Материал: 1 Выделение и анализ плазмидной ДНК
|
1,20 |
|
|
|
|
|
|
1,10 |
|
|
|
|
|
Интенсивность |
1,00 |
|
|
|
|
|
0,90 |
|
|
|
y = 0,2253ln(x) - 0,0863 |
||
|
|
|
|
|||
0,80 |
|
|
|
|
|
|
0,70 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
0,60 |
|
|
|
|
|
|
0,50 |
|
|
|
|
|
|
5,00 |
30,00 |
55,00 |
80,00 |
105,00 |
130,00 |
|
|
|
|
Масса, нг |
|
|
|
|
Стандарты |
1 |
2 |
log-аппроксимация |
|
Рисунок 3 – График аппроксимации зависимости массы от интенсивности свечения |
||||||
По результатам расчетов суммарное количество плазмидной ДНК было внесено
a)на дорожку с 1 мкл образца в количестве 26,7 нг;
b)на дорожку с 4 мкл образца в количестве 210,7 нг.
Впересчете на объем препарата концентрация ДНК составляет
a)в образце с 1-й дорожки 26,7 нг/мкл;
b)в образце со 2-й дорожки 52,7 нг/мкл.
Расхождение можно объяснить неточностью кривой аппроксимации и измерения интенсивности свечения.
Вывод: было проведено выделение и последующий анализ плазмидной ДНК. В результате анализа были получены следующие результаты:
1.Анализируемый препарат плазмидной ДНК, по всей видимости, представляет собой смесь двух форм плазмидной ДНК – релаксированной (oc) и суперскрученной (ccc);
2.Молекулярный вес исследуемых образцов составил 10,63 и 8,07 килобаз (1- й трек, 1-й и 2-й бэнд), 10,04 и 7,63 килобаз (2-й трек). Вероятно, первый бэнд на обеих дорожках соотвествует димерной форме плазмидной ДНК (за счет их большего размера);
3.Суммарное количество внесенной в гель плазмидной ДНК составило 26,7 нг на первый трек, и 210,7 нг на второй. В пересчете на общий объем внесенного препарата, концентрация ДНК в образце с 1-й дорожки составила 26,7 нг/мкл, со 2-й – 52,7 нг/мкл.
6