методов лежит специфическая реакция антител с молекулами определяемого вещества (гаптеном).

Фармакокинетика – раздел общей фармакологии, изучающий общие закономерности воздействия организма на лекарственное вещество.

Биодоступность – часть дозы лекарственного вещества, выраженная в процентах, которая достигла системного кровотока после внесосудистого введения.

! Биодоступность при внутривенном введении равна 100%

Биодоступность (F) определяют как отношение площади под фармакокинетической кривой (AUC) при любом пути введения к площади под фармакокинетической кривой при внутривенном введении и обозначают в процентах (рис. 2).

Константа скорости элиминации (обозначение — Ке1, размерность — ч-1, мин-1) — параметр, характеризующий скорость элиминации препарата из организма путем экскреции и биотрансформации. Константа скорости элиминации (k_el, мин^-1) – показывает, какая часть ЛС элиминируется из организма в единицу времени  Kel = A_выд/А_общ, где А_выд – количество ЛС, выделяемое в ед. времени, А_общ – общее количество ЛС в организме.

Значение k_el обычно находят путем решения фармакокинетического уравнения, описывающего процесс элиминации лекарства из крови, поэтому k_el называют модельным показателем кинетики. Непосредственного отношения к планированию режима дозирования k_el не имеет, но ее значение используют для расчета других фармакокинетических параметров.

Константа элиминации прямо пропорциональна клиренсу и обратно пропорционально объему распределения (из определения клиренса): Kel=CL/Vd; [Ke] = час^-1/мин^-1=доля в час.

Период полуэлиминации (t_½, мин) – это время, необходимое для снижения концентрации ЛС в крови ровно наполовину. При этом не играет роли каким путем достигается снижение концентрации – при помощи биотрансформации, экскреции или же за счет сочетания обоих процессов.

Период полуэлиминации определяют по формуле:

Период полувыведения – важнейший фармакокинетический параметр, позволяющий:

а) рассчитать время наступления равновесной концентрации (равно 5 периодам полуэлиминации)

б) определить время полной элиминации препарата

в) предсказать концентрацию ЛС в любой момент времени (для ЛС с кинетикой первого порядка)

Клиренс (Cl, мл/мин) - объем крови, который очищается от ЛС за единицу времени.

Т.к. плазма (кровь) - «видимая» часть объема распределения, то клиренс – фракция объема распределения, из которой лекарство выделяется в единицу времени. Если обозначить общее количество лекарства в организме через А_общ, а количество, которое выделилось через А_выд, то :

Сд ругой стороны, из определения объема распределения следует, что общее количество лекарства в организме составляетА_общ=V_dC_{тер/плазма}. Подставляя это значение в формулу клиренса, мы получим:

.

Таким образом, клиренс – отношение скорости выведения лекарственного средства к его концентрации в плазме крови.

В таком виде формулу клиренса используют для расчета поддерживающей дозы лекарства (D_п), т.е той дозы лекарственного средства, которая должна скомпенсировать потерю лекарства и поддержать его уровень на постоянном уровне:

Скорость введения = скорость выведения = ClC_тер (доза/мин)

D_п = скорость введения ( - интервал, между приемом лекарства)

Объем распределения вещества (кажущийся объем распределения) – объем жидкости, в котором должно распределиться вещество для создания концентрации, равной концентрации, создаваемой им в плазме крови при внутривенном введении и мгновенном распределении по организму.

Объем распределения – величина абстрактная. Она получается в результате фармакокинетических расчетов и служит интегральным показателем фармакокинетики. Объем распределения широко используется в методиках математического моделирования. Депонирование вещества приводит к увеличению кажущегося объема распределения. Неспособность вещества проходить через барьеры приводит к уменьшению этой величины.