Курсовая работа (т): Физиологическая функция каудальной нейросекреторной системы

Глава 3. Влияние короткого пептида КНСС человека на системы органов

.1 Влияние короткого пептида КНСС на половую и репродуктивную систему крыс

Гистологические исследования и изучение массы внутренних половых органов крыс, участвующих при исследовании хронической токсичности короткого пептида КНСС человека свидетельствуют о значительных структурных их изменениях и снижении массы по сравнению с контрольными животными. ^[3]

Матка экспериментальных крыс по массе в сравнении с контролем уменьшена на 37,0±2,1% (р < 0,002), а яичники - на 23,0±1,7% (р < 0,001). Микроскопические исследования этих органов также показывают их отличие от контроля. Диаметр матки уменьшен на 28,75% за счет снижения толщины миометрия (миометрий тоньше на 34,57% в сравнении с контролем) и эндометрия (эндометрий у этих самок тоньше на 22,5%). В эндометрии экспериментальных самок диаметр маточных желез на 28,73% меньше, чем у контрольных. Значительно уменьшены ветвления желез эндометрия. Выстлан он кубическим эпителием. Секрет в железах отсутствует. В яичнике экспериментальных крыс имеется масса незрелых растущих фолликулов, определяемых в два раза больше, по сравнению с контролем, масса атретических и белых тел. Желтые тела находятся на стадии пролиферации и васкуляризации. Зрелых фолликулов и желтых тел не имеется. Примордиальных фолликулов в яичнике экспериментальных самок в 2,6 раза больше, чем у контрольных. У экспериментальных самцов масса предстательной железы Уменьшена в 1,35 раза, диаметр ветвления ее желез заметно снижен. Уменьшен диаметр ядер секреторного эпителия.

Таблица 1

Морфологические изменения во внутренних половых органах самок крыс при введении вазотонина-Н в дозе 25 мкг/кг ежедневно в течение 40 дней на примере матки

Таким образом, короткий пептид КНСС вызывает у экспериментальных крыс задержку развития гонад и созревания гоноцитов, а также признаки нарушения гормональной функции яичников и семенников. Это является причиной не только задержки открытия половой щели у самок, но также отставание соматического развития, заключающееся в заметном снижении массы экспериментальных самок и самцов по сравнению с контролем.

В связи со значительными изменениями в структуре гонад экспериментальных крыс, проведен эксперимент по выявлению у них возможности оплодотворения и репродуктивной функции, времени наступления беременности и плодовитости самок. Для этого были сформированы 4 группы животных по соответствующим клеткам:

- 1 самец и 5 самок, получавшие препарат в дозе 25мкг/кг в течение 40 дн.

- 1 самец, участвующий в эксперименте и 5 самок, не получавший короткий пептид КНСС человека^[3]

3 - 1 самец, не получавший и 5 самок, получавших препарат в дозе 25 мкг/кг

- 1 самец и 5 самок, не получавших данный препарат.

За животными велись активные наблюдения, отмечено, что в течение 4,5 месяцев не беременели и не приносили потомства группы, находящиеся в клетках 1, 2, 3. Контрольный вариант за данный период времени дал 2 потомства. Еще через 4,5 месяца экспериментальные самки стали приносить нормально здоровое потомства, но количество крысят у них было в 2-3 раза меньше, чем у контроля. У крыс 2-3 поколения не было никаких уродств, и по срокам развития и плодоношения они не отличались.

Таблица 2

Влияние вазотонина Н на сроки первых родов и плодовитость белых крыс

Таблица 3

Сроки наступления родов и плодовитость 2-го и 3-го поколения крыс, родившихся от экспериментальных животных

Таким образом, следует отметить, что короткий пептид КНСС вызывает длительный, но обратимый контрацептивный эффект у крыс обоего пола. При этом пептид не обладает тератогенными свойством, не вызывает эмбриологических и генетических нарушений.

