Метод
FISH- флуоресцентная гибридизация in situ -
включает следующие этапы: - создание
зондов - однонитевых фрагментов ДНК, к
которым присоединяют биотин или
дигоксигенин; - щелочная обработка
препаратов in situ с целью денатурации
хромосомной ДНК за счет разрыва водородных
связей между двумя цепями ДНК; -
гибридизация хромосомной ДНК сзондом
путем комплементарного связывания
зонда со специфической последовательностью
хромосомы; - обработка препаратов
веществами, которые избирательно
связываются с биотином и дигоксегенином;
для биотина таким веществом является
стрептовидин, для дигоксегенина -
антидигоксигениновое антитело; -
визуализация хромосом спомощью
люминесцентного микроскопа на фоне
неокрашенных хромосом