.2 Влияние короткого пептида КНСС человека на сердечно-сосудистую систему

Наиболее простой экспериментальной моделью для исследования кардиотонического эффекта является сердце лягушки. Исследование проводилось по М.П. Березину. Давление перфузионной жидкости при этом устанавливается на уровне 15 см водяного столба. Канюля вводится в заднюю полую вену. Исследуемый пептид разных доз растворяется в 0,9% растворе хлорида натрия, вводится в резиновую манжету, соединенную с манжетой. Анализ, полученных эффектов свидетельствует, что по мере увеличения дозы препарата в перфузате частота и амплитуда сокращения сердца заметно возрастают, уменьшается латентный период и увеличивается продолжительность кардиотонических эффектов. Пептид оказывает на сердце лягушки положительное хроно- и инотропное действие. Сопоставление степени увеличения частоты сердечных сокращений в 1 минуту и нарастание амплитуды его сокращений свидетельствует, что при дозе 8 мкг/ мл препарата выражен в два раза больше, чем частота его сокращений. Иначе говоря, короткий пептид оказывает выраженный кардиотонический эффект, являющийся в эффективной работе сердца в систоле и достаточном времени отдыха в диастоле.

Влияние короткого пептида КНСС человека на электрокардиограмму крыс при однократном его введении в дозе 25 мкг/кг

Для выявления влияния изучаемого короткого пептида исследование проводилось на 14 белых крысах (6 самцов и 8 самок). Перфузат вводился в брюшную вену. Запись ЭКГ проводилась на двухканальном чернильно - пишущем электрокардиографе. Данные эксперимента свидетельствуют, что короткий пептид КНСС человека в дозе 25 мкг/кг приводит к ускорению сердечных сокращений у животных обоего пола. При этом тахикардия у самцов по сравнению с исходной возрастает на 20,2%, а у самок - 27,2%

Рис. 1. Влияние короткого пептида КНСС человека на чистоту сердечных сокращений крыс самцов (ряд 1), самок (ряд 2)

Исследование электрокардиограммы крыс свидетельствует, что после подкожного введения исследуемого пептида наблюдается изменение ряда показателей. Изменение показателей у экспериментальных крыс после подкожного введения короткого пептида человека в дозе 25 мкг/кг, связано с увеличение транспорта ионов кальция через специфические каналы атипических кардиомицетов с ускорением проведения им пульса по проводящей системе сердца. Изучение вазоактивного эффекта V-H производят минимум на двух объектах: кровеносных сосудах брыжейки и перепонки лапок лягушки на изолированных ушах кролика.^[3]

.3 Влияние короткого пептида КНСС человека на системное артериальное давление на примере котов и кроликов

Исследование действия короткого пептида КНСС человека на системное артериальное давление изучалось в остром опыте на 36 самках кроликов массой 2500 г и на кошках 12 самцах малого 200+150 под уретановым наркозом. Наркотическое вещество вводилось внутрибрюшинно в виде 10% раствора на дистиллированной воде. Исследуемый пептид растворялся в разных дозах в 0,5 мл 9%-го раствора хлорида натрия и вводился в бедренную вену со скоростью 0,1 мл/с. Регистрация артериального давления производилось с помощью ртутного манометра, соединенного резиновой трубкой с канюлей, введённой в общую сонную артерию. Запись показаний артериального давления осуществлялась на электрокимографе при помощи писчика манометра. Каждая последующая доза препарата вводилась не ранее, чем через 5 минут после установления артериального давления на исходных цифрах после предыдущего эффекта.

Короткий пептид КНСС человека исследовался в остром опыте на кошках и кроликах, которым он вводился внутривенно в дозах 4,8,16,32 мкг/кг. В ходе опыта регистрировалось артериальное и амплитуда пульсовой волны после введения каждой дозы пептида. Полученные научные факты свидетельствуют, что после инъекции исследуемого пептида наблюдалось закономерное повышение артериального давления и увеличение пульсовой волны, величина которых и время действия зависят от вводимой дозы пептида.

Таким образом, внутривенное введение короткого пептида КНСС человека вызывает у экспериментальных животных повышение системного артериального давления и амплитуды пульсовой волны, которое зависит от вводимого препарата.

Таблица 4

Влияние короткого пептида КНСС человека на показатели артериального давления и острых опытах на кроликах

При этом полученные научные факты свидетельствуют о более выраженном возрастании амплитуды пульсовой волны в сравнении с показателями системного артериального давления, что, несомненно, зависит от преимущественного влияния изучаемого пептида на силу сокращения сердца, что описывалось выше.

.4 Влияние короткого пептида КНСС человека в регуляции иммунитета и стресса

Попутное исследование В.С. Бахтиновой влияния короткого пептида КНСС человека (V-H) на массу тимуса, печени, почки, сердца и органов мишеней половых стероидов - матки, яичников, тестикулов, простаты, метаболической мышцы, свидетельствуют об уменьшении массы тимуса, увеличение массы печени, почек и сердца у экспериментальных крыс, косвенно указывает на два эффекта, опосредуемых через специфические рецепторы: участие короткого пептида в регуляции метаболизма, участие в адаптационных процессах стресс - реакции. На последний процесс указывал А.П. Бахтинов (1997), который повышение тонусов сосудов связывал с наличием в них специфических рецепторов уротензина, а изменение иммунореактивности в крови студентов перед экзаменами и зачетами - с частием этого пептида в стрессовых реакциях и адаптации. Ряд научных исследований косвенно свидетельствует об участии уротензина 2 в развитии стресс - реакции. В частности Balment в 1998 гоуд опубликовал факты, свидетельствующие о стимуляции уротензином 2 стероидной активности АКТГ у камбалы, выражающейся в секреции кортизола.

В связи с влияние уротензина 2-короткого пептида КНСС человека н организм экспериментальных животных С.А. Лушкина в 2004 году провела ряд опытов с гиперволемией и экспериментальным стрессором - Антиортастатическое плаванием белых мышей в сочетании с введение короткого пептида КНСС человека и без него, а также с введение им по 1 мл 0,9% ного раствора хлорида натрия.

Сравнивая изменение массы тимуса мышей летом и в покое и после плавания при получении им короткого пептида КНСС человека также отмечается, что в покое у самцов тимус уменьшается в 1,6 раза, а у самок в 1,41 раза, что согласуется тоже с большей устойчивостью самок к стрессу.

Антиортастатическое плавание способствует росту количества телец Гассаля преимущественно у самок, получивших физраствор и июле и январе, а также летом после получения короткого пептида КНСС человека. Эти наблюдения свидетельствуют о влиянии на стресс и адаптацию как водно-солевой нагрузки, так и введении короткого пептида КНСС человека.

Сезонные различия степени стресса в летний и зимний периоды, вероятно, объясняются тем, что мышевидные грызуны наиболее активны в сумеречное время суток и наименее активны в дневное время.

В связи с указанием В.С. Бахтиновой (1986), что на введение крысам препарата V-H реагирует щитовидная железа, и попутно был исследован этот орган. После введения подкожно пептида в количестве 25 мкг/кг растворенного в физрастворе, наблюдались некоторые различия в структуре этой железы и надпочечников. Таким образом, анализ структуры изучаемых органов и желез беспородных крыс показал, что спустя 3 часа после первого получения пептида КНСС человека у них возникает компенсаторный рост толщины пучкового и сетчатого слоев надпочечников и структуры щитовидной железы, что связывается с влиянием изучаемого пептида на стресс.

.5 Влияние короткого пептида КНСС человека на работоспособность мышц

Исследования С.А. Лушкиной (2004) свидетельствуют, что при плавании мышей в артиортастатическом положении, утомление наступало у самцов и самок быстрее зимой при получении изотонического раствора хлорида натрия по сравнению с животными обоего пола, получавшим короткий пептид КНСС человека, более чем в 2 раза, а летом - наоборот, исследуемый пептид снижал работоспособность (время плавания до утомления) как у самок так и самцов. При этом у самцов утомляемость наступала в сравнении с животными, получавших только изотонический раствор хлорида натрия, в 3,28 раза, а у самок при тех же условиях - в 1,76 раза.

Таблица 5

Время плавания мышей до утомления в антиортастатическом положении на фоне вводимых веществ, мин.

каудальный нейросекреторный человек животное

Глава 4. Этологическое исследование «Наблюдение поведенческих реакций самок мышей»

Изучение индивидуального поведения лабораторных животных имеет значение в определении реакции нервной системы у них как при стрессе, так и при воздействии различных химических и физических факторов (Литвинов, 1990; С.С. Крылов, 1995; О.В. Перепелкина, 1998; Л.И. Бугаева с соавт., 1999 и др.).

С.А. Лушкина (2004) для этого использовала тест “открытое поле” (В.П. Пошивалов, 1982), где учитываются не только объем и структура поведения, но и вероятность перехода одних паттернов в другие, что позволяет учесть тонкие различия эффектов исследуемых веществ и факторов (А.В. Колуев, 2001). В этом эксперименте индивидуальное поведение животных реализуется в виде графических структур. При этом изменение паттернов можно рассматривать как изменение или нарушение поведения, обусловленные психогенными факторами (Т.И. Белова с соавт., 1985